| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-30页 |
| ·中度嗜盐菌 | 第10-13页 |
| ·中度嗜盐菌简介 | 第10-11页 |
| ·中度嗜盐菌的耐盐机制 | 第11-12页 |
| ·中度嗜盐菌的应用 | 第12-13页 |
| ·渗透压补偿溶质 | 第13-15页 |
| ·渗透压补偿溶质概述 | 第13-14页 |
| ·渗透压补偿溶质分类 | 第14-15页 |
| ·四氢嘧啶及其合成调节 | 第15-22页 |
| ·四氢嘧啶 | 第15-17页 |
| ·四氢嘧啶合成途径 | 第17页 |
| ·四氢嘧啶合成酶及其基因 | 第17-18页 |
| ·四氢嘧啶合成调节机理 | 第18-20页 |
| ·四氢嘧啶的应用 | 第20-22页 |
| ·四氢嘧啶制备技术 | 第22-23页 |
| ·分批和流加发酵 | 第22-23页 |
| ·细菌挤奶 | 第23页 |
| ·生长细胞和静息细胞两阶段联合制备法 | 第23页 |
| ·四氢嘧啶代谢工程 | 第23-25页 |
| ·转座子构建四氢嘧啶吸收缺陷型菌株制备四氢嘧啶 | 第24页 |
| ·Red重组构建四氢嘧啶吸收缺陷型菌株制备四氢嘧啶 | 第24-25页 |
| ·Red重组技术 | 第25-28页 |
| ·Red重组系统的结构 | 第25页 |
| ·Red重组机制 | 第25-26页 |
| ·Red重组策略 | 第26-28页 |
| ·Red重组技术应用 | 第28页 |
| ·本论文研究主要内容、目的意义 | 第28-30页 |
| 第2章 H.salina DSM 5928~T teaABC基因克隆 | 第30-37页 |
| ·实验材料和试剂 | 第30-32页 |
| ·实验菌株 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·引物 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·试剂配制 | 第32页 |
| ·提取H.salina DSM 5928~T基因组DNA | 第32-33页 |
| ·染色体步移PCR技术获取teaABC基因 | 第33页 |
| ·PCR方法 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第33页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-36页 |
| ·1 H.salina DSM 5928~T基因组DNA提取 | 第34页 |
| ·2 染色体步移PCR扩增H.salina DSM 5928~T的teaABC基因 | 第34-35页 |
| ·3 H.salina DSM 5928~T DNA片段结构分析 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 Red重组构建四氢嘧啶合成工程菌 | 第37-47页 |
| ·实验材料和试剂 | 第37-38页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·试剂配制 | 第38页 |
| ·构建Red重组DNA片段 | 第38-39页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·质粒转化方法 | 第39-40页 |
| ·质粒pKD46的PCR验证 | 第40页 |
| ·Red重组融合蛋白的诱导表达 | 第40页 |
| ·Red重组DNA片段电击转化 | 第40页 |
| ·重组体的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·四氢嘧啶浓度测定 | 第41页 |
| ·细胞干重的测定 | 第41-42页 |
| ·四氢嘧啶吸收速率测定 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-45页 |
| ·1 质粒pKD46转化H.salina DSM 5928~T | 第42-43页 |
| ·Red同源重组 | 第43-45页 |
| ·四氢嘧啶吸收缺陷型菌株筛选 | 第45页 |
| ·本章小结 | 第45-47页 |
| 第4章 四氢嘧啶的制备 | 第47-54页 |
| ·实验材料和试剂 | 第47-48页 |
| ·实验菌株 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·试剂配制 | 第48页 |
| ·四氢嘧啶诱导培养 | 第48页 |
| ·菌株生长量的测定 | 第48页 |
| ·四氢嘧啶浓度测定 | 第48页 |
| ·细胞干重的测定 | 第48-49页 |
| ·四氢嘧啶发酵 | 第49页 |
| ·建立四氢嘧啶发酵动力学模型 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-53页 |
| ·四氢嘧啶发酵 | 第49-50页 |
| ·四氢嘧啶发酵动力学模型 | 第50-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录A 英文缩写说明 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间公开发表论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 研究生履历 | 第65页 |
