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还原型谷胱甘肽高产菌的胁迫生理特性与高密度发酵过程优化技术

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 前言第17-32页
   ·GSH性质和用途第17-21页
     ·GSH结构与性质第17-18页
     ·GSH的生理功能第18-19页
     ·GSH的生物合成第19-20页
     ·GSH的市场前景和国内外需求第20-21页
   ·GSH的生产方法第21-23页
     ·萃取法第21页
     ·化学合成法第21页
     ·酶法第21-22页
     ·发酵法第22-23页
   ·国内外微生物发酵法生产GSH研究进展第23-28页
     ·生产菌种选育第23-25页
     ·发酵条件优化第25-26页
     ·发酵调控策略第26-27页
     ·GSH提取技术进展第27-28页
   ·工业发酵过程优化与放大技术进展第28-30页
     ·发酵过程优化第28-29页
     ·发酵过程放大第29-30页
   ·本论文立题意义和主要内容第30-32页
     ·本论文立题意义第30-31页
     ·本论文主要研究内容第31-32页
第二章 GSH高产菌菌种分子鉴定和环境胁迫生理特性研究第32-42页
   ·引言第32页
   ·材料与方法第32-34页
     ·菌种第32页
     ·培养基第32-33页
     ·菌种培养与保藏方法第33页
     ·菌种环境胁迫生理特性分析第33-34页
   ·结果与讨论第34-40页
     ·GSH高产菌的菌种分子鉴定第34-37页
     ·GSH高产菌环境胁迫生理特性研究第37-40页
   ·本章小结第40-42页
第三章 基于在线活细胞生物量的GSH高密度发酵比生长速率控制策略第42-57页
   ·引言第42-43页
   ·材料与方法第43-48页
     ·菌株和培养基第43页
     ·补料分批发酵第43页
     ·离线检测方法第43-45页
     ·在线检测方法第45-48页
     ·数据分析第48页
   ·结果与讨论第48-56页
     ·典型的GSH发酵过程特征第48-49页
     ·验证电容检测的有效性第49-50页
     ·采用电容检测酵母生物量(Biomass,X)线性关系第50-52页
     ·基于活细胞浓度检测的比生长速率在线估算第52-54页
     ·基于比生长速率在线估算的GSH高密度发酵第54-56页
   ·本章小结第56-57页
第四章 RQ反馈控制同时提高GSH产量和胞内GSH含量及代谢流分析第57-75页
   ·引言第57-58页
   ·材料与方法第58-62页
     ·菌种第58页
     ·培养基和生长条件第58-59页
     ·培养方式第59页
     ·测定方法第59-60页
     ·S.cerevisiae生物合成GSH代谢网络结构模型第60-62页
   ·结果与讨论第62-73页
     ·RQ反馈控制在GSH补料分批发酵过程特征第62-69页
     ·RQ反馈控制与GSH工业生产中最常用的乙醇反馈控制比较第69-72页
     ·补料成分改变对RQ反馈控制GSH发酵的影响第72-73页
   ·小结第73-75页
第五章 GSH高产菌GSH1酶活比较与基因分析第75-96页
   ·引言第75页
   ·材料与方法第75-82页
     ·试剂第75-76页
     ·分子克隆仪器第76页
     ·菌种、质粒和引物第76页
     ·培养基第76-77页
     ·溶液配制第77页
     ·酵母总DNA制备第77页
     ·乙醇沉淀法回收DNA第77页
     ·DNA的PCR扩增第77-78页
     ·琼脂糖核酸电泳第78页
     ·目的片段回收第78页
     ·DNA定量与纯度检测第78-79页
     ·连接克隆载体第79页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第79页
     ·连接产物的转化第79-80页
     ·菌落PCR鉴定第80页
     ·质粒少量制备第80-81页
     ·DNA酶切反应第81页
     ·DNA测序和序列分析第81页
     ·对高产菌GSH1的分子建模和势能预测分析第81-82页
     ·GSH1酶活测定第82页
   ·结果与讨论第82-94页
     ·GSH高产菌与野生酿酒酵母的GSH含量和GSH1酶活比较第82-84页
     ·GSH高产菌的GSH1的克隆与测序第84-87页
     ·GSH高产菌的GSH1的DNA和氨基酸序列比对分析第87-94页
   ·小结第94-96页
第六章 在不破碎酵母细胞条件下利用乙醇原位高效提取胞内GSH第96-106页
   ·引言第96-97页
   ·材料与方法第97-99页
     ·材料第97页
     ·用乙醇或热水提取GSH第97页
     ·全因子实验设计第97页
     ·乙醇浓度对GSH提取的影响第97-98页
     ·检测方法第98-99页
   ·结果与讨论第99-105页
     ·利用全因子实验设计优化乙醇提取条件第99-102页
     ·乙醇浓度对GSH提取的影响第102-103页
     ·乙醇提取方法与目前GSH工业上常用的提取方法比较第103-105页
   ·小结第105-106页
第七章 总结与展望第106-112页
   ·主要结论第106-107页
   ·论文主要创新点第107页
   ·展望第107-112页
参考文献第112-127页
致谢第127-128页
攻读博士期间论文发表和获奖情况第128-129页
卷内备考表第129页

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