赭曲霉毒素A的单克隆抗体制备及胶体金检测方法研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-22页 |
| 1 赭曲霉毒素A概述 | 第8-11页 |
| ·赭曲霉毒素A简介 | 第8页 |
| ·OTA的产生菌和毒理 | 第8-10页 |
| ·OTA限量标准 | 第10-11页 |
| 2 赭曲霉毒素A检测方法研究进展 | 第11-14页 |
| ·前处理方法 | 第11-13页 |
| ·仪器分析法 | 第13页 |
| ·免疫学方法 | 第13-14页 |
| 3 胶体金技术概述 | 第14-19页 |
| ·免疫胶体金技术的基本原理 | 第14-15页 |
| ·胶体金的制备、标记和纯化 | 第15-17页 |
| ·试纸条的结构和原理 | 第17-18页 |
| ·胶体金技术在食品安全检测领域的应用现状及前景 | 第18-19页 |
| 4 本课题的研究内容和技术路线 | 第19-22页 |
| ·本课题的研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 OTA人工抗原的合成与鉴定 | 第22-28页 |
| 1 材料与方法 | 第22-24页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| 2 结果 | 第24-26页 |
| ·紫外扫描及偶联比估算结果 | 第24-25页 |
| ·偶联物的浓度 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 OTA单克隆抗体的制备与鉴定 | 第28-41页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第28-29页 |
| ·实验动物与细胞 | 第29页 |
| ·主要溶液系统 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·动物免疫 | 第30-31页 |
| ·间接ELISA检测抗血清及单抗效价方法的建立 | 第31-32页 |
| ·间接竞争ELISA抑制试验筛选阳性孔 | 第32页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第32页 |
| ·细胞融合与阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| ·细胞冻存及复苏 | 第33页 |
| ·单克隆抗体的制各 | 第33页 |
| ·单克隆抗体间接ELISA效价的测定 | 第33-34页 |
| ·单抗亚型的鉴定 | 第34页 |
| ·腹水中抗体蛋白含量的测定 | 第34页 |
| ·OTA标准抑制曲线的绘制 | 第34页 |
| ·单抗交叉反应性 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-38页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第34-35页 |
| ·免疫小鼠抗OTA血清效价 | 第35-36页 |
| ·抑制试验结果 | 第36页 |
| ·细胞融合及亚克隆 | 第36-37页 |
| ·腹水单抗制备、抗体效价及分型测定 | 第37页 |
| ·直接竞争ELISA法标准抑制曲线的绘制 | 第37-38页 |
| ·单抗交义反应性测定 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·免疫方式 | 第38-39页 |
| ·细胞融合 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存及复苏 | 第39页 |
| ·单克隆抗体的大量制备及纯化 | 第39-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 OTA金标免疫层析试剂盒的制备 | 第41-52页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第41页 |
| ·主要溶液系统 | 第41-43页 |
| ·器具的处理 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-48页 |
| ·胶体金的制备 | 第43页 |
| ·胶体金的鉴定 | 第43-44页 |
| ·金标抗体的制备及纯化 | 第44-45页 |
| ·玻璃纤维膜和硝酸纤维素膜的包被 | 第45页 |
| ·金标免疫层析试剂盒的组装 | 第45-46页 |
| ·试剂盒的检测方法及结果判定 | 第46-47页 |
| ·金标免疫层析试剂盒的性能测定 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-50页 |
| ·胶体金的制备 | 第48页 |
| ·胶体金标记单抗结果 | 第48-49页 |
| ·金标免疫层析试剂盒的性能鉴定 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 第五章 主要结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 个人简介 | 第58页 |
