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应用基因组改组技术选育真菌α-淀粉酶高产菌株

摘要第1-3页
Abstract第3-5页
中文文摘第5-7页
目录第7-12页
绪论第12-28页
 1 α-淀粉酶的概述第12-18页
   ·淀粉及淀粉酶第12-13页
     ·淀粉第12页
     ·淀粉酶第12-13页
   ·α-淀粉酶第13-18页
     ·α-淀粉酶的应用第14-15页
     ·α-淀粉酶的活性测定方法第15页
     ·α-淀粉酶的来源与生产第15-16页
     ·α-淀粉酶菌种的选育进展第16-18页
 2 基因组改组育种技术第18-24页
   ·基因组改组技术的原理第18-19页
   ·基因组改组技术的优点第19-20页
   ·基因组改组技术的应用实例第20-21页
   ·基因组改组技术的方法第21-24页
     ·原生质体制备和再生第21-22页
     ·原生质体融合第22-23页
     ·融合子的检出第23-24页
 3 发酵条件的优化研究第24-26页
   ·发酵培养基的研究第24页
   ·发酵培养条件的研究第24-25页
   ·试验设计与优化第25-26页
 4 本论文的目的意义及研究内容第26-28页
第一章 米曲霉传统诱变的研究第28-40页
 1 材料与方法第28-31页
   ·实验材料第28-30页
     ·菌种第28页
     ·主要药品与试剂第28-29页
     ·主要仪器第29页
     ·培养基第29-30页
   ·实验方法第30-31页
     ·α-淀粉酶活力的测定第30页
     ·葡萄糖对米曲霉α-淀粉酶合成的影响第30页
     ·诱变处理过程第30-31页
       ·单孢子悬液的制备第30-31页
       ·紫外线处理第31页
       ·微波处理第31页
     ·突变株筛选第31页
       ·突变株初筛第31页
       ·突变株复筛第31页
 2 结果与分析第31-37页
   ·葡萄糖对米曲霉α-淀粉酶合成的影响第31-33页
     ·摇瓶培养中葡萄糖对米曲霉α-淀粉酶合成的影响第32-33页
     ·平板培养中葡萄糖对米曲霉α-淀粉酶合成的影响第33页
   ·紫外诱变构建正突变库第33-35页
     ·紫外诱变剂量的选择第33-34页
     ·紫外诱变菌株的筛选结果第34-35页
   ·微波诱变构建正突变库第35-37页
     ·微波诱变剂的选择第35页
     ·微波诱变菌株的筛选结果第35-37页
 3 讨论与小结第37-40页
   ·不同诱变方法对构建正突变库的影响第37页
   ·不同初筛方案对筛选正突变株的影响第37-38页
   ·小结第38-40页
第二章 米曲霉原生质体制备与再生条件研究第40-52页
 1 材料与方法第40-41页
   ·实验材料第40-41页
     ·菌种第40页
     ·主要药品与试剂第40页
     ·主要仪器第40页
     ·培养基第40-41页
   ·实验方法第41页
     ·菌丝体培养第41页
     ·酶液的配制第41页
     ·原生质体的制备与再生第41页
 2. 结果和分析第41-50页
   ·菌龄的选择第41-42页
   ·酶液组成的选择第42-46页
     ·单一酶液对原生质体形成量的影响第42-43页
     ·响应面分析实验第43-46页
   ·酶解时间的选择第46页
   ·酶解温度的选择第46-47页
   ·渗透压稳定剂的选择第47-48页
   ·再生培养基的选择第48-49页
   ·米曲霉原生质体形态观察第49-50页
 3 讨论与小结第50-52页
第三章 基因组改组选育α-淀粉酶高产菌株第52-66页
 1 材料与方法第52-55页
   ·实验材料第52-53页
     ·菌种第52页
     ·主要药品与试剂第52-53页
     ·主要仪器第53页
     ·培养基第53页
   ·实验方法第53-55页
     ·米曲霉原生质体灭活标记第53-54页
     ·米曲霉原生质体融合第54页
     ·米曲霉基因组改组第54-55页
 2 结果与分析第55-63页
   ·米曲霉原生质体灭活实验第55-56页
     ·紫外灭活第55页
     ·热灭活第55-56页
   ·米曲霉原生质体融合条件的选择第56-59页
     ·PEG浓度的选择第56-57页
     ·融合时间的选择第57页
     ·融合温度的选择第57-58页
     ·Ca~(2+)浓度的选择第58-59页
   ·米曲霉基因组改组第59-63页
     ·出发菌株的确定第59页
     ·第一轮基因组改组第59-60页
     ·第二轮基因组改组第60页
     ·第三轮基因组改组第60-61页
     ·改组菌F3-542与原始菌株FS-16的性状比较第61-63页
     ·改组菌F3-542的稳定性实验第63页
 3 讨论与小结第63-66页
第四章 米曲霉F3-542产α-淀粉酶发酵优化第66-76页
 1 材料与方法第66-68页
   ·实验材料第66页
     ·菌种第66页
     ·主要药品与仪器第66页
     ·培养基第66页
   ·实验方法第66-68页
     ·培养方法第66-67页
     ·α-淀粉酶活力的测定第67页
     ·单因素实验第67页
     ·均匀设计法优化培养基配方试验第67-68页
 2 结果与分析第68-74页
   ·单因素实验第68-71页
     ·碳源对产酶的影响第68页
     ·氮源对产酶的影响第68-69页
     ·培养基初始pH值对产酶的影响第69-70页
     ·装液量对产酶的影响第70-71页
     ·接种量对产酶的影响第71页
   ·均匀设计法优化培养基配方试验第71-74页
 3 小结第74-76页
第五章 结论与展望第76-78页
 1 研究结论第76-77页
   ·米曲霉传统诱变育种构建正突变库第76页
   ·米曲霉原生质体制备和再生的研究第76页
   ·米曲霉基因组改组育种第76页
   ·突变株F3-542发酵优化第76-77页
   ·米曲霉α-淀粉酶高产菌株总结图第77页
 2 展望第77-78页
参考文献第78-84页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第84-86页
致谢第86-88页
个人简历第88-90页

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