| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 第1章 引言 | 第15-26页 |
| ·对虾白斑综合征病毒(WSSV)研究现状 | 第15-21页 |
| ·对虾白斑综合征病毒(WSSV)的基本特征 | 第15-16页 |
| ·对虾白斑综合征病毒(WSSV)的功能基因研究 | 第16-20页 |
| ·基于VP28蛋白的抗WSSV免疫防治研究 | 第20-21页 |
| ·无脊椎动物免疫系统的研究进展 | 第21-25页 |
| ·先天性免疫系统 | 第21-22页 |
| ·适应性免疫系统 | 第22-25页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第2章 重组菌株B.subtilis-VP28对凡纳对虾体液免疫因子的影响 | 第26-41页 |
| ·实验材料和仪器 | 第26-28页 |
| ·实验对虾 | 第26-27页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-35页 |
| ·芽孢工程菌B.subtilis-VP28制备及纯化 | 第28-29页 |
| ·实验虾料制备 | 第29页 |
| ·口服免疫实验 | 第29-30页 |
| ·攻毒实验 | 第30页 |
| ·WSSV的PCR检测 | 第30页 |
| ·血清免疫指标的测定 | 第30-31页 |
| ·数据处理 | 第31页 |
| ·免疫基因的荧光定量 | 第31-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·重组菌株B.subtilis-VP28的抗WSSV保护效果 | 第35-36页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾血清免疫因子的影响 | 第36-37页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾免疫基因的影响 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾抗WSSV感染的保护效果 | 第38页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾血清免疫因子的影响 | 第38-39页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾免疫基因表达的影响 | 第39-41页 |
| 第3章 重组菌株B.subtilis-VP28对凡纳对虾血淋巴细胞特异性吞噬的研究 | 第41-51页 |
| ·实验材料和仪器 | 第41-43页 |
| ·实验病毒和菌种 | 第41-42页 |
| ·实验对虾 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·实验主要试剂配制 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·实验虾料制备 | 第43页 |
| ·口服免疫实验 | 第43页 |
| ·对虾血细胞的分离 | 第43-44页 |
| ·抗原荧光标记 | 第44页 |
| ·细胞吞噬实验 | 第44-45页 |
| ·数据处理 | 第45页 |
| ·结果分析 | 第45-49页 |
| ·B.subtilis-VP28对血细胞吞噬WSSV的影响 | 第45-46页 |
| ·B.subtilis-VP28引发的血细胞特异性吞噬WSSV的分析 | 第46-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·B.subtilis-VP28对凡纳对虾血细胞吞噬活性的影响 | 第49页 |
| ·B.subtilis-VP28引发凡纳对虾血细胞特异性吞噬WSSV的研究 | 第49-51页 |
| 第4章 凡纳对虾Dscam选择性剪接外显子位点及可变区序列分析 | 第51-62页 |
| ·实验材料和仪器 | 第51-53页 |
| ·实验对虾 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂配制 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·对虾血细胞总RNA的抽提及检测 | 第53页 |
| ·cDNA的合成和检测 | 第53页 |
| ·目的片段的获取 | 第53-54页 |
| ·DNA 5’末端磷酸化 | 第54-55页 |
| ·目的片段的克隆 | 第55-56页 |
| ·阳性克隆子测序 | 第56页 |
| ·生物信息学分析 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-60页 |
| ·总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·基因组DNA污染检测 | 第57页 |
| ·目的片段PCR扩增 | 第57-58页 |
| ·菌液PCR验证 | 第58-59页 |
| ·LvDscam选择性外显子位点鉴别 | 第59页 |
| ·LvDscam可变区序列分析 | 第59-60页 |
| ·LvDscam系统进化分析 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第5章 差异分析不同免疫原刺激凡纳对虾Dscam特异性变构体库的特征 | 第62-76页 |
| ·实验材料和仪器 | 第63-64页 |
| ·实验对虾 | 第63页 |
| ·实验菌株 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63-64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂的配制 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-67页 |
| ·实验虾料制备 | 第64页 |
| ·口服免疫实验 | 第64-65页 |
| ·总RNA的提取及检测 | 第65页 |
| ·cDNA的合成和检测 | 第65页 |
| ·目的片段的获取 | 第65-66页 |
| ·DNA 5’末端磷酸化 | 第66页 |
| ·目的片段的克隆 | 第66页 |
| ·阳性克隆子测序 | 第66页 |
| ·测序结果分析 | 第66-67页 |
| ·实验结果与分析 | 第67-74页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第67-68页 |
| ·不同免疫刺激下LvDscam分子多样性分析 | 第68-71页 |
| ·B.subtilis-VP28引发的LvDscam特异性变构体可变区特征分析 | 第71-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 第6章 总结、创新和展望 | 第76-79页 |
| ·总结 | 第76-77页 |
| ·创新点 | 第77页 |
| ·展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
