| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章: 前言 | 第13-30页 |
| 1.1 人工甜味剂概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 人工甜味剂定义、分类 | 第13-16页 |
| 1.1.2 人工甜味剂及代谢影响 | 第16页 |
| 1.2 甜味感受与甜味受体 | 第16-25页 |
| 1.2.1 甜味受体简介 | 第16-20页 |
| 1.2.2 甜味感受信号通路 | 第20-25页 |
| 1.2.2.1 口腔的味觉感受 | 第20-22页 |
| 1.2.2.2 肠道味觉感受通路 | 第22-25页 |
| 1.2.3 甜味受体蛋白定量不同方法及缺陷 | 第25页 |
| 1.3 人工甜味剂可能诱发的安全风险 | 第25-28页 |
| 1.3.1 与甜味受体相关的安全风险 | 第25-27页 |
| 1.3.2 与肠道微生物相关的安全风险 | 第27-28页 |
| 1.4 研究目的、内容及意义 | 第28-30页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第28页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第28-29页 |
| 1.4.3 研究意义 | 第29-30页 |
| 第二章: 人工甜味剂暴露对小鼠部分组织T1R3表达的影响 | 第30-42页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.2.2 主要试剂及溶液配制 | 第31-32页 |
| 2.2.3 主要仪器和设备 | 第32-33页 |
| 2.3 实验设计与方法优化 | 第33-37页 |
| 2.3.1 实验技术路线图 | 第33页 |
| 2.3.2 实验小鼠分组及暴露方式 | 第33-34页 |
| 2.3.3 Western Blot方法步骤及优化 | 第34-37页 |
| 2.3.3.1 Western Blot基本步骤 | 第34-35页 |
| 2.3.3.2 冷冻样品问题 | 第35-36页 |
| 2.3.3.3 蛋白酶抑制剂对WB结果的影响 | 第36页 |
| 2.3.3.4 不同来源抗体的筛选及方案优化 | 第36-37页 |
| 2.3.3.5 抗体浓度的影响 | 第37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-41页 |
| 2.4.1 糖精甜度12暴露ICR小鼠4周对多组织T1R3表达的影响 | 第37-38页 |
| 2.4.2 三氯蔗糖甜度12暴露ICR小鼠4周对多组织T1R3表达的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.3 安赛蜜甜度12暴露ICR小鼠4周对多组织T1R3表达的影响 | 第39-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章: 人工甜味剂暴露对小鼠肠道T1R3表达的影响 | 第42-58页 |
| 3.1 引言 | 第42-44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第44页 |
| 3.2.2 主要试剂及溶液配置 | 第44-45页 |
| 3.2.3 主要仪器及设备 | 第45页 |
| 3.3 实验设计与方法优化 | 第45-50页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第45-48页 |
| 3.3.1.1 STC-1细胞培养及注意事项 | 第45-47页 |
| 3.3.1.2 细胞培养条件优化 | 第47-48页 |
| 3.3.2 细胞免疫荧光 | 第48-49页 |
| 3.3.2.1 免疫荧光的基本步骤 | 第48页 |
| 3.3.2.2 免疫荧光实验优化 | 第48-49页 |
| 3.3.3 实验小鼠分组及暴露方式 | 第49页 |
| 3.3.4 小鼠肠段取样方式 | 第49-50页 |
| 3.4 实验结果 | 第50-56页 |
| 3.4.1 STC-1细胞培养结果 | 第50页 |
| 3.4.2 甜味通路相关蛋白免疫荧光单标 | 第50-52页 |
| 3.4.3 甜味通路相关蛋白免疫荧光双标 | 第52-53页 |
| 3.4.4 糖精甜度12暴露ICR小鼠4周对小肠T1R3表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.5 三氯蔗糖甜度12暴露ICR小鼠4周对小肠T1R3表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.6 安赛蜜甜度12暴露ICR小鼠4周对小肠T1R3表达的影响 | 第55-56页 |
| 3.5 本章小结 | 第56-58页 |
| 第四章: 人工甜味剂暴露对小鼠膀胱甜味受体表达的影响 | 第58-71页 |
| 4.1 引言 | 第58-59页 |
| 4.2 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第59页 |
| 4.2.2 主要试剂及溶液配制 | 第59-60页 |
| 4.2.3 主要仪器和设备 | 第60页 |
| 4.3 实验设计与方法 | 第60-61页 |
| 4.3.1 实验技术路线图 | 第60页 |
| 4.3.2 实验小鼠分组及暴露方式 | 第60-61页 |
| 4.3.3 实验小鼠排尿量检测 | 第61页 |
| 4.3.4 各甜味剂暴露后膀胱甜味受体表达量的检测 | 第61页 |
| 4.4 实验结果 | 第61-69页 |
| 4.4.1 多种人工甜味剂多浓度暴露ICR小鼠4周对其排尿量的影响 | 第61-62页 |
| 4.4.2 不同浓度糖精暴露ICR小鼠4周对膀胱甜味受体表达量的影响 | 第62-64页 |
| 4.4.3 不同浓度三氯蔗糖暴露ICR小鼠4周对膀觥甜味受体表达量的影响 | 第64-66页 |
| 4.4.4 不同浓度安赛蜜暴露ICR小鼠4周对膀胱甜味受体表达量的影响 | 第66-69页 |
| 4.4.5 多甜味剂多浓度暴露ICR小鼠4周对膀胱上T1R3mRNA水平的影响 | 第69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第五章: 总结与展望 | 第71-75页 |
| 5.1 结论 | 第71-72页 |
| 5.2 创新点 | 第72-73页 |
| 5.3 不足与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 附录: 英文缩略表 | 第84-85页 |
| 研究生期间发表论文 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
