| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·本课题的研究背景 | 第11-20页 |
| ·L-苯丙氨酸的理化性质 | 第11页 |
| ·苯丙氨酸的功能 | 第11页 |
| ·苯丙氨酸的应用 | 第11-12页 |
| ·食品添加剂 | 第11-12页 |
| ·抗癌药物中间体 | 第12页 |
| ·合成阿斯巴甜 | 第12页 |
| ·苯丙氨酸的合成 | 第12-15页 |
| ·发酵法 | 第12页 |
| ·酶法 | 第12-14页 |
| ·化学合成法 | 第14-15页 |
| ·提取法 | 第15页 |
| ·基因工程的应用 | 第15-17页 |
| ·基因工程 | 第15-16页 |
| ·基因工程的基本原理 | 第16页 |
| ·基因工程的基本过程 | 第16-17页 |
| ·基因工程的发展与应用 | 第17页 |
| ·基因工程技术在 L-苯丙氨酸生产上的研究进展 | 第17-20页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第20页 |
| ·本论文的研究内容及实验方案设计 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·实验方案设计 | 第20-21页 |
| 第二章 AspC 基因获取及高表达天冬氨酸转氨酶工程菌的构建 | 第21-36页 |
| ·前言 | 第21-24页 |
| ·天冬氨酸转氨酶的遗传基因 | 第21页 |
| ·表达载体对基因工程菌的影响 | 第21-22页 |
| ·宿主细胞对基因工程菌的影响 | 第22-23页 |
| ·本实验设计路线 | 第23-24页 |
| ·实验材料和方法 | 第24-29页 |
| ·实验器材 | 第24-25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·分子克隆操作及方法 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·质粒快检方法 | 第27页 |
| ·酶活测定方法 | 第27页 |
| ·底物转化试验 | 第27-28页 |
| ·苯丙酮酸浓度测定 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-35页 |
| ·aspC 基因的调取 | 第29页 |
| ·aspC基因的克隆及重组表达载体的鉴定 | 第29-30页 |
| ·宿主与载体的选择 | 第30-31页 |
| ·质粒拷贝数快检 | 第31-32页 |
| ·生长曲线与产酶曲线 | 第32-33页 |
| ·转化与辅酶依赖性的检测 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第33-35页 |
| ·结论 | 第35-36页 |
| 第三章 摇瓶发酵条件优化及转化条件优化 | 第36-63页 |
| ·前言 | 第36-39页 |
| ·基因工程菌发酵的特点 | 第36-37页 |
| ·基因工程菌发酵条件优化 | 第37-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-44页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验试剂 | 第40-41页 |
| ·质粒与菌株 | 第41页 |
| ·摇瓶发酵产酶条件优化研究 | 第41-42页 |
| ·天冬氨酸转氨酶酶活测定方法 | 第42页 |
| ·天冬氨酸转氨酶制备 L-Phe 转化的条件优化 | 第42-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-62页 |
| ·重组菌发酵条件优化 | 第44-55页 |
| ·生长曲线和产酶曲线的绘制 | 第55-56页 |
| ·天冬氨酸转氨酶酶活性质及其转化底物制备L-Phe 的研究 | 第56-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第四章 结论与展望 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| ·展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-72页 |
| 致谢 | 第72页 |