中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第20-32页 |
1.1 乳清蛋白概述 | 第20-22页 |
1.1.1 乳清蛋白的化学组成 | 第20页 |
1.1.2 β-乳球蛋白的分离纯化 | 第20-21页 |
1.1.3 β-乳球蛋白的结构特性 | 第21-22页 |
1.2 乳清蛋白的生物功能特性 | 第22-23页 |
1.3 乳清蛋白的改性技术 | 第23-27页 |
1.3.1 超声改性 | 第24页 |
1.3.2 酶解改性 | 第24-25页 |
1.3.3 高压改性 | 第25-26页 |
1.3.4 热改性 | 第26-27页 |
1.3.5 糖基化改性 | 第27页 |
1.4 高强度超声技术国内外研究现状 | 第27-28页 |
1.4.1 高强度超声原理 | 第27页 |
1.4.2 高强度超声应用 | 第27-28页 |
1.5 研究意义与内容 | 第28-32页 |
1.5.1 研究意义 | 第28页 |
1.5.2 研究内容 | 第28-30页 |
1.5.3 技术路线 | 第30-32页 |
第2章 高强度超声对β-乳球蛋白理化特性的影响及超声改性条件优化 | 第32-60页 |
2.1 材料与设备 | 第33-34页 |
2.1.1 实验材料与试剂 | 第33-34页 |
2.1.2 实验仪器与设备 | 第34页 |
2.2 研究路线 | 第34-35页 |
2.3 试验方法 | 第35-41页 |
2.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化 | 第35-36页 |
2.3.2 β-乳球蛋白溶液的制备 | 第36-37页 |
2.3.3 超声改性β-乳球蛋白 | 第37页 |
2.3.4 试验优化设计 | 第37-38页 |
2.3.5 β-乳球蛋白高效液相色谱扫描 | 第38页 |
2.3.6 β-乳球蛋白粒径测定 | 第38-39页 |
2.3.7 β-乳球蛋白电位测定 | 第39页 |
2.3.8 β-乳球蛋白游离巯基含量测定 | 第39页 |
2.3.9 β-乳球蛋白表面疏水性测定 | 第39-40页 |
2.3.10 β-乳球蛋白SDS-PAGE凝胶电泳测定 | 第40页 |
2.3.11 β-乳球蛋白热力学特性测定 | 第40-41页 |
2.3.12 β-乳球蛋白圆二色谱扫描 | 第41页 |
2.3.13 β-乳球蛋白扫描电镜观察 | 第41页 |
2.3.14 数据分析 | 第41页 |
2.4 结果与讨论 | 第41-59页 |
2.4.1 β-乳球蛋白高效液相色谱分析 | 第41-42页 |
2.4.2 β-乳球蛋白单因素试验结果与分析 | 第42-44页 |
2.4.3 β-乳球蛋白回归模型建立及响应面分析 | 第44-52页 |
2.4.4 高强度超声对β-乳球蛋白粒径及粒径分布的影响 | 第52-53页 |
2.4.5 高强度超声对β-乳球蛋白电位的影响 | 第53-54页 |
2.4.6 高强度超声对β-乳球蛋白分子量分布的影响 | 第54-55页 |
2.4.7 高强度超声对β-乳球蛋白热力学特性的影响 | 第55-56页 |
2.4.8 高强度超声对β-乳球蛋白二级结构和三级结构的影响 | 第56-57页 |
2.4.9 高强度超声β-乳球蛋白扫描电镜观察 | 第57-59页 |
2.5 本章小结 | 第59-60页 |
第3章 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物结构影响 | 第60-82页 |
3.1 材料与设备 | 第60-62页 |
3.1.1 实验材料与试剂 | 第60-61页 |
3.1.2 实验仪器与设备 | 第61-62页 |
3.2 研究路线 | 第62-63页 |
3.3 试验方法 | 第63-66页 |
3.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化 | 第63页 |
3.3.2 β-乳球蛋白溶液的制备 | 第63-64页 |
3.3.3 超声改性β-乳球蛋白 | 第64页 |
3.3.4 蛋白酶水解β-乳球蛋白 | 第64页 |
3.3.5 β-乳球蛋白水解度测定 | 第64-65页 |
3.3.6 β-乳球蛋白SDS-PAGE凝胶电泳测定 | 第65页 |
3.3.7 β-乳球蛋白高效液相色谱扫描 | 第65页 |
3.3.8 β-乳球蛋白圆二色谱扫描 | 第65页 |
3.3.9 β-乳球蛋白傅里叶变换红外光谱扫描 | 第65页 |
3.3.10 β-乳球蛋白荧光光谱扫描 | 第65页 |
3.3.11 β-乳球蛋白紫外光谱扫描 | 第65页 |
3.3.12 数据分析 | 第65-66页 |
3.4 结果与讨论 | 第66-80页 |
3.4.1 高强度超声对β-乳球蛋白水解度的影响 | 第66-67页 |
3.4.2 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物分子量分布的影响 | 第67-69页 |
3.4.3 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物高效液相色谱的影响 | 第69-71页 |
3.4.4 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物圆二色谱的影响 | 第71-74页 |
3.4.5 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物傅里叶红外变换光谱的影响 | 第74-75页 |
3.4.6 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物荧光光谱的影响 | 第75-78页 |
3.4.7 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物紫外吸收光谱的影响 | 第78-80页 |
3.5 本章小结 | 第80-82页 |
第4章 高强度超声β-乳球蛋白及其酶解产物的抗氧化活性及抑制Caco-2细胞氧化应激机制研究 | 第82-110页 |
4.1 材料与设备 | 第82-85页 |
4.1.1 实验材料与试剂 | 第82-84页 |
4.1.2 实验仪器与设备 | 第84-85页 |
4.2 研究路线 | 第85-86页 |
4.3 试验方法 | 第86-93页 |
4.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化 | 第86页 |
4.3.2 超声改性β-乳球蛋白及其酶解产物 | 第86页 |
4.3.3 ABTS~+自由基清除能力测定 | 第86页 |
4.3.4 DPPH自由基清除能力测定 | 第86-87页 |
4.3.5 氧化自由基吸收能力(ORAC)的测定 | 第87-88页 |
4.3.6 Caco-2细胞的培养 | 第88页 |
4.3.7 β-乳球蛋白对Caco-2细胞毒性检测 | 第88-89页 |
4.3.8 H_2O_2损伤Caco-2细胞模型的建立 | 第89页 |
4.3.9 β-乳球蛋白对H_2O_2诱导Caco-2细胞的联合作用检测 | 第89-90页 |
4.3.10 β-乳球蛋白对H_2O_2诱导Caco-2细胞的形态学观察 | 第90页 |
4.3.11 Caco-2细胞ROS测定 | 第90页 |
4.3.12 Caco-2细胞抗氧化性CAA法 | 第90-91页 |
4.3.13 Caco-2细胞MDA水平和抗氧化酶系活性测定 | 第91-92页 |
4.3.14 数据分析 | 第92-93页 |
4.4 结果与讨论 | 第93-108页 |
4.4.1 β-乳球蛋白及其酶解产物的ABTS~+自由基清除能力 | 第93-94页 |
4.4.2 β-乳球蛋白及其酶解产物的DPPH自由基清除能力 | 第94-95页 |
4.4.3 β-乳球蛋白及其酶解产物的氧自由基吸收能力 | 第95-98页 |
4.4.4 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞的毒性作用 | 第98-99页 |
4.4.5 H_2O_2损伤Caco-2细胞模型的建立 | 第99-100页 |
4.4.6 β-乳球蛋白及其酶解产物对H_2O_2诱导Caco-2细胞氧化损伤的保护作用 | 第100-101页 |
4.4.7 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞内ROS水平的影响 | 第101-102页 |
4.4.8 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞抗氧化活性的影响 | 第102-105页 |
4.4.9 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞MDA水平的影响 | 第105-106页 |
4.4.10 β-乳球蛋白及其酶解产物对Caco-2细胞抗氧化酶系的影响 | 第106-108页 |
4.5 本章小结 | 第108-110页 |
第5章 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物诱导小鼠巨噬细胞免疫功能的影响 | 第110-124页 |
5.1 材料与设备 | 第111-112页 |
5.1.1 实验材料与试剂 | 第111-112页 |
5.1.2 实验仪器与设备 | 第112页 |
5.2 研究路线 | 第112-113页 |
5.3 试验方法 | 第113-117页 |
5.3.1 β-乳球蛋白的分离纯化 | 第113页 |
5.3.2 超声改性β-乳球蛋白及其酶解产物 | 第113页 |
5.3.3 小鼠巨噬细胞的培养 | 第113-114页 |
5.3.4 小鼠巨噬细胞的形态学观察 | 第114页 |
5.3.5 MTS法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞存活率的影响 | 第114页 |
5.3.6 Griess法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞释放NO的影响 | 第114-115页 |
5.3.7 ELISA法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞细胞因子TNF-α分泌的影响 | 第115-116页 |
5.3.8 ELISA法检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子IFN-γ的影响 | 第116页 |
5.3.9 流式细胞术检测β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第116-117页 |
5.3.10 数据分析 | 第117页 |
5.4 结果与讨论 | 第117-122页 |
5.4.1 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞的形态学观察 | 第117-118页 |
5.4.2 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞的毒性作用 | 第118-119页 |
5.4.3 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞释放NO的影响 | 第119页 |
5.4.4 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和IFN-γ的影响 | 第119-121页 |
5.4.5 β-乳球蛋白及其酶解产物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第121-122页 |
5.5 本章小结 | 第122-124页 |
第6章 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子的物理特性及抑菌机制的影响 | 第124-146页 |
6.1 材料与设备 | 第125-126页 |
6.1.1 实验材料与试剂 | 第125-126页 |
6.1.2 实验仪器与设备 | 第126页 |
6.2 研究路线 | 第126-127页 |
6.3 试验方法 | 第127-132页 |
6.3.1 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子的制备 | 第127-128页 |
6.3.2 菌种活化及培养 | 第128页 |
6.3.3 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粒径测定 | 第128-129页 |
6.3.4 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子电位测定 | 第129页 |
6.3.5 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粘度测定 | 第129页 |
6.3.6 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子流变学测定 | 第129-130页 |
6.3.7 最小抑菌浓度MIC值测定 | 第130页 |
6.3.8 时间-杀菌曲线测定 | 第130-131页 |
6.3.9 琼脂扩散实验 | 第131页 |
6.3.10 细胞膜损伤实验 | 第131-132页 |
6.3.11 扫描电镜实验 | 第132页 |
6.3.12 数据分析 | 第132页 |
6.4 结果与讨论 | 第132-144页 |
6.4.1 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粒径及粒径分布的影响 | 第132-134页 |
6.4.2 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子电位的影响 | 第134页 |
6.4.3 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子粘度的影响 | 第134-136页 |
6.4.4 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子模量的影响 | 第136-138页 |
6.4.5 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌MIC值 | 第138-139页 |
6.4.6 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌的时间-杀菌曲线 | 第139页 |
6.4.7 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子抑制金黄色葡萄球菌的琼脂扩散实验 | 第139-142页 |
6.4.8 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子对金黄色葡萄球菌细胞膜的影响 | 第142-143页 |
6.4.9 乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子对金黄色葡萄球菌的扫描电镜观察 | 第143-144页 |
6.5 本章小结 | 第144-146页 |
第7章 结论与创新点 | 第146-151页 |
7.1 高强度超声对β-乳球蛋白理化特性的影响及超声改性条件优化 | 第146-147页 |
7.2 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物结构影响 | 第147页 |
7.3 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物抗氧化活性及抑制Caco-2细胞氧化应激机制的影响 | 第147-148页 |
7.4 高强度超声对β-乳球蛋白及其酶解产物诱导小鼠巨噬细胞免疫功能的影响 | 第148-149页 |
7.5 高强度超声对乳清蛋白-桃柁酚纳米粒子物理特性及抑菌机制的影响 | 第149页 |
7.6 创新点 | 第149-151页 |
参考文献 | 第151-178页 |
导师简介 | 第178-179页 |
作者简介 | 第179-180页 |
攻读博士学位期间所取得的科研成果 | 第180-181页 |
致谢 | 第181页 |