摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 刺参概述 | 第10页 |
1.2 刺参自溶 | 第10-13页 |
1.2.1 刺参自溶机制研究 | 第11-12页 |
1.2.2 自溶酶研究 | 第12-13页 |
1.3 细胞凋亡概述 | 第13-15页 |
1.3.1 死亡受体途径 | 第13-14页 |
1.3.2 内质网凋亡途径 | 第14页 |
1.3.3 线粒体凋亡途径 | 第14-15页 |
1.4 线粒体途径凋亡机制研究进展 | 第15-18页 |
1.4.1 活性氧 (ROS) 与凋亡 | 第15-16页 |
1.4.2 Caspase家族蛋白与凋亡 | 第16-17页 |
1.4.3 Bcl-2 家族 | 第17页 |
1.4.4 线粒体膜电位 | 第17-18页 |
1.5 主要研究内容及意义 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 实验仪器与材料 | 第20-23页 |
2.1.1 实验原料 | 第20页 |
2.1.2 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.3 实验试剂 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-30页 |
2.2.1 试剂配制 | 第23页 |
2.2.2 UV诱导刺参自溶 | 第23-24页 |
2.2.3 刺参体腔液细胞制备 | 第24页 |
2.2.4 刺参体腔液细胞全蛋白制备 | 第24页 |
2.2.5 刺参体腔液细胞胞浆蛋白和线粒体蛋白制备 | 第24页 |
2.2.6 改良型Bradford法测定蛋白含量 | 第24-25页 |
2.2.7 刺参体腔液细胞Ca~(2+)荧光强度测定 | 第25页 |
2.2.8 刺参体腔液细胞内SOD酶活测定 | 第25页 |
2.2.9 刺参体腔液细胞内活性氧 (ROS) 含量测定 | 第25页 |
2.2.10 刺参体腔液细胞线粒体膜电位测定 | 第25页 |
2.2.11 Annexin V-FITC/PI双染色法检测凋亡率 | 第25-26页 |
2.2.12 Caspase酶酶活测定 | 第26-27页 |
2.2.13 免疫印迹 | 第27-28页 |
2.2.14 RT-PCR检测caspase-3 mRNA水平 | 第28-29页 |
2.2.15 数据统计 | 第29-30页 |
第三章 结果与讨论 | 第30-56页 |
3.1 紫外线照射后刺参体腔液细胞Ca~(2+)浓度变化 | 第30-31页 |
3.2 刺参体腔液细胞SOD酶活测定 | 第31-33页 |
3.3 刺参体腔液细胞内活性氧 (ROS) 含量测定 | 第33-35页 |
3.4 刺参体腔液细胞线粒体膜电位测定 | 第35-39页 |
3.5 Annexin V-FITC/PI双染色法检测凋亡 | 第39-41页 |
3.6 线粒体凋亡相关信号分子蛋白表达的测定 | 第41-49页 |
3.6.1 体腔液细胞蛋白降解情况 | 第41-42页 |
3.6.2 体腔液细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达水平变化 | 第42-44页 |
3.6.3 肠组织中Bcl-2、Bax蛋白表达水平变化 | 第44-45页 |
3.6.4 体腔液细胞中caspase-3 蛋白表达水平变化情况 | 第45-47页 |
3.6.5 体腔液细胞中caspase-3 mRNA表达水平变化情况 | 第47-49页 |
3.7 Caspase酶酶活测定 | 第49-53页 |
3.7.1 刺参体腔液细胞和肠组织中Caspase-3 酶酶活测定 | 第49-50页 |
3.7.2 刺参体腔液细胞和肠组织中Caspase-9 酶酶活测定 | 第50-53页 |
3.8 刺参经紫外照射后的形态学变化 | 第53-56页 |
第四章 结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附录 | 第66页 |