| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-37页 |
| 1.1 海洋来源药物研究现状及瓶颈 | 第13-16页 |
| 1.2 海洋来源微生物及其天然产物 | 第16-19页 |
| 1.2.1 海洋微生物多样性 | 第16页 |
| 1.2.2 海洋来源天然产物在微生物互作中的生态作用 | 第16页 |
| 1.2.3 海洋微生物来源天然产物 | 第16-18页 |
| 1.2.4 海洋微生物来源天然产物药物开发瓶颈 | 第18-19页 |
| 1.3 聚酮类化合物研究现状 | 第19-22页 |
| 1.3.1 聚酮类药物研究现状 | 第19-20页 |
| 1.3.2 聚酮类化合物生物合成途径 | 第20-21页 |
| 1.3.3 聚酮类化合物免疫抑制剂 | 第21-22页 |
| 1.4 聚酮类免疫抑制剂DalesconolsA和B研究现状 | 第22-26页 |
| 1.4.1 Dalesconols A和B的来源及生物学活性 | 第22-23页 |
| 1.4.2 Dalesconols A和B生物合成途径 | 第23-26页 |
| 1.5 微生物来源聚酮化合物发酵过程优化策略 | 第26-34页 |
| 1.5.1 影响菌体生长及聚酮代谢的培养基成分 | 第26-28页 |
| 1.5.2 培养基开发优化聚酮化合物产量 | 第28-29页 |
| 1.5.3 发酵条件优化提高聚酮化合物产量 | 第29页 |
| 1.5.4 代谢调控技术提高聚酮化合物产量 | 第29-34页 |
| 1.5.5 聚酮化合物发酵规模放大 | 第34页 |
| 1.6 研究目标、意义和具体研究内容 | 第34-37页 |
| 1.6.1 研究目标和意义 | 第34-35页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第35-37页 |
| 第2章 DA&DB基础培养基筛选及其代谢分析 | 第37-49页 |
| 2.1 前言 | 第37页 |
| 2.2 材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.2.1 菌株及培养条件 | 第37页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第37-39页 |
| 2.2.3 培养基组成 | 第39页 |
| 2.2.4 菌体干重检测 | 第39页 |
| 2.2.5 发酵液及菌体预处理方法 | 第39-40页 |
| 2.2.6 发酵液中DA&DB含量的检测 | 第40-42页 |
| 2.2.7 发酵液中有机酸含量的检测 | 第42-43页 |
| 2.2.8 发酵液中DHN含量的检测 | 第43-44页 |
| 2.2.9 漆酶活力检测 | 第44页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 2.3.1 基础培养基筛选 | 第44-45页 |
| 2.3.2 不同培养基中有机酸含量的检测 | 第45-46页 |
| 2.3.3 不同培养基中DHN含量的检测 | 第46-47页 |
| 2.3.4 不同培养基中漆酶活性检测 | 第47-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第3章 DA&DB的发酵条件优化及高产培养基开发 | 第49-63页 |
| 3.1 前言 | 第49页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第49-53页 |
| 3.2.1 菌株及培养条件 | 第49页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第49-51页 |
| 3.2.3 培养基组成 | 第51页 |
| 3.2.4 菌体干重检测 | 第51页 |
| 3.2.5 发酵液及菌体预处理方法 | 第51-52页 |
| 3.2.6 发酵液中DA&DB含量的检测 | 第52页 |
| 3.2.7 发酵条件优化实验 | 第52页 |
| 3.2.8 种子质量优化实验 | 第52页 |
| 3.2.9 统计学方法优化培养基 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第53-61页 |
| 3.3.1 不同发酵条件对DA&DB产量的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.2 种子质量优化对DA&DB产量的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.3 统计学方法优化DA&DB发酵培养基 | 第56-61页 |
| 3.4 本章小结 | 第61-63页 |
| 第4章 基于DA&DB代谢途径的产量优化策略 | 第63-72页 |
| 4.1 前言 | 第63页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第63-66页 |
| 4.2.1 菌株及培养条件 | 第63-64页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第64-65页 |
| 4.2.3 培养基组成 | 第65页 |
| 4.2.4 菌体干重检测 | 第65页 |
| 4.2.5 发酵液及菌体预处理方法 | 第65页 |
| 4.2.6 聚酮途径前体添加 | 第65-66页 |
| 4.2.7 旁路途径抑制剂添加 | 第66页 |
| 4.2.8 漆酶激动剂筛选 | 第66页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第66-70页 |
| 4.3.1 聚酮途径前体添加对DA&DB发酵的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.2 甲羟戊酸途径抑制剂添加对DA&DB发酵的影响 | 第67-69页 |
| 4.3.3 漆酶激动剂添加对DA&DB产量的影响 | 第69-70页 |
| 4.4 本章小结 | 第70-72页 |
| 第5章 钙离子对DA&DB合成的影响机制研究 | 第72-86页 |
| 5.1 前言 | 第72页 |
| 5.2 实验材料及方法 | 第72-77页 |
| 5.2.1 菌株及培养条件 | 第72页 |
| 5.2.2 试剂与仪器 | 第72-74页 |
| 5.2.3 培养基组成 | 第74页 |
| 5.2.4 菌体干重检测 | 第74页 |
| 5.2.5 发酵液及菌体预处理方法 | 第74页 |
| 5.2.6 发酵液中DA和DB含量的检测 | 第74页 |
| 5.2.7 发酵液中葡萄糖浓度的检测 | 第74-76页 |
| 5.2.8 钙离子添加浓度及添加时间优化 | 第76页 |
| 5.2.9 胞内外钙离子含量的检测 | 第76页 |
| 5.2.10 钙离子及Ca~(2+)/CaM信号途径抑制剂添加实验 | 第76页 |
| 5.2.11 实时定量反转录PCR (qRT-PCR) | 第76-77页 |
| 5.3 实验结果及讨论 | 第77-85页 |
| 5.3.1 钙离子不同添加浓度对DA&DB产量的影响 | 第77-78页 |
| 5.3.2 钙离子不同添加时间对DA&DB产量的影响 | 第78-79页 |
| 5.3.3 CaCl_2添加策略对于发酵过程的影响 | 第79-80页 |
| 5.3.4 CaCl_2添加策略对于胞内外钙离子浓度的影响 | 第80-81页 |
| 5.3.5 Ca~(2+)/CaM信号途径抑制剂添加对发酵过程的影响 | 第81-83页 |
| 5.3.6 钙离子及Ca~(2+)/CaM信号途径对DA&DB生物合成基因转录水平的影响 | 第83-85页 |
| 5.4 本章小结 | 第85-86页 |
| 第6章 DA&DB反应器水平的发酵过程优化及放大 | 第86-100页 |
| 6.1 前言 | 第86页 |
| 6.2 实验材料及方法 | 第86-89页 |
| 6.2.1 菌株及培养条件 | 第86页 |
| 6.2.2 试剂与仪器 | 第86-88页 |
| 6.2.3 培养基组成 | 第88页 |
| 6.2.4 菌体干重检测 | 第88页 |
| 6.2.5 发酵液及菌体预处理方法 | 第88页 |
| 6.2.6 发酵液中DA和DB含量的检测 | 第88页 |
| 6.2.7 发酵液中葡萄糖浓度的检测 | 第88页 |
| 6.2.8 5L反应器发酵条件优化 | 第88页 |
| 6.2.9 5L反应器发酵方式优化 | 第88-89页 |
| 6.2.10 50 L反应器发酵 | 第89页 |
| 6.2.11 500 L反应器发酵 | 第89页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第89-99页 |
| 6.3.1 5L生物反应器发酵条件优化 | 第89-94页 |
| 6.3.2 5L反应器中发酵方式优化 | 第94-97页 |
| 6.3.3 50 L生物反应器发酵 | 第97-98页 |
| 6.3.4 500 L生物反应器发酵 | 第98-99页 |
| 6.4 本章小结 | 第99-100页 |
| 第7章 结论与展望 | 第100-103页 |
| 7.1 主要结论 | 第100-101页 |
| 7.2 主要创新点 | 第101页 |
| 7.3 展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 攻读博士期间的成果 | 第117页 |
