摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 甜叶菊叶片主要成分及其利用现状 | 第10页 |
1.2 绿原酸类化合物的活性作用 | 第10-11页 |
1.3 绿原酸类化合物化学合成 | 第11页 |
1.4 毛状根的诱导和培养及在植物次生代谢物生产中的应用 | 第11-14页 |
1.4.1 毛状根的诱导和培养 | 第11-12页 |
1.4.2 毛状根培养的主要影响因素 | 第12-13页 |
1.4.3 毛状根在植物次生代谢产物生产中的应用 | 第13-14页 |
1.5 毛状根扩大培养的研究与应用现状 | 第14页 |
1.6 课题来源及研究目的和意义 | 第14-16页 |
1.6.1 课题来源 | 第14页 |
1.6.2 研究的目的和意义 | 第14-16页 |
1.7 研究技术路线 | 第16页 |
1.8 主要研究内容 | 第16-17页 |
1.9 论文的创新之处 | 第17-18页 |
第二章 甜叶菊毛状根的诱导与鉴定 | 第18-26页 |
2.1 试验材料与仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.1 主要材料 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-20页 |
2.2.1 无菌苗的培养 | 第19页 |
2.2.2 发根农杆菌的活化 | 第19页 |
2.2.3 甜叶菊叶片外植体的预培养 | 第19页 |
2.2.4 毛状根的诱导及除菌培养 | 第19-20页 |
2.2.5 毛状根液体培养 | 第20页 |
2.2.6 毛状根的鉴定 | 第20页 |
2.3 结果与分析 | 第20-24页 |
2.3.1 发根农杆菌R1601诱导甜叶菊毛状根 | 第20-21页 |
2.3.2 发根农杆菌ACCC10060诱导甜叶菊毛状根 | 第21-22页 |
2.3.3 发根农杆菌A4诱导甜叶菊毛状根 | 第22-23页 |
2.3.4 不同发根农杆菌诱导甜叶菊毛状根的比较 | 第23页 |
2.3.5 毛状根的鉴定 | 第23-24页 |
2.4 讨论 | 第24-25页 |
2.5 小结 | 第25-26页 |
第三章 甜叶菊毛状根优良根系的筛选 | 第26-38页 |
3.1 材料 | 第26页 |
3.1.1 材料 | 第26页 |
3.2 方法 | 第26-27页 |
3.2.1 发根农杆菌R1601所诱导的单克隆根系的培养和筛选 | 第26页 |
3.2.2 发根农杆菌ACCC10060所诱导的单克隆根系的培养和筛选 | 第26页 |
3.2.3 发根农杆菌A4所诱导的单克隆根系的培养和筛选 | 第26-27页 |
3.2.4 毛状根中绿原酸类物质的提取 | 第27页 |
3.2.5 绿原酸类化合物的测定 | 第27页 |
3.2.6 绿原酸类化合物测定标准曲线的绘制 | 第27页 |
3.2.7 毛状根中绿原酸类化合物的检测 | 第27页 |
3.2.8 统计分析 | 第27页 |
3.3 结果与分析 | 第27-36页 |
3.3.1 毛状根绿原酸类成分检测方法 | 第27-28页 |
3.3.2 发根农杆菌R1601所诱导的单克隆毛状根系的筛选 | 第28-30页 |
3.3.3 发根农杆菌ACCC10060所诱导的单克隆毛状根系的筛选 | 第30-32页 |
3.3.4 发根农杆菌A4所诱导的单克隆毛状根系的筛选 | 第32-34页 |
3.3.5 不同发根农杆菌所诱导的优良单克隆根系的比较与筛选 | 第34-36页 |
3.4 讨论 | 第36-37页 |
3.5 小结 | 第37-38页 |
第四章 毛状根扩大培养方式及关键技术参数研究 | 第38-50页 |
4.1 材料及试剂 | 第38页 |
4.1.1 材料 | 第38页 |
4.1.2 试剂 | 第38页 |
4.1.3 仪器设备 | 第38页 |
4.2 方法 | 第38-39页 |
4.2.1 甜叶菊毛状根液体培养及其生物量的测定 | 第38页 |
4.2.2 三种培养方式的试验设计 | 第38-39页 |
4.2.3 鼓泡式毛状根培养关键技术参数试验设计 | 第39页 |
4.2.4 3 L、5 L和 10 L毛状根扩大培养试验 | 第39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-48页 |
4.3.1 甜叶菊毛状根的生长特性 | 第39-40页 |
4.3.2 毛状根三种培养方式的试验装置 | 第40-41页 |
4.3.3 培养方式对甜叶菊毛状根生长和绿原酸类物质含量的影响 | 第41-43页 |
4.3.4 培养器通气装置的设计 | 第43-44页 |
4.3.5 通气量对甜叶菊毛状根生长和绿原酸类物质含量的影响 | 第44-45页 |
4.3.6 通气方式对甜叶菊毛状根生长和绿原酸类物质含量的影响 | 第45-46页 |
4.3.7 培养器罐体形状对毛状根生长和绿原酸类物质含量的影响 | 第46-47页 |
4.3.8 装液量对甜叶菊毛状根生长和绿原酸类物质含量的影响 | 第47页 |
4.3.9 3 L、5 L、10 L鼓泡式扩大培养试验 | 第47-48页 |
4.4 讨论 | 第48-49页 |
4.5 小结 | 第49-50页 |
第五章 毛状根扩大培养的营养物质消耗规律及补料培养 | 第50-59页 |
5.1 材料与设备 | 第50-51页 |
5.1.1 材料 | 第50页 |
5.1.2 主要试剂 | 第50页 |
5.1.3 主要设备 | 第50-51页 |
5.2 方法 | 第51-53页 |
5.2.1 毛状根 10 L鼓泡式扩大培养方法 | 第51页 |
5.2.2 毛状根补料培养试验设计 | 第51页 |
5.2.3 总糖的测定 | 第51页 |
5.2.4 还原糖的测定 | 第51-52页 |
5.2.5 培养基中蔗糖浓度的计算 | 第52页 |
5.2.6 氮源的测定 | 第52页 |
5.2.7 磷酸根离子浓度的测定 | 第52页 |
5.2.8 无机离子浓度的测定 | 第52-53页 |
5.2.9 培养基中pH值的测定 | 第53页 |
5.2.10 培养基中溶氧的测定 | 第53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-57页 |
5.3.1 碳源的消耗规律 | 第53页 |
5.3.2 氮源的消耗规律 | 第53-54页 |
5.3.3 磷酸根离子的消耗规律 | 第54-55页 |
5.3.4 铁离子的消耗规律 | 第55页 |
5.3.5 溶氧及pH值的变化规律 | 第55-56页 |
5.3.6 甜叶菊毛状根补料培养 | 第56-57页 |
5.4 讨论 | 第57-58页 |
5.5 小结 | 第58-59页 |
第六章 结论与展望 | 第59-61页 |
6.1 结论 | 第59页 |
6.2 展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录 在校期间发表的论文情况 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |