摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
主要符号表 | 第12-13页 |
第1章 引言 | 第13-25页 |
1.1 副溶血性弧菌 | 第14-18页 |
1.1.1 副溶血性弧菌形态和生化特性 | 第14页 |
1.1.2 副溶血性弧菌的危害及致病机制 | 第14-15页 |
1.1.3 副溶血性弧菌检测方法研究进展 | 第15-18页 |
1.2 霍氏格里蒙菌 | 第18-20页 |
1.2.1 霍氏格里蒙菌形态和生化特性 | 第19页 |
1.2.2 霍氏格里蒙菌的危害及致病机制 | 第19页 |
1.2.3 霍氏格里蒙菌检测方法的研究进展 | 第19-20页 |
1.3 胶体金免疫层析技术 | 第20-23页 |
1.3.1 胶体金概述 | 第21-22页 |
1.3.2 胶体金标记抗体 | 第22页 |
1.3.3 胶体金免疫层析技术原理 | 第22-23页 |
1.3.4 胶体金免疫层析技术优势 | 第23页 |
1.4 论文主要研究目的、内容和创新点 | 第23-25页 |
1.4.1 研究目的 | 第23页 |
1.4.2 研究内容 | 第23-24页 |
1.4.3 创新点 | 第24-25页 |
第2章 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第25-38页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 菌株 | 第25页 |
2.1.2 药品试剂 | 第25页 |
2.1.3 溶液配制 | 第25-27页 |
2.1.4 仪器设备 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-31页 |
2.2.1 弧菌的培养 | 第27页 |
2.2.2 全菌抗原的制备 | 第27-28页 |
2.2.3 多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
2.2.4 多克隆血清的纯化 | 第29页 |
2.2.5 透析袋的处理与保存 | 第29页 |
2.2.6 间接ELISA法分析纯化前后兔多抗的效价 | 第29-30页 |
2.2.7 Bradford法测定纯化前后兔多抗的蛋白浓度 | 第30页 |
2.2.8 SDS-PAGE蛋白电泳检测纯化后抗体纯度 | 第30-31页 |
2.3 结果 | 第31-36页 |
2.3.1 菌落特征分析 | 第31-33页 |
2.3.2 效价测定结果分析 | 第33-34页 |
2.3.3 多克隆血清蛋白浓度测定结果 | 第34-35页 |
2.3.4 SDS-PAGE分析纯化后血清 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-37页 |
2.4.1 多克隆抗体的制备 | 第36页 |
2.4.2 多克隆抗体的纯化 | 第36-37页 |
2.4.3 多克隆抗体蛋白浓度测定 | 第37页 |
2.5 本章小结 | 第37-38页 |
第3章 Vp快速检测试纸条的研制 | 第38-56页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 菌株 | 第38页 |
3.1.2 药品试剂 | 第38页 |
3.1.3 仪器设备和耗材 | 第38页 |
3.1.4 溶液配制 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-44页 |
3.2.1 玻璃器皿的清洗 | 第39页 |
3.2.2 不同柠檬酸三钠加入量的胶体金溶液制备 | 第39页 |
3.2.3 胶体金溶液的鉴定与分析 | 第39-40页 |
3.2.4 金标探针的制备 | 第40-41页 |
3.2.5 试纸条的组装 | 第41-43页 |
3.2.6 试纸条的性能测试 | 第43-44页 |
3.3 结果分析 | 第44-53页 |
3.3.1 不同柠檬酸三钠加入量的比较分析 | 第44-45页 |
3.3.2 金标探针的制备与鉴定 | 第45-48页 |
3.3.3 试纸条的组装 | 第48-51页 |
3.3.4 试纸条的性能测试结果 | 第51-53页 |
3.4 讨论 | 第53-55页 |
3.4.1 胶体金的制备 | 第53页 |
3.4.2 胶体金的保存 | 第53-54页 |
3.4.3 金标探针的制备 | 第54页 |
3.4.4 金标探针的纯化 | 第54页 |
3.4.5 金标探针的稀释 | 第54页 |
3.4.6 试纸条的假阳性 | 第54-55页 |
3.4.7 试纸条灵敏度影响因素 | 第55页 |
3.4.8 试纸条的保存 | 第55页 |
3.5 本章小结 | 第55-56页 |
第4章 Gh快速检测试纸条的研制 | 第56-62页 |
4.1 实验材料 | 第56页 |
4.2 实验方法 | 第56-58页 |
4.2.1 金标探针的制备 | 第56-57页 |
4.2.2 试纸条的组装 | 第57页 |
4.2.3 试纸条的性能测试 | 第57-58页 |
4.3 结果分析 | 第58-61页 |
4.3.1 金标探针的制备与鉴定 | 第58-60页 |
4.3.2 试纸条的性能测试结果 | 第60-61页 |
4.4 本章小结 | 第61-62页 |
第5章 免疫磁珠联合试纸条检测方法的建立及应用 | 第62-74页 |
5.1 实验材料 | 第62-63页 |
5.1.1 药品试剂 | 第62页 |
5.1.2 样品 | 第62页 |
5.1.3 溶液配制 | 第62-63页 |
5.2 实验方法 | 第63-65页 |
5.2.1 免疫磁珠制备 | 第63页 |
5.2.2 免疫磁珠富集目的菌的条件优化 | 第63-64页 |
5.2.3 免疫磁珠与目的菌的分离 | 第64页 |
5.2.4 免疫磁珠特异性分析 | 第64页 |
5.2.5 免疫磁珠结合试纸条检测样品 | 第64-65页 |
5.3 结果分析 | 第65-72页 |
5.3.1 最佳磁珠用量 | 第65页 |
5.3.2 最佳菌体捕获时间 | 第65-66页 |
5.3.3 Vp样品检测结果 | 第66-69页 |
5.3.4 Gh检测结果 | 第69-72页 |
5.3.5 免疫磁珠特异性分析 | 第72页 |
5.4 讨论 | 第72-73页 |
5.4.1 免疫磁珠偶联抗体 | 第72页 |
5.4.2 影响免疫磁珠富集目的菌能力的因素 | 第72-73页 |
5.5 本章小结 | 第73-74页 |
第6章 结论与展望 | 第74-76页 |
6.1 结论 | 第74页 |
6.2 展望 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |