| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 依匹乳糖简介 | 第7-8页 |
| 1.1.1 依匹乳糖的产生途径 | 第7页 |
| 1.1.2 依匹乳糖的生理功效 | 第7-8页 |
| 1.1.3 依匹乳糖的制备技术 | 第8页 |
| 1.2 乳果糖简介 | 第8-10页 |
| 1.2.1 乳果糖的理化性质 | 第8页 |
| 1.2.2 乳果糖的生理功效及应用 | 第8-9页 |
| 1.2.3 化学法制备乳果糖 | 第9页 |
| 1.2.4 生物法制备乳果糖 | 第9-10页 |
| 1.3 纤维二糖差向异构酶的研究 | 第10-14页 |
| 1.3.1 纤维二糖差向异构酶的来源 | 第10-11页 |
| 1.3.2 已报道纤维二糖差向异构酶的酶学性质 | 第11-12页 |
| 1.3.3 纤维二糖差向异构酶的蛋白结构及催化机理的研究 | 第12-14页 |
| 1.4 本课题立题依据意义 | 第14页 |
| 1.5 本课题研究的主要内容 | 第14-15页 |
| 2 实验材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第15页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第15页 |
| 2.2 培养基与试剂的配制 | 第15-17页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第15-16页 |
| 2.2.2 试剂的配制 | 第16-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第17页 |
| 2.3.2 大肠杆菌E. coli DH5α 及E. coli BL21(DE3)感受态的制备 | 第17-18页 |
| 2.3.3 基因重组菌的构建 | 第18页 |
| 2.3.4 重组质粒的抽提 | 第18页 |
| 2.3.5 琼脂糖凝胶电泳检测重组质粒 | 第18页 |
| 2.3.6 基因重组菌的保藏 | 第18页 |
| 2.3.7 基因重组菌的诱导表达 | 第18-19页 |
| 2.3.8 重组蛋白的分离纯化 | 第19页 |
| 2.3.9 重组蛋白相对分子质量的确定 | 第19-20页 |
| 2.3.10 重组蛋白含量测定 | 第20页 |
| 2.3.11 纤维二糖差向异构酶底物专一性研究 | 第20-21页 |
| 2.3.12 重组蛋白的酶活测定 | 第21页 |
| 2.3.13 各种因素对重组蛋白酶活的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.14 利用重组酶制备依匹乳糖、乳果糖的研究 | 第22-24页 |
| 3 结果与讨论 | 第24-41页 |
| 3.1 纤维二糖差向异构酶基因序列的选择 | 第24-26页 |
| 3.2 重组纤维二糖差向异构酶的诱导表达及分离纯化 | 第26-27页 |
| 3.3 重组纤维二糖差向异构酶底物专一性的研究 | 第27-28页 |
| 3.4 重组纤维二糖差向异构酶的酶活测定 | 第28-29页 |
| 3.5 重组纤维二糖差向异构酶的酶学性质研究 | 第29-35页 |
| 3.5.1 反应温度对酶活的影响 | 第29-30页 |
| 3.5.2 pH对酶活的影响 | 第30-31页 |
| 3.5.3 金属离子种类对酶活的影响 | 第31-32页 |
| 3.5.4 重组纤维二糖差向异构酶的温度稳定性 | 第32-34页 |
| 3.5.5 重组纤维二糖差向异构酶的反应动力学研究 | 第34-35页 |
| 3.6 利用重组酶制备依匹乳糖、乳果糖的研究 | 第35-38页 |
| 3.6.1 利用重组酶制备依匹乳糖 | 第35-36页 |
| 3.6.2 利用重组酶制备乳果糖 | 第36-38页 |
| 3.7 纤维二糖差向异构酶催化机理探讨 | 第38-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录一 作者在攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第49-50页 |
| 附录二 | 第50-52页 |
