| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·真菌 -淀粉酶 | 第7-8页 |
| ·真核表达系统 | 第8-9页 |
| ·麦芽寡糖 | 第9-13页 |
| ·麦芽寡糖的理化性质 | 第9页 |
| ·麦芽寡糖的制备方法 | 第9-11页 |
| ·麦芽寡糖的分离方法 | 第11-12页 |
| ·麦芽寡糖的应用 | 第12-13页 |
| ·麦芽三糖及其生产现状 | 第13-14页 |
| ·本课题的立题依据及研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·菌种和质粒 | 第15页 |
| ·仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-23页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第17-18页 |
| ·扣囊复膜酵母染色体 DNA 的提取 | 第18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞转化 | 第18页 |
| ·扣囊复膜酵母α-淀粉酶基因的 PCR 扩增 | 第18-19页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第19页 |
| ·巴斯德毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母电转化法 | 第19页 |
| ·重组酵母的筛选 | 第19页 |
| ·重组菌摇瓶发酵 | 第19页 |
| ·重组菌的上罐发酵 | 第19-20页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第20页 |
| ·重组酶的分离纯化 | 第20-21页 |
| ·重组酶的酶学性质分析 | 第21页 |
| ·酶解产物 HPLC 分析 | 第21页 |
| ·麦芽寡糖的制备工艺优化 | 第21页 |
| ·麦芽三糖的分离 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-41页 |
| ·α-淀粉酶基因在毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母中的表达 | 第23-30页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第23页 |
| ·表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·重组酵母的构建与筛选 | 第24-26页 |
| ·重组酵母的摇瓶发酵实验 | 第26-27页 |
| ·重组乳酸克鲁维酵母发酵培养基的优化 | 第27-29页 |
| ·重组酵母上罐发酵实验 | 第29-30页 |
| ·重组酶酶学性质研究 | 第30-36页 |
| ·重组酶的分离纯化 | 第30-33页 |
| ·温度对重组酶酶活力和酶稳定性的影响 | 第33页 |
| ·pH 对重组酶酶活力和酶稳定性的影响 | 第33-34页 |
| ·金属离子和 EDTA 对重组酶酶活力的影响 | 第34-35页 |
| ·重组酶的 Km值和 Vmax值 | 第35页 |
| ·重组酶底物水解特性 | 第35-36页 |
| ·以麦芽三糖为主的麦芽寡糖的制备工艺 | 第36-41页 |
| ·重组酶作用可溶性淀粉酶解产物 HPLC 分析 | 第36-37页 |
| ·重组酶作用糊精酶解产物进程 | 第37页 |
| ·以麦芽三糖为主的麦芽寡糖的制备工艺优化 | 第37-38页 |
| ·以麦芽三糖为主的麦芽寡糖的制备工艺放大实验 | 第38-39页 |
| ·麦芽三糖的分离 | 第39-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 主要结论 | 第41-42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |