| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-14页 |
| 1.1 纤维素的酶法降解 | 第8-9页 |
| 1.2 AA9的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2.1 AA9的概述 | 第9-10页 |
| 1.2.2 AA9在木质纤维素酶解中的作用 | 第10-11页 |
| 1.2.3 AA9的外源表达 | 第11-12页 |
| 1.3 毕赤酵母表达系统 | 第12-13页 |
| 1.3.1 毕赤酵母表达系统的特点 | 第12页 |
| 1.3.2 纤维素酶蛋白的毕赤酵母外源表达 | 第12-13页 |
| 1.4 论文的立题依据以及研究内容 | 第13-14页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第13页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 菌株及载体 | 第14页 |
| 2.1.2 实验仪器与试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 实验所用培养基 | 第14页 |
| 2.1.4 实验所用溶液 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-18页 |
| 2.2.1 目的基因的优化 | 第15页 |
| 2.2.2 表达载体的构建以及感受态制备 | 第15-16页 |
| 2.2.3 重组毕赤酵母构建 | 第16页 |
| 2.2.4 菌株培养以及摇瓶优化 | 第16-17页 |
| 2.2.5 AA9酶学性质的考察 | 第17页 |
| 2.2.6 AA9在纤维素酶解应用 | 第17-18页 |
| 2.3 测定方法 | 第18-19页 |
| 2.3.1 AA9酶活以及蛋白浓度测定 | 第18页 |
| 2.3.2 原料中组分分析以及酶解率 | 第18-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-44页 |
| 3.1 AA9在毕赤酵母中的异源表达 | 第19-27页 |
| 3.1.1 柄孢霉AA9基因优化 | 第19-21页 |
| 3.1.2 含目的基因表达载体构建 | 第21-22页 |
| 3.1.3 含目的基因表达载体电转化以及筛选 | 第22-24页 |
| 3.1.4 AA9酶学性质分析 | 第24-26页 |
| 3.1.5 小结 | 第26-27页 |
| 3.2 高产AA9重组毕赤酵母摇瓶优化及上罐发酵 | 第27-32页 |
| 3.2.1 单质粒重组菌P.pastoris/pPIC9K-gh61摇瓶优化 | 第27-28页 |
| 3.2.2 单质粒重组菌P.pastoris/pPICZαA-gh61摇瓶优化 | 第28-29页 |
| 3.2.3 双质粒整合重组菌摇瓶优化和正交实验 | 第29-31页 |
| 3.2.4 双质粒整合重组菌株上罐发酵 | 第31-32页 |
| 3.2.5 小结 | 第32页 |
| 3.3 AA9应用于纤维质原料酶解的探索 | 第32-44页 |
| 3.3.1 AA9在标准底物酶解中的应用 | 第32-35页 |
| 3.3.2 AA9在甘油有机溶剂预处理木质纤维素酶解中的应用 | 第35-36页 |
| 3.3.3 金属离子对AA9辅助酶解的影响 | 第36-40页 |
| 3.3.4 还原剂对AA9促进酶解作用的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.5 AA9替代纤维素酶酶解纤维素 | 第41-43页 |
| 3.3.6 小结 | 第43-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
