| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-29页 |
| ·立题的背景和意义 | 第11-12页 |
| ·变形杆菌属的简介 | 第12-14页 |
| ·变形杆菌属生物学性状 | 第12-13页 |
| ·变形杆菌属的抗原构造 | 第13页 |
| ·变形杆菌属的毒力因子 | 第13-14页 |
| ·变形杆菌属的致病性及临床表现 | 第14页 |
| ·变形杆菌属的检测研究现状 | 第14-18页 |
| ·变形杆菌属的国标检测方法 | 第14-15页 |
| ·变形杆菌属的传统检测方法 | 第15页 |
| ·基于生化反应的检测方法 | 第15-17页 |
| ·基于血清学的检测方法 | 第17页 |
| ·尿素酶快速试纸法 | 第17页 |
| ·全自动仪器分析系统检测法 | 第17页 |
| ·变形杆菌的PCR 检测方法 | 第17-18页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP)技术及应用 | 第18-28页 |
| ·LAMP 方法的概述 | 第18页 |
| ·LAMP 方法的特点 | 第18-19页 |
| ·LAMP 方法的引物设计 | 第19-21页 |
| ·LAMP 方法的基本原理 | 第21-25页 |
| ·LAMP 的反应体系 | 第25页 |
| ·LAMP 反应产物的检测方法 | 第25-26页 |
| ·LAMP 方法在食品安全检测中的应用 | 第26-28页 |
| ·研究内容 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·试验材料 | 第29-31页 |
| ·试验菌株 | 第29页 |
| ·仪器与设备 | 第29页 |
| ·主要培养基 | 第29-30页 |
| ·样品与生化试剂 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-33页 |
| ·变形杆菌属的培养 | 第31页 |
| ·变形杆菌属基因组DNA 的提取 | 第31-33页 |
| ·引物设计、体系和操作程序 | 第33-34页 |
| ·LAMP 引物设计 | 第33页 |
| ·LAMP 和PCR 反应体系 | 第33-34页 |
| ·LAMP 和PCR 操作程序 | 第34页 |
| ·LAMP 产物的检测 | 第34页 |
| ·LAMP 产物的可视结果 | 第34页 |
| ·凝胶成像方法检测LAMP 产物 | 第34页 |
| ·LAMP 产物酶切结果分析鉴定 | 第34页 |
| ·LAMP 检测条件优化 | 第34-36页 |
| ·适宜Mg~(2+)浓度选择 | 第34-35页 |
| ·dNTPs 浓度的优化 | 第35页 |
| ·反应温度的优化 | 第35页 |
| ·引物添加量的优化 | 第35页 |
| ·引物缺省试验 | 第35页 |
| ·反应时间的优化 | 第35-36页 |
| ·BST 酶的优化 | 第36页 |
| ·引物特异性的检测 | 第36页 |
| ·变形杆菌属的灵敏度检测 | 第36页 |
| ·LAMP 检测变形杆菌属纯培养的灵敏度 | 第36页 |
| ·PCR 检测变形杆菌属纯培养的灵敏度 | 第36页 |
| ·人工污染猪肉中变形杆菌属基因组 DNA 提取方法比较 | 第36-39页 |
| ·普通热裂解的方法 | 第36-37页 |
| ·化学试剂法 | 第37页 |
| ·蛋白酶 K 法 | 第37-38页 |
| ·试剂盒法（TaKaRa MiniBEST Bacterial Genomic DNA Extraction Kit Ver.2.0） | 第38-39页 |
| ·人工污染猪肉的检出限 | 第39-40页 |
| ·人工污染猪肉及模板DNA 的制备 | 第39页 |
| ·LAMP 法检测人工污染变形杆菌属样品的检出限 | 第39页 |
| ·PCR 法检测人工污染样品的检出限 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-50页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第40-44页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第40页 |
| ·dNTPs 浓度的优化 | 第40-41页 |
| ·反应温度的优化 | 第41页 |
| ·引物添加量的优化 | 第41-42页 |
| ·引物缺省试验 | 第42页 |
| ·反应时间的优化 | 第42-43页 |
| ·BST 酶的优化 | 第43-44页 |
| ·LAMP 扩增产物的分析 | 第44-45页 |
| ·LAMP 扩增的可视结果分析 | 第44页 |
| ·LAMP 扩增产物的电泳分析 | 第44-45页 |
| ·LAMP 扩增产物的电泳分析酶切 | 第45页 |
| ·引物特异性的研究 | 第45-46页 |
| ·PCR 产物测序 | 第46-47页 |
| ·变形杆菌属纯培养灵敏度的研究 | 第47-48页 |
| ·LAMP 检测变形杆菌属的灵敏度 | 第47页 |
| ·PCR 检测变形杆菌属的灵敏度 | 第47-48页 |
| ·LAMP 检测人工污染的变形杆菌属DNA 提取方法比较 | 第48页 |
| ·人工污染猪肉中变形杆菌属检出限的研究 | 第48-50页 |
| ·LAMP 检测人工污染猪肉中变形杆菌属的检出限 | 第48-49页 |
| ·PCR 检测人工污染猪肉中变形杆菌属的检出限 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP)方法检测变形杆菌属方法学评价 | 第50页 |
| ·靶基因的选择 | 第50-51页 |
| ·LAMP 引物的确定 | 第51页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第51-52页 |
| ·Mg~(2+)的浓度 | 第51页 |
| ·DNA 聚合酶 | 第51-52页 |
| ·退火温度对LAMP 的影响 | 第52页 |
| ·LAMP 方法与PCR 方法的比较 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
