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高强度超声对乳清蛋白的结构及功能特性影响研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
第1章 绪论第20-32页
    1.1 乳清蛋白概述第20-22页
        1.1.1 乳清蛋白的化学组成第20页
        1.1.2 β-乳球蛋白的分离纯化第20-21页
        1.1.3 β-乳球蛋白的结构特性第21-22页
    1.2 乳清蛋白的生物功能特性第22-23页
    1.3 乳清蛋白的改性技术第23-27页
        1.3.1 超声改性第24页
        1.3.2 酶解改性第24-25页
        1.3.3 高压改性第25-26页
        1.3.4 热改性第26-27页
        1.3.5 糖基化改性第27页
    1.4 高强度超声技术国内外研究现状第27-28页
        1.4.1 高强度超声原理第27页
        1.4.2 高强度超声应用第27-28页
    1.5 研究意义与内容第28-32页
        1.5.1 研究意义第28页
        1.5.2 研究内容第28-30页
        1.5.3 技术路线第30-32页
第2章 高强度超声对β-乳球蛋白理化特性的影响及超声改性条件优化第32-60页
    2.1 材料与设备第33-34页
        2.1.1 实验材料与试剂第33-34页
        2.1.2 实验仪器与设备第34页
    2.2 研究路线第34-35页
    2.3 试验方法第35-41页
        2.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化第35-36页
        2.3.2 β-乳球蛋白溶液的制备第36-37页
        2.3.3 超声改性β-乳球蛋白第37页
        2.3.4 试验优化设计第37-38页
        2.3.5 β-乳球蛋白高效液相色谱扫描第38页
        2.3.6 β-乳球蛋白粒径测定第38-39页
        2.3.7 β-乳球蛋白电位测定第39页
        2.3.8 β-乳球蛋白游离巯基含量测定第39页
        2.3.9 β-乳球蛋白表面疏水性测定第39-40页
        2.3.10 β-乳球蛋白SDS-PAGE凝胶电泳测定第40页
        2.3.11 β-乳球蛋白热力学特性测定第40-41页
        2.3.12 β-乳球蛋白圆二色谱扫描第41页
        2.3.13 β-乳球蛋白扫描电镜观察第41页
        2.3.14 数据分析第41页
    2.4 结果与讨论第41-59页
        2.4.1 β-乳球蛋白高效液相色谱分析第41-42页
        2.4.2 β-乳球蛋白单因素试验结果与分析第42-44页
        2.4.3 β-乳球蛋白回归模型建立及响应面分析第44-52页
        2.4.4 高强度超声对β-乳球蛋白粒径及粒径分布的影响第52-53页
        2.4.5 高强度超声对β-乳球蛋白电位的影响第53-54页
        2.4.6 高强度超声对β-乳球蛋白分子量分布的影响第54-55页
        2.4.7 高强度超声对β-乳球蛋白热力学特性的影响第55-56页
        2.4.8 高强度超声对β-乳球蛋白二级结构和三级结构的影响第56-57页
        2.4.9 高强度超声β-乳球蛋白扫描电镜观察第57-59页
    2.5 本章小结第59-60页
第3章 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物结构影响第60-82页
    3.1 材料与设备第60-62页
        3.1.1 实验材料与试剂第60-61页
        3.1.2 实验仪器与设备第61-62页
    3.2 研究路线第62-63页
    3.3 试验方法第63-66页
        3.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化第63页
        3.3.2 β-乳球蛋白溶液的制备第63-64页
        3.3.3 超声改性β-乳球蛋白第64页
        3.3.4 蛋白酶水解β-乳球蛋白第64页
        3.3.5 β-乳球蛋白水解度测定第64-65页
        3.3.6 β-乳球蛋白SDS-PAGE凝胶电泳测定第65页
        3.3.7 β-乳球蛋白高效液相色谱扫描第65页
        3.3.8 β-乳球蛋白圆二色谱扫描第65页
        3.3.9 β-乳球蛋白傅里叶变换红外光谱扫描第65页
        3.3.10 β-乳球蛋白荧光光谱扫描第65页
        3.3.11 β-乳球蛋白紫外光谱扫描第65页
        3.3.12 数据分析第65-66页
    3.4 结果与讨论第66-80页
        3.4.1 高强度超声对β-乳球蛋白水解度的影响第66-67页
        3.4.2 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物分子量分布的影响第67-69页
        3.4.3 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物高效液相色谱的影响第69-71页
        3.4.4 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物圆二色谱的影响第71-74页
        3.4.5 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物傅里叶红外变换光谱的影响第74-75页
        3.4.6 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物荧光光谱的影响第75-78页
        3.4.7 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物紫外吸收光谱的影响第78-80页
    3.5 本章小结第80-82页
第4章 高强度超声β-乳球蛋白及其酶解产物的抗氧化活性及抑制Caco-2细胞氧化应激机制研究第82-110页
    4.1 材料与设备第82-85页
        4.1.1 实验材料与试剂第82-84页
        4.1.2 实验仪器与设备第84-85页
    4.2 研究路线第85-86页
    4.3 试验方法第86-93页
        4.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化第86页
        4.3.2 超声改性β-乳球蛋白及其酶解产物第86页
        4.3.3 ABTS~+自由基清除能力测定第86页
        4.3.4 DPPH自由基清除能力测定第86-87页
        4.3.5 氧化自由基吸收能力(ORAC)的测定第87-88页
        4.3.6 Caco-2细胞的培养第88页
        4.3.7 β-乳球蛋白对Caco-2细胞毒性检测第88-89页
        4.3.8 H_2O_2损伤Caco-2细胞模型的建立第89页
        4.3.9 β-乳球蛋白对H_2O_2诱导Caco-2细胞的联合作用检测第89-90页
        4.3.10 β-乳球蛋白对H_2O_2诱导Caco-2细胞的形态学观察第90页
        4.3.11 Caco-2细胞ROS测定第90页
        4.3.12 Caco-2细胞抗氧化性CAA法第90-91页
        4.3.13 Caco-2细胞MDA水平和抗氧化酶系活性测定第91-92页
        4.3.14 数据分析第92-93页
    4.4 结果与讨论第93-108页
        4.4.1 β-乳球蛋白及其酶解产物的ABTS~+自由基清除能力第93-94页
        4.4.2 β-乳球蛋白及其酶解产物的DPPH自由基清除能力第94-95页
        4.4.3 β-乳球蛋白及其酶解产物的氧自由基吸收能力第95-98页
        4.4.4 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞的毒性作用第98-99页
        4.4.5 H_2O_2损伤Caco-2细胞模型的建立第99-100页
        4.4.6 β-乳球蛋白及其酶解产物对H_2O_2诱导Caco-2细胞氧化损伤的保护作用第100-101页
        4.4.7 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞内ROS水平的影响第101-102页
        4.4.8 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞抗氧化活性的影响第102-105页
        4.4.9 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞MDA水平的影响第105-106页
        4.4.10 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞抗氧化酶系的影响第106-108页
    4.5 本章小结第108-110页
第5章 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物诱导小鼠巨噬细胞免疫功能的影响第110-124页
    5.1 材料与设备第111-112页
        5.1.1 实验材料与试剂第111-112页
        5.1.2 实验仪器与设备第112页
    5.2 研究路线第112-113页
    5.3 试验方法第113-117页
        5.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化第113页
        5.3.2 超声改性β-乳球蛋白及其酶解产物第113页
        5.3.3 小鼠巨噬细胞的培养第113-114页
        5.3.4 小鼠巨噬细胞的形态学观察第114页
        5.3.5 MTS法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞存活率的影响第114页
        5.3.6 Griess法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞释放NO的影响第114-115页
        5.3.7 ELISA法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞细胞因子TNF-α分泌的影响第115-116页
        5.3.8 ELISA法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子IFN-γ的影响第116页
        5.3.9 流式细胞术检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响第116-117页
        5.3.10 数据分析第117页
    5.4 结果与讨论第117-122页
        5.4.1 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞的形态学观察第117-118页
        5.4.2 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞的毒性作用第118-119页
        5.4.3 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞释放NO的影响第119页
        5.4.4 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和IFN-γ的影响第119-121页
        5.4.5 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响第121-122页
    5.5 本章小结第122-124页
第6章 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子的物理特性及抑菌机制的影响第124-146页
    6.1 材料与设备第125-126页
        6.1.1 实验材料与试剂第125-126页
        6.1.2 实验仪器与设备第126页
    6.2 研究路线第126-127页
    6.3 试验方法第127-132页
        6.3.1 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子的制备第127-128页
        6.3.2 菌种活化及培养第128页
        6.3.3 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粒径测定第128-129页
        6.3.4 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子电位测定第129页
        6.3.5 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粘度测定第129页
        6.3.6 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子流变学测定第129-130页
        6.3.7 最小抑菌浓度MIC值测定第130页
        6.3.8 时间-杀菌曲线测定第130-131页
        6.3.9 琼脂扩散实验第131页
        6.3.10 细胞膜损伤实验第131-132页
        6.3.11 扫描电镜实验第132页
        6.3.12 数据分析第132页
    6.4 结果与讨论第132-144页
        6.4.1 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粒径及粒径分布的影响第132-134页
        6.4.2 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子电位的影响第134页
        6.4.3 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粘度的影响第134-136页
        6.4.4 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子模量的影响第136-138页
        6.4.5 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌MIC值第138-139页
        6.4.6 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌的时间-杀菌曲线第139页
        6.4.7 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌的琼脂扩散实验第139-142页
        6.4.8 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子对金黄色葡萄球菌细胞膜的影响第142-143页
        6.4.9 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子对金黄色葡萄球菌的扫描电镜观察第143-144页
    6.5 本章小结第144-146页
第7章 结论与创新点第146-151页
    7.1 高强度超声对β-乳球蛋白理化特性的影响及超声改性条件优化第146-147页
    7.2 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物结构影响第147页
    7.3 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物抗氧化活性及抑制Caco-2细胞氧化应激机制的影响第147-148页
    7.4 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物诱导小鼠巨噬细胞免疫功能的影响第148-149页
    7.5 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子物理特性及抑菌机制的影响第149页
    7.6 创新点第149-151页
参考文献第151-178页
导师简介第178-179页
作者简介第179-180页
攻读博士学位期间所取得的科研成果第180-181页
致谢第181页

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