| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1 大黄鱼鱼卵简介 | 第12页 |
| 2 生物活性肽 | 第12-13页 |
| 3 抗氧化肽的来源 | 第13-15页 |
| 3.1 生物体内天然抗氧化肽 | 第13-14页 |
| 3.2 蛋白酶解物来源抗氧化肽 | 第14-15页 |
| 4 抗氧化肽的制备方法 | 第15-16页 |
| 4.1 蛋白酶水解法 | 第15页 |
| 4.2 微生物发酵法 | 第15-16页 |
| 5 抗氧化肽的分离纯化 | 第16-17页 |
| 5.1 超滤 | 第16-17页 |
| 5.2 离子交换层析 | 第17页 |
| 5.3 凝胶过滤层析 | 第17页 |
| 5.4 高效液相色谱 | 第17页 |
| 6 抗氧化肽的结构鉴定 | 第17-18页 |
| 6.1 质谱 | 第18页 |
| 6.2 核磁共振 | 第18页 |
| 7 抗氧化肽活性的测定方法 | 第18-20页 |
| 7.1 体外检测 | 第18-20页 |
| 7.2 体内实验 | 第20页 |
| 8 本课题的研究目的意义及内容 | 第20-22页 |
| 8.1 本论文的研究目的和意义 | 第21页 |
| 8.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 大黄鱼鱼卵水溶蛋白提取条件优化 | 第22-31页 |
| 1 材料与仪器 | 第22-23页 |
| 1.1 材料及试剂 | 第22页 |
| 1.2 仪器设备 | 第22-23页 |
| 2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.1 原料的处理 | 第23页 |
| 2.2 主要成分测定 | 第23-24页 |
| 2.3 水溶蛋白质的提取制备 | 第24页 |
| 2.4 正交试验设计 | 第24-25页 |
| 2.5 蛋白质提取率计算 | 第25页 |
| 2.6 氨基酸组成分析 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 3.1 大黄鱼脱脂鱼卵主要成分分析 | 第25页 |
| 3.2 大黄鱼鱼卵水溶蛋白的提取制备 | 第25-29页 |
| 3.3 氨基酸组成分析 | 第29-30页 |
| 4 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 大黄鱼鱼卵水溶蛋白酶解工艺优化 | 第31-44页 |
| 1 材料与仪器 | 第31-32页 |
| 1.1 材料及试剂 | 第31页 |
| 1.2 仪器设备 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2.1 大黄鱼鱼卵水溶蛋白的制备 | 第32页 |
| 2.2 大黄鱼鱼卵水溶蛋白酶解工艺 | 第32页 |
| 2.3 蛋白酶的筛选 | 第32-33页 |
| 2.4 单酶酶解工艺优化 | 第33页 |
| 2.5 指标测定方法 | 第33-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-43页 |
| 3.1 四肽标准曲线的制作 | 第34-35页 |
| 3.2 蛋白酶的选择 | 第35-36页 |
| 3.3 碱性蛋白酶酶解工艺优化 | 第36-43页 |
| 4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定 | 第44-57页 |
| 1 材料与仪器 | 第44-45页 |
| 1.1 材料及试剂 | 第44-45页 |
| 1.2 仪器设备 | 第45页 |
| 2 试验方法 | 第45-48页 |
| 2.1 酶解液的超滤分离 | 第45页 |
| 2.2 酶解液的凝胶色谱分离 | 第45-46页 |
| 2.3 半制备型高效液相分离纯化大黄鱼鱼卵水溶性蛋白抗氧化肽 | 第46页 |
| 2.4 大黄鱼鱼卵水溶性蛋白抗氧化肽序列分析 | 第46-47页 |
| 2.5 分离纯化各组分抗氧化能力的测定 | 第47-48页 |
| 3 结果与讨论 | 第48-56页 |
| 3.1 超滤分离及其组分抗氧化活性分析 | 第48-49页 |
| 3.2 葡聚糖凝胶G-15分离及其组分抗氧化活性分析 | 第49-51页 |
| 3.3 半制备反相高效液相色谱分离及其产物抗氧化活性分析 | 第51-53页 |
| 3.4 大黄鱼鱼卵水溶性蛋白抗氧化肽分子量及结构鉴定 | 第53-56页 |
| 4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽对HepG-2细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第57-71页 |
| 1 材料与仪器 | 第57-59页 |
| 1.1 材料及试剂 | 第57-58页 |
| 1.2 仪器设备 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-63页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 2.2 细胞存活率的测定(MTT法) | 第59页 |
| 2.3 细胞内活性氧自由基(ROS)的测定 | 第59-60页 |
| 2.4 细胞内SOD、CAT活性的测定 | 第60-61页 |
| 2.5 细胞内GSH-Px活性和GSH含量测定 | 第61-62页 |
| 2.6 Western blot法分析细胞内HO-1蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 3 结果与讨论 | 第63-70页 |
| 3.1 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽对HepG-2细胞的毒性作用 | 第63-64页 |
| 3.2 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽对H_2O_2损伤HepG-2细胞的保护作用 | 第64-65页 |
| 3.3 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽对细胞内ROS和GSH的影响 | 第65-67页 |
| 3.4 大黄鱼鱼卵水溶蛋白抗氧化肽对细胞内SOD、CAT、GSH-Px的影响 | 第67-69页 |
| 3.5 大黄鱼鱼卵水溶性蛋白抗氧化肽对细胞内HO-1蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
| 4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第六章 结论与展望 | 第71-74页 |
| 1 结论 | 第71-72页 |
| 2 创新点 | 第72页 |
| 3 展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
