中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11页 |
第一章 前言 | 第13-22页 |
1.1 纤维素酶的概述 | 第13-16页 |
1.1.1 纤维素酶的组成 | 第13页 |
1.1.2 纤维素酶的来源及分类 | 第13-14页 |
1.1.3 纤维素酶的作用机理 | 第14-15页 |
1.1.4 纤维素酶的应用 | 第15-16页 |
1.1.5 低温纤维素酶的研究现状 | 第16页 |
1.2 响应面分析法优化菌株发酵条件 | 第16-17页 |
1.2.1 响应面分析法的优势 | 第16-17页 |
1.2.2 响应面分析法的应用 | 第17页 |
1.3 纤维素酶分离纯化技术的研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 纤维素酶分离纯化常用技术 | 第17-19页 |
1.3.2 纤维素酶分离纯化新型技术 | 第19-20页 |
1.4 本课题研究目的、意义、内容及技术路线 | 第20-22页 |
1.4.1 课题研究目的及意义 | 第20页 |
1.4.2 研究内容及技术路线 | 第20-22页 |
第二章 菌株鉴定及酶学特性研究 | 第22-32页 |
2.1 试验材料 | 第22页 |
2.1.1 供试菌株 | 第22页 |
2.1.2 培养基 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 菌种鉴定 | 第22-23页 |
2.2.2 生长曲线的测定 | 第23-24页 |
2.2.3 光学显微镜下菌体形态观察 | 第24页 |
2.2.4 粗酶液的制备 | 第24页 |
2.2.5 酶系组成分析 | 第24-25页 |
2.2.6 酶学特性的研究 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
2.3.1 菌株鉴定结果 | 第25-26页 |
2.3.2 菌株的生长状况 | 第26-27页 |
2.3.3 菌株的菌体形态变化过程 | 第27页 |
2.3.4 酶系中不同组分酶的活力 | 第27-28页 |
2.3.5 酶学特性 | 第28-30页 |
2.4 小结 | 第30-32页 |
第三章 响应面法优化产酶的发酵条件 | 第32-45页 |
3.1 试验材料 | 第32页 |
3.1.1 供试菌株 | 第32页 |
3.1.2 培养基 | 第32页 |
3.1.3 主要试剂 | 第32页 |
3.2 试验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 葡萄糖浓度的测定 | 第32-33页 |
3.2.2 酶活的测定 | 第33页 |
3.2.3 种子液的制备 | 第33页 |
3.2.4 粗酶液的制备 | 第33页 |
3.2.5 CMCase分泌位置的确定 | 第33页 |
3.2.6 单因素试验 | 第33-34页 |
3.2.7 Plackett-Burman试验设计筛选显著因素 | 第34-35页 |
3.2.8 响应面试验设计 | 第35页 |
3.2.9 测定优化条件下的酶活及处理数据 | 第35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-44页 |
3.3.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
3.3.2 CMCase的分泌位置 | 第36页 |
3.3.3 单因素分析 | 第36-40页 |
3.3.4 P-B试验 | 第40-41页 |
3.3.5 响应面模型的构建 | 第41-44页 |
3.4 小结 | 第44-45页 |
第四章 酶的分离纯化及其活性酶谱分析 | 第45-51页 |
4.1 试验材料 | 第45页 |
4.2 试验方法 | 第45-47页 |
4.2.1 粗酶液的制备 | 第45页 |
4.2.2 酶活的测定 | 第45页 |
4.2.3 蛋白质浓度的测定 | 第45-46页 |
4.2.4 (NH_4)_2SO_4分级沉淀初步提纯 | 第46页 |
4.2.5 透析脱盐及超滤浓缩 | 第46页 |
4.2.6 SDS-PAGE检测菌体全蛋白 | 第46页 |
4.2.7 CMC-Native PAGE检验CMCase活性 | 第46-47页 |
4.2.8 DEAE-Cellulose 52离子交换柱层析 | 第47页 |
4.3 结果与分析 | 第47-49页 |
4.3.1 蛋白浓度标准曲线的绘制 | 第47页 |
4.3.2 (NH_4)_2SO_4最佳饱和度 | 第47-48页 |
4.3.3 蛋白种类 | 第48页 |
4.3.4 活性酶谱分析 | 第48-49页 |
4.3.5 酶活性峰检测 | 第49页 |
4.4 小结 | 第49-51页 |
第五章 全文结论与展望 | 第51-52页 |
5.1 结论 | 第51页 |
5.2 展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录 | 第59-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第63页 |