| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 纤维素乙醇的研究概况 | 第10-13页 |
| 1.1.1 纤维素乙醇的发展现状 | 第10-11页 |
| 1.1.2 纤维素乙醇发展面临的挑战 | 第11-13页 |
| 1.2 利用戊糖发酵生产乙醇的菌株 | 第13-16页 |
| 1.2.1 酿酒酵母 | 第13-14页 |
| 1.2.2 马克斯克鲁维酵母 | 第14页 |
| 1.2.3 其他非常规酵母 | 第14-16页 |
| 1.3 戊糖代谢途径 | 第16-18页 |
| 1.3.1 木糖代谢途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2 阿拉伯糖代谢途径 | 第17-18页 |
| 1.4 马克斯克鲁维酵母的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.4.1 发酵性能的研究 | 第18-19页 |
| 1.4.2 戊糖发酵性能差异的研究 | 第19-21页 |
| 1.4.3 基因工程改造酵母 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题的研究内容及研究意义 | 第22-24页 |
| 2 马克斯克鲁维酵母的戊糖发酵性能比较 | 第24-40页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料 | 第24-26页 |
| 2.2.1 菌株 | 第24页 |
| 2.2.2 化学试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.3 培养基 | 第25页 |
| 2.2.4 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.3.1 菌株培养及发酵条件 | 第26页 |
| 2.3.2 DNS比色法测定还原糖 | 第26页 |
| 2.3.3 分析方法 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-38页 |
| 2.4.1 六株马克斯克鲁维酵母的发酵性能比较 | 第27-30页 |
| 2.4.2 三株菌的低浓度戊糖发酵结果 | 第30-32页 |
| 2.4.3 三株菌的高浓度木糖发酵结果 | 第32-34页 |
| 2.4.4 三株菌的高浓度阿拉伯糖发酵结果 | 第34-35页 |
| 2.4.5 三株菌的混合糖发酵结果 | 第35-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-40页 |
| 3 马克斯克鲁维酵母戊糖发酵性能差异的分析 | 第40-59页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 材料 | 第40-43页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第40页 |
| 3.2.2 培养基 | 第40页 |
| 3.2.3 引物 | 第40-41页 |
| 3.2.4 试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.5 主要实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.3.1 引物设计及序列比对 | 第43页 |
| 3.3.2 酵母基因组的提取 | 第43-44页 |
| 3.3.3 PCR法扩增戊糖代谢途径中关键酶基因 | 第44页 |
| 3.3.4 代谢途径关键酶基因表达量的测定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 细胞代谢淬灭 | 第45页 |
| 3.3.6 胞内代谢物提取 | 第45页 |
| 3.3.7 LC-MS分析与测定方法 | 第45-46页 |
| 3.3.8 胞外代谢物检测分析 | 第46页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第46-57页 |
| 3.4.1 木糖代谢途径中关键酶编码基因的克隆及序列比对 | 第46-48页 |
| 3.4.2 阿拉伯糖代谢途径中关键酶编码基因测序比对结果 | 第48-49页 |
| 3.4.3 转录水平上分析其发酵差异的原因 | 第49-50页 |
| 3.4.4 马克斯克鲁维酵母胞内物含量测定方法的建立 | 第50-52页 |
| 3.4.5 马克斯克鲁维酵母发酵周期中胞内代谢物分析 | 第52-57页 |
| 3.5 小结 | 第57-59页 |
| 4 关键基因过表达提高马克斯克鲁维酵母乙醇产率 | 第59-76页 |
| 4.1 引言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验材料 | 第60-61页 |
| 4.2.1 菌株 | 第60页 |
| 4.2.2 引物 | 第60页 |
| 4.2.3 主要化学试剂 | 第60-61页 |
| 4.2.4 培养基 | 第61页 |
| 4.2.5 主要试验仪器 | 第61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-66页 |
| 4.3.1 过表达载体的构建 | 第61-63页 |
| 4.3.2 E.coli质粒提取方法 | 第63页 |
| 4.3.3 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备与转化 | 第63-64页 |
| 4.3.4 马克斯克鲁维酵母的转化 | 第64-66页 |
| 4.3.5 酵母基因组的提取 | 第66页 |
| 4.3.6 分析方法 | 第66页 |
| 4.4 结果与分析 | 第66-74页 |
| 4.4.1 XK基因的过表达 | 第66-71页 |
| 4.4.2 XDH基因的过表达 | 第71-72页 |
| 4.4.3 XK基因过表达菌株的发酵性能 | 第72-73页 |
| 4.4.4 XDH基因过表达菌株的发酵性能 | 第73-74页 |
| 4.5 小结 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录A PGK基因序列 | 第84-85页 |
| 附录B rDNA基因序列 | 第85-87页 |
| 附录C pFA6a-KanMX4质粒基因序列 | 第87-90页 |
| 附录D 戊糖代谢途径中五种关键酶编码氨基酸序列比对结果 | 第90-95页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
