| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 粗壮脉纹孢菌 | 第13-15页 |
| 1.2.1 粗壮脉纹孢菌产纤维素酶类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 粗壮脉纹孢菌合成类胡萝卜素 | 第14页 |
| 1.2.3 粗壮脉纹孢菌富集金属元素 | 第14页 |
| 1.2.4 其它 | 第14-15页 |
| 1.3 蛋白酶的研究 | 第15-16页 |
| 1.3.1 蛋白酶分类与来源 | 第15页 |
| 1.3.2 微生物蛋白酶优越性 | 第15-16页 |
| 1.3.3 蛋白酶的研究现状 | 第16页 |
| 1.4 蛋白酶的提取、分离纯化及鉴定 | 第16-18页 |
| 1.4.1 蛋白酶的提取 | 第16-17页 |
| 1.4.2 蛋白酶的分离纯化 | 第17-18页 |
| 1.4.3 蛋白质鉴定 | 第18页 |
| 1.5 蛋白酶的酶学性质 | 第18-20页 |
| 1.5.1 影响酶学性质的各种因素 | 第18-20页 |
| 1.5.2 酶动力学方程 | 第20页 |
| 1.6 微生物发酵菜籽粕的优点 | 第20页 |
| 1.7 课题研究的目的、意义以及主要实验内容 | 第20-22页 |
| 1.7.1 课题来源 | 第20-21页 |
| 1.7.2 课题研究的价值和意义 | 第21页 |
| 1.7.3 主要实验内容 | 第21-22页 |
| 第2章 粗壮脉纹孢菌产酶及生产可溶性蛋白质发酵条件的优化 | 第22-42页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 试剂与仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.3 实验材料 | 第23页 |
| 2.3.1 菌种 | 第23页 |
| 2.3.2 原料 | 第23页 |
| 2.4 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.4.1 培养方法 | 第23-24页 |
| 2.4.2 分析方法 | 第24-27页 |
| 2.4.3 固体培养基原料的选择 | 第27-28页 |
| 2.4.4 发酵条件的优化 | 第28-29页 |
| 2.5 结果与分析 | 第29-40页 |
| 2.5.1 固态发酵培养基原料的选择 | 第29页 |
| 2.5.2 单因素实验的优化 | 第29-33页 |
| 2.5.3 响应面分析 | 第33-39页 |
| 2.5.4 验证实验 | 第39-40页 |
| 2.6 讨论 | 第40-41页 |
| 2.6.1 固体培养基原料的选择 | 第40页 |
| 2.6.2 加水量对菌株产蛋白酶酶活和可溶性蛋白质含量的影响 | 第40页 |
| 2.6.3 初始pH对菌株产蛋白酶酶活和可溶性蛋白质含量的影响 | 第40页 |
| 2.6.4 培养温度对菌株产蛋白酶酶活和可溶性蛋白质含量的影响 | 第40-41页 |
| 2.6.5 发酵时间对菌株产蛋白酶酶活和可溶性蛋白质含量的影响 | 第41页 |
| 2.6.6 接种量对菌株产蛋白酶酶活和可溶性蛋白质含量的影响 | 第41页 |
| 2.7 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 粗壮脉纹孢菌蛋白酶的分离纯化及鉴定 | 第42-55页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 试剂与仪器设备 | 第42-43页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-48页 |
| 3.3.1 蛋白酶的分离纯化流程 | 第43-44页 |
| 3.3.2 蛋白酶粗酶液的制备 | 第44页 |
| 3.3.3 硫酸铵沉淀 | 第44-46页 |
| 3.3.4 DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第46页 |
| 3.3.5 Sephadex G-75凝胶过滤层析 | 第46页 |
| 3.3.6 蛋白质的电泳 | 第46-47页 |
| 3.3.7 蛋白酶酶谱 | 第47页 |
| 3.3.8 蛋白质鉴定流程 | 第47-48页 |
| 3.4 结果与分析 | 第48-54页 |
| 3.4.1 粗壮脉纹孢菌蛋白酶的分离纯化 | 第48-52页 |
| 3.4.2 粗壮脉纹孢菌蛋白酶的鉴定 | 第52-54页 |
| 3.5 讨论 | 第54页 |
| 3.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 第4章 粗壮脉纹孢菌蛋白酶酶学性质的研究 | 第55-69页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 试剂与仪器设备 | 第55-56页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第55页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 4.3 实验方法 | 第56-58页 |
| 4.3.1 蛋白酶的反应最适温度 | 第56页 |
| 4.3.2 蛋白酶的热稳定性 | 第56页 |
| 4.3.3 蛋白酶反应的最适pH值 | 第56页 |
| 4.3.4 蛋白酶的pH值稳定性 | 第56-57页 |
| 4.3.5 NaCl对蛋白酶活力的影响 | 第57页 |
| 4.3.6 底物选择性 | 第57页 |
| 4.3.7 米氏常数的测定 | 第57页 |
| 4.3.8 不同浓度金属离子对蛋白酶活力的影响 | 第57页 |
| 4.3.9 化学试剂对蛋白酶活力的影响 | 第57页 |
| 4.3.10 表面活化剂对蛋白酶活力的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.11 抑制剂对蛋白酶活力的影响 | 第58页 |
| 4.4 结果与分析 | 第58-66页 |
| 4.4.1 蛋白酶的最适反应温度 | 第58-59页 |
| 4.4.2 蛋白酶的热稳定性 | 第59页 |
| 4.4.3 蛋白酶的最适pH | 第59-60页 |
| 4.4.4 蛋白酶的pH稳定性 | 第60页 |
| 4.4.5 NaCl对蛋白酶活力的影响 | 第60-61页 |
| 4.4.6 蛋白酶的底物特异性 | 第61-62页 |
| 4.4.7 酶促反应常数 | 第62-64页 |
| 4.4.8 金属离子对蛋白酶活力的影响 | 第64页 |
| 4.4.9 化学试剂对蛋白酶活力的影响 | 第64-65页 |
| 4.4.10 表面活性剂对蛋白酶活力的影响 | 第65页 |
| 4.4.11 抑制剂对蛋白酶活力的影响 | 第65-66页 |
| 4.5 讨论 | 第66-67页 |
| 4.5.1 温度对蛋白酶的影响 | 第66页 |
| 4.5.2 pH对蛋白酶活力的影响 | 第66-67页 |
| 4.5.3 金属离子、抑制剂、表面活化剂对蛋白酶活力的影响 | 第67页 |
| 4.5.4 化学试剂对蛋白酶活力的影响 | 第67页 |
| 4.5.5 纯酶的底物特异性 | 第67页 |
| 4.6 小结 | 第67-69页 |
| 第5章 粗壮脉纹孢菌固态发酵对菜籽粕营养品质的改善 | 第69-82页 |
| 5.1 引言 | 第69页 |
| 5.2 试剂与仪器设备 | 第69-70页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第69-70页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第70页 |
| 5.3 实验材料 | 第70页 |
| 5.3.1 菌种 | 第70页 |
| 5.3.2 原料 | 第70页 |
| 5.4 方法 | 第70-73页 |
| 5.4.1 发酵菜籽粕的制备 | 第70-71页 |
| 5.4.2 营养成分的测定 | 第71页 |
| 5.4.3 抗营养因子的测定 | 第71-73页 |
| 5.4.4 菜籽粕蛋白的SDS-PAGE分析 | 第73页 |
| 5.5 结果与分析 | 第73-80页 |
| 5.5.1 菜籽粕在发酵过程中各种营养成分的变化 | 第73-78页 |
| 5.5.2 抗营养因子含量的变化 | 第78-79页 |
| 5.5.3 菜籽粕蛋白的SDS-PAGE分析 | 第79-80页 |
| 5.6 讨论 | 第80-81页 |
| 5.7 本章小结 | 第81-82页 |
| 第6章 结论与展望 | 第82-84页 |
| 6.1 结论 | 第82-83页 |
| 6.1.1 粗壮脉纹孢菌产酶和生产可溶性蛋白质发酵条件的优化 | 第82页 |
| 6.1.2 粗壮脉纹孢菌蛋白酶的分离纯化与鉴定 | 第82页 |
| 6.1.3 粗壮脉纹孢菌蛋白酶酶学性质的研究 | 第82-83页 |
| 6.1.4 粗壮脉纹孢菌固态发酵对菜籽粕营养品质的改善 | 第83页 |
| 6.2 进一步工作方向 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第92页 |
