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酶法制备草鱼鱼鳞明胶及ACE抑制肽的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 绪论第13-29页
   ·鱼鳞的概述第13-14页
     ·鱼鳞的分类第13页
     ·鱼鳞的结构第13页
     ·鱼鳞的化学组成第13-14页
     ·鱼鳞的加工利用第14页
   ·鱼胶原第14-16页
     ·胶原的概述第14-15页
     ·鱼胶原的类型及结构第15-16页
     ·鱼胶原的性质第16页
   ·鱼明胶的研究进展第16-20页
     ·明胶的概述第16-17页
     ·鱼明胶的制备工艺第17-18页
     ·鱼明胶的理化性质及结构第18-19页
     ·鱼明胶的应用第19-20页
   ·胶原肽的研究第20页
   ·ACE 抑制活性肽的研究第20-21页
   ·本课题立题背景和意义第21-22页
   ·本论文主要研究内容第22-23页
 参考文献第23-29页
第二章 草鱼鱼鳞脱钙工艺及鱼鳞胶原纤维性质的研究第29-44页
   ·引言第29页
   ·实验材料与方法第29-32页
     ·实验材料第29页
     ·鱼鳞主要成分分析第29页
     ·原料的预处理第29-30页
     ·鱼鳞的浸酸处理第30页
     ·钙含量的测定第30页
     ·羟脯氨酸(Hyp)含量的测定及胶原含量和纯度的计算第30页
     ·盐酸脱钙液中盐酸残留量的计算第30页
     ·鱼鳞胶原的提取[11]第30-31页
     ·鱼鳞胶原及胶原纤维的热性质测定第31页
     ·原子力显微镜(AFM)观察鱼鳞胶原结构第31页
     ·鱼鳞胶原的圆二色性(Circular Dichroism,CD)第31页
     ·鱼鳞胶原的红外光谱的测定第31页
     ·鱼鳞胶原的X-射线衍射测定第31页
     ·鱼鳞胶原纤维氨基酸的测定第31-32页
   ·结果与讨论第32-41页
     ·草鱼鱼鳞原料的预处理及基本成分第32页
     ·草鱼鱼鳞的脱钙第32-34页
     ·盐酸浓度对胶原溶出量以及对胶原纤维稳定性的影响第34-35页
     ·钙离子对鱼鳞胶原结构和性质的影响第35-38页
     ·脱钙工艺条件的确定第38页
     ·脱钙后草鱼鱼鳞的基本成分第38页
     ·经脱钙的草鱼鱼鳞胶原纤维的组成与结构第38-41页
   ·本章小结第41页
 参考文献第41-44页
第三章 草鱼鱼鳞明胶制备工艺的研究第44-63页
   ·引言第44页
   ·实验材料与方法第44-47页
     ·实验原料第44-45页
     ·草鱼鱼鳞明胶制备工艺流程第45页
     ·鱼鳞的脱钙第45页
     ·蛋白酶活的测定第45页
     ·酶法制备鱼鳞明胶第45页
     ·Protease A 酶解鱼鳞工艺条件的优化第45-46页
     ·经酶解预处理的鱼鳞的胶原提取第46页
     ·鱼鳞明胶的热水提胶单因素实验第46页
     ·提胶工艺的优化第46-47页
     ·鱼鳞明胶得率的计算第47页
     ·鱼鳞明胶粘度的测定第47页
     ·鱼鳞明胶凝胶强度和冻力的测定第47页
     ·鱼鳞胶原和胶原纤维热性质的测定第47页
     ·鱼鳞主要成分的测定第47页
     ·鱼鳞明胶透光度的测定第47页
   ·结果与讨论第47-61页
     ·原料的破碎第47-48页
     ·不同蛋白酶酶解效果的比较第48-56页
     ·草鱼鱼鳞经 Protease A 酶解后的主要组成第56页
     ·酶解处理对草鱼鱼鳞胶原纤维收缩温度的影响第56页
     ·酶解处理对草鱼鱼鳞胶原结构的影响第56-57页
     ·Protease A 酶解草鱼鱼鳞胶原的酶解特性研究第57页
     ·鱼鳞明胶的热水提胶工艺研究第57-59页
     ·鱼鳞明胶提取工艺条件的优化第59-60页
     ·放大实验第60-61页
   ·本章小结第61页
 参考文献第61-63页
第四章 草鱼鱼鳞明胶的结构与理化性质第63-80页
   ·前言第63页
   ·实验材料与方法第63-65页
     ·实验原料与试剂第63-64页
     ·明胶的氨基酸组成分析第64页
     ·明胶的相对分子质量分布测定第64页
     ·明胶的特性粘度测定第64页
     ·明胶的等电点测定第64页
     ·明胶凝胶性质的测定第64页
     ·明胶表面疏水性指数的测定第64-65页
     ·明胶 X-射线衍射测定第65页
     ·明胶胶凝过程圆二色性的测定第65页
     ·鱼鳞明胶挥发性风味成分的测定第65页
   ·结果与讨论第65-77页
     ·草鱼鱼鳞明胶的氨基酸组成第65-66页
     ·草鱼鱼鳞明胶的相对分子质量分布第66-68页
     ·草鱼鱼鳞明胶的特性粘度第68-69页
     ·草鱼鱼鳞明胶的等电点第69页
     ·草鱼鱼鳞明胶的胶凝温度和熔化温度第69-70页
     ·草鱼鱼鳞明胶的粘弹性随温度的变化第70-71页
     ·草鱼鱼鳞明胶的表面疏水性第71-72页
     ·草鱼鱼鳞明胶的结构第72-73页
     ·草鱼鱼鳞明胶的腥味分析第73-77页
   ·本章小结第77-78页
 参考文献第78-80页
第五章 草鱼鱼鳞 ACE 抑制肽的制备及纯化第80-102页
   ·前言第80页
   ·实验材料与方法第80-84页
     ·实验材料和主要试剂第80-81页
     ·原料的预处理第81页
     ·酶解工艺及酶解产物的分离第81页
     ·蛋白水解度(degree of hydrolysis, DH)的测定第81页
     ·肽得率的计算第81页
     ·相对分子质量分布的测定第81-82页
     ·游离氨基酸含量的测定第82页
     ·酶解产物 ACE 抑制活性的测定第82页
     ·原料及酶解产物的基本成分分析第82页
     ·氨基酸组成的测定第82页
     ·鱼鳞肽的脱盐方法第82-83页
     ·鱼鳞肽的平均疏水性(Q 值)第83页
     ·鱼鳞肽的初级分离第83页
     ·凝胶过滤色谱分离鱼鳞的 ACE 抑制活性肽第83页
     ·半制备 RP-HPLC 分离鱼鳞的 ACE 抑制活性肽第83-84页
     ·分析型 RP-HPLC 分离鱼鳞 ACE 抑制活性肽第84页
     ·MALDI-TOF-TOF MS 质谱分析鱼鳞 ACE 抑制活性肽结构第84页
   ·结果与讨论第84-98页
     ·鱼鳞残渣的基本组成第84页
     ·鱼鳞肽的制备第84-87页
     ·A.S.1398 蛋白酶水解鱼鳞胶原的影响因素第87-89页
     ·鱼鳞酶解产物的组成分析第89-90页
     ·酶解产物的脱盐第90-91页
     ·鱼鳞肽的 ACE 抑制活性第91-92页
     ·鱼鳞 ACE 抑制肽的分离纯化及结构鉴定第92-97页
     ·G5-R3-1 的结构鉴定第97页
     ·G5-R3-1 肽段结构与ACE 抑制活性关系的探讨第97-98页
   ·本章小结第98-99页
 参考文献第99-102页
第六章 草鱼鱼鳞ACE 抑制肽对人脐静脉内皮细胞功能的影响第102-113页
   ·前言第102页
   ·实验材料与方法第102-105页
     ·肽的制备第102-103页
     ·人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC) 培养第103页
     ·实验分组第103页
     ·细胞增殖试验第103页
     ·细胞周期的测定第103页
     ·人内皮素-1(ET-1)的测定第103页
     ·内皮细胞ACE、ACE2、ET-1mRNA 定量表达的测定第103-105页
     ·鱼鳞肽(FSCPs 和 FSCSP)清除超氧阴离子自由基(02-·)能力的测定第105页
     ·统计分析第105页
   ·结果与讨论第105-108页
     ·HUVEC 的形态学观察第105-106页
     ·鱼鳞ACE 抑制肽对脐静脉内皮细胞增殖的影响第106页
     ·鱼鳞 ACE 抑制肽对脐静脉内皮细胞周期的影响第106-107页
     ·鱼鳞ACE 抑制肽对脐静脉内皮细胞分泌ET-1 的影响第107页
     ·鱼鳞ACE 抑制肽对 ACE/ACE2mRNA 表达的影响第107-108页
     ·鱼鳞ACE 抑制肽对 ET-1mRNA 表达的影响第108页
   ·鱼鳞 ACE 抑制肽降血压机理的探讨第108-110页
   ·本章小结第110-111页
 参考文献第111-113页
主要结论第113-114页
展望第114-115页
论文主要创新点第115-116页
作者攻读博士期间发表与本论文相关的文章第116-117页
附录1第117-118页
附录2第118-119页
致谢第119页

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