| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·稀有糖 | 第16-17页 |
| ·D-塔格糖-一种新型甜味剂 | 第17-20页 |
| ·D-塔格糖的理化性质 | 第17页 |
| ·D-塔格糖的代谢机制 | 第17-18页 |
| ·D-塔格糖的保健功能及应用 | 第18-20页 |
| ·D-塔格糖生产 | 第20页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶 | 第20-22页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的催化机理 | 第20-21页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的来源 | 第21-22页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶催化生产塔格糖的研究方向 | 第22-25页 |
| ·提高酶的催化活力 | 第22页 |
| ·降低酶的最适pH | 第22-23页 |
| ·实现不依赖于金属离子的热稳定性 | 第23-24页 |
| ·塔格糖的微生物发酵生产 | 第24页 |
| ·酶制剂的生产与固定化 | 第24-25页 |
| ·D-塔格糖的生产前景 | 第25页 |
| ·论文内容大纲 | 第25-27页 |
| 第二章 Thermoanaerobacter mathranii来源的L-阿拉伯糖异构酶(TaMAI)的克隆表达及其酶学性质研究 | 第27-41页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·基因,菌株和载体 | 第27-28页 |
| ·酶、试剂和耗材 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-34页 |
| ·TaMAI基因的扩增 | 第28-30页 |
| ·TaMAI重组表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的验证 | 第31-32页 |
| ·TaMAI的表达和纯化 | 第32-33页 |
| ·酶活力测定 | 第33页 |
| ·TaMAI酶性质研究 | 第33-34页 |
| ·D-塔格糖的酶法制备 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-40页 |
| ·TaMAI重组表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·TaMAI蛋白的表达与纯化 | 第35-37页 |
| ·半胱氨酸咔唑法测定D-塔格糖浓度的标准曲线的绘制 | 第37-38页 |
| ·TaMAI酶法制备D-塔格糖最佳反应条件的确定 | 第38-39页 |
| ·D-塔格糖的酶法制备 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 TaMAI的大量表达发酵工艺与酶的固定化研究 | 第41-58页 |
| ·引言 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·菌种和培养基 | 第42页 |
| ·主要药品、试剂和耗材 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·TaMAI的大量表达发酵工艺研究 | 第43-44页 |
| ·TaMAI的固定化 | 第44-46页 |
| ·结果讨论 | 第46-57页 |
| ·不同诱导条件对TaMAI表达情况的影响 | 第46-48页 |
| ·TaMAI的发酵表达及纯化 | 第48-50页 |
| ·不同固定化方法的比较 | 第50-52页 |
| ·固定化酶和溶液酶的酶学性质研究 | 第52-55页 |
| ·固定化酶法大量制备D-塔格糖 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 D-塔格糖的分离纯化 | 第58-68页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·菌种和培养基 | 第58页 |
| ·主要药品、试剂和耗材 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| ·单糖组分检测 | 第59页 |
| ·酵母选择代谢法纯化D-塔格糖 | 第59页 |
| ·Ca~(2+)型树脂分离法纯化D-塔格糖 | 第59-60页 |
| ·结果 | 第60-67页 |
| ·酵母选择性代谢法纯化D-塔格糖结果检测 | 第60-62页 |
| ·Ca~(2+)型树脂分离法纯化D-塔格糖结果检测 | 第62-66页 |
| ·离子色谱检测D-塔格糖纯度 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 TaMAI的N-端域的功能研究及定点突变 | 第68-83页 |
| ·引言 | 第68-69页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-75页 |
| ·技术路线 | 第69页 |
| ·N-末端域的功能研究 | 第69-72页 |
| ·定点突变研究 | 第72-75页 |
| ·结果 | 第75-81页 |
| ·N-末端域的功能研究结果 | 第75-79页 |
| ·TaMAI定点突变研究结果 | 第79-81页 |
| ·本章小结 | 第81-83页 |
| 全文总结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及专利 | 第93-94页 |
| 附录 | 第94-104页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第104页 |
