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孔雀石绿单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第7-10页
符号说明第10-13页
前言第13-20页
    1 孔雀石绿概述第13-17页
        1.1 孔雀石绿介绍第13-14页
        1.2 孔雀石绿的代谢第14-15页
        1.3 孔雀石绿的毒性第15-17页
            1.3.1 毒性机理第15-16页
            1.3.2 对动物的毒害作用第16页
            1.3.3 对植物的毒害作用第16-17页
    2 孔雀石绿检测方法的研究进展第17-19页
        2.1 色谱法第17-18页
        2.2 免疫学方法第18页
        2.3 其它检测方法第18-19页
    3 本研究的目的及意义第19-20页
第一部分 孔雀石绿人工抗原的合成及鉴定第20-26页
    1 材料和方法第20-23页
        1.1 试剂第20页
        1.2 仪器与耗材第20页
        1.3 主要溶液系统第20-21页
        1.4 孔雀石绿人工抗原的制备第21-22页
            1.4.1 LMG-BSA的制备第21页
            1.4.2 LMG-OVA的制备第21-22页
        1.5 透析第22页
        1.6 人工抗原的分析与鉴定第22-23页
            1.6.1 人工抗原蛋白浓度的测定第22-23页
            1.6.2 紫外扫描鉴定第23页
            1.6.3 免疫学方法鉴定第23页
    2 结果第23-25页
        2.1 完全抗原的蛋白浓度测定第23页
        2.2 紫外扫描鉴定第23-24页
        2.3 免疫学方法鉴定第24-25页
    3 讨论第25-26页
第二部分 孔雀石绿单抗的制备第26-34页
    1 材料和方法第26-31页
        1.1 试剂第26页
        1.2 实验动物及生物材料第26页
        1.3 仪器与耗材第26-27页
        1.4 主要溶液系统第27-28页
            1.4.1 细胞培养溶液第27页
            1.4.2 ELISA溶液第27-28页
        1.5 单克隆抗体的制备第28-30页
            1.5.1 动物免疫第28页
            1.5.2 确定包被抗原工作浓度及阳性血清效价第28-29页
            1.5.3 细胞融合第29-30页
        1.6 杂交瘤细胞的筛选及建株第30页
            1.6.1 阳性孔的筛选及亚克隆培养第30页
            1.6.2 稳定性试验及腹水制备第30页
        1.7 单克隆抗体的鉴定第30-31页
            1.7.1 腹水蛋白浓度的测定第30页
            1.7.2 抗体特异性检测第30-31页
    2 结果第31-32页
        2.1 包被原的工作浓度及阳性血清效价第31页
        2.2 单抗细胞株的建立及稳定性第31页
        2.3 腹水的制备第31页
        2.4 单克隆抗体性质的鉴定第31-32页
            2.4.1 腹水蛋白浓度的测定第31页
            2.4.2 抗体的特异性鉴定第31-32页
    3 讨论第32-34页
        3.1 动物免疫第32页
        3.2 杂交瘤细胞培养及筛选第32-33页
        3.3 单抗的制备及鉴定第33-34页
第三部分 ELISA检测方法的建立及初步应用第34-40页
    1 材料和方法第34-35页
        1.1 仪器与试剂第34页
        1.2 样品第34页
        1.3 ELISA检测方法的建立第34-35页
            1.3.1 抗原抗体最佳工作浓度的确定第34页
            1.3.2 CiELISA标准工作曲线及相关参数第34-35页
        1.4 CIELISA检测方法的应用第35页
            1.4.1 样品的准备第35页
            1.4.2 样品处理第35页
            1.4.3 样品基质的干扰检测第35页
            1.4.4 样品中LMG含量的测定第35页
    2 结果第35-39页
        2.1 ELISA检测方法的建立第35-37页
            2.1.1 抗原抗体工作浓度的确定第35-36页
            2.1.2 CiELISA标准工作曲线及参数第36-37页
        2.2 单抗的初步应用第37-39页
            2.2.1 样品基质干扰第37-38页
            2.2.2 样品中LMG含量测定第38-39页
    3 讨论第39-40页
全文结论第40-41页
参考文献第41-46页
致谢第46-47页

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