降解半纤维素嗜热菌的筛选及耐热木聚糖酶的性质
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·生物质能 | 第11页 |
| ·发展生物质能的意义 | 第11-12页 |
| ·经济意义 | 第11-12页 |
| ·环境保护意义 | 第12页 |
| ·社会意义 | 第12页 |
| ·国内外生物质能利用状况 | 第12-13页 |
| ·半纤维素降解菌和半纤维素酶的研究进展 | 第13-21页 |
| ·半纤维素与利用半纤维素的微生物 | 第13-14页 |
| ·半纤维素酶组份 | 第14页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的结构功能特性 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的作用机制 | 第16-17页 |
| ·耐热木聚糖酶的研究现状 | 第17-18页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第18-20页 |
| ·木聚糖酶研究存在的问题 | 第20-21页 |
| ·本研究的选题背景与目的 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·半纤维素制备 | 第23页 |
| ·样品 | 第23页 |
| ·菌种和载体 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| ·基本方法 | 第24-26页 |
| ·细菌基因组总DNA的提取 | 第24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR产物回收与纯化 | 第24-25页 |
| ·回收产物的连接反应 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·质粒小量提取 | 第25-26页 |
| ·重组克隆质粒的双酶切验证 | 第26页 |
| ·核酸序列测定与分析 | 第26页 |
| ·嗜热半纤维素降解菌的筛选以及产酶条件分析 | 第26-32页 |
| ·嗜热菌的分离与鉴定 | 第26-27页 |
| ·菌株活性的比较 | 第27页 |
| ·粗酶液的提取 | 第27-28页 |
| ·酶活的测定 | 第28-30页 |
| ·菌株发酵条件的研究 | 第30页 |
| ·酶学性质测定 | 第30-32页 |
| ·酶谱分析 | 第32页 |
| ·热稳定木聚糖酶基因的克隆、重组表达 | 第32-34页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·热稳定木聚糖酶基因的表达与纯化 | 第33-34页 |
| ·热稳定木聚糖酶的酶学性质分析 | 第34页 |
| ·重组木聚糖酶的生物信息学分析以及同源建模 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-61页 |
| ·降解半纤维素嗜热菌的分离与鉴定 | 第35-38页 |
| ·半纤维素降解菌的分离 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第35页 |
| ·革兰氏染色结果 | 第35-36页 |
| ·16S rDNA的鉴定与系统发育分析 | 第36-38页 |
| ·嗜热菌表型特征 | 第38页 |
| ·热稳定木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第38-47页 |
| ·木聚糖降解菌的筛选与鉴定 | 第38-41页 |
| ·菌株发酵产酶条件分析 | 第41-43页 |
| ·热稳定木聚糖酶基因的克隆 | 第43-46页 |
| ·热稳定木聚糖酶基因的重组表达和纯化 | 第46-47页 |
| ·热稳定木聚糖酶的酶学性质 | 第47-52页 |
| ·木聚糖酶的最适温度与温度耐受性 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶的最适pH与pH耐受性 | 第48-50页 |
| ·酶抑制剂或去污剂对木聚糖酶活性的影响 | 第50页 |
| ·金属离子对木聚糖酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·粗酶酶谱 | 第51-52页 |
| ·木聚糖酶基因的结构分析与分子建模 | 第52-61页 |
| ·木聚糖酶一级结构特点 | 第52-56页 |
| ·木聚糖酶二级结构分析 | 第56-57页 |
| ·木聚糖酶三级结构预测 | 第57-61页 |
| 4 讨论 | 第61-67页 |
| ·半纤维素的生物转化 | 第61-62页 |
| ·嗜热半纤维降解菌的筛选 | 第62页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第62-63页 |
| ·木聚糖重组酶和粗酶的酶学性质 | 第63页 |
| ·木聚糖酶的生物信息学分析 | 第63-67页 |
| 5 结论与展望 | 第67-68页 |
| ·结论 | 第67页 |
| ·展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
