| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 绪论 | 第11-21页 |
| 第一章 在大肠杆菌内引入ADS产紫穗槐-4,11-二烯 | 第21-35页 |
| ·前言 | 第21-22页 |
| ·实验材料与方法 | 第22-29页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·工具酶 | 第22-23页 |
| ·标准品 | 第23页 |
| ·试剂盒 | 第23页 |
| ·化学试剂 | 第23页 |
| ·相关溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·全基因合成ADS | 第25页 |
| ·质粒pET28-ADS的构建 | 第25-28页 |
| ·化学感受态细胞的制备与化学转化 | 第28页 |
| ·目的基因的表达 | 第28页 |
| ·紫穗槐-4,11-二烯生产菌的摇瓶培养 | 第28-29页 |
| ·紫穗槐-4,11-二烯的检测方法 | 第29页 |
| ·实验结果与分析 | 第29-33页 |
| ·质粒pET28-ADS的构建 | 第29-31页 |
| ·质粒pET28-ADS图谱 | 第29-30页 |
| ·转化子pET28-ADS/DH5α的菌落PCR鉴定 | 第30页 |
| ·质粒pET28-ADS的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·质粒pET28-ADS的基因测序鉴定 | 第31页 |
| ·表达ADS产紫穗槐-4,11-二烯 | 第31-33页 |
| ·诱导表达ADS | 第31页 |
| ·菌株pET28-ADS/DHGT7产紫穗槐-4,11-二烯 | 第31-33页 |
| ·本章小结 | 第33-35页 |
| 第二章 引入MVA途径提高紫穗槐-4,11-二烯产量 | 第35-55页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·实验材料与方法 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·E.faecalis基因组的提取 | 第35页 |
| ·目的基因的获得 | 第35-36页 |
| ·质粒pET3-ES的构建 | 第36-37页 |
| ·质粒pET3FL-MD的构建 | 第37-38页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD的构建 | 第38-39页 |
| ·质粒pET28-ispA-ADS的构建 | 第39-40页 |
| ·甲羟戊酸生产菌的摇瓶培养 | 第40页 |
| ·甲羟戊酸的检测方法 | 第40-41页 |
| ·实验结果与分析 | 第41-52页 |
| ·质粒pET3-ES的构建 | 第41-43页 |
| ·质粒pET3-E、pET22-S和pET3-ES图谱 | 第41页 |
| ·转化子的菌落PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·质粒pET3-E和pET22-S的鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒pET3-ES的酶切鉴定 | 第43页 |
| ·表达ES产甲羟戊酸 | 第43-46页 |
| ·诱导表达mvaE和mvaS | 第43页 |
| ·菌株pET3-ES/DHGT7产甲羟戊酸 | 第43-46页 |
| ·质粒pET3FL-MD的构建 | 第46-47页 |
| ·质粒pET3FL和pET3-MD图谱 | 第46-47页 |
| ·质粒pET3L和pET3FL的基因测序鉴定 | 第47页 |
| ·转化子pET3FL-MD/HST04的菌落PCR鉴定 | 第47页 |
| ·质粒pET3FL-MD的酶切鉴定 | 第47页 |
| ·质粒pET3FL-MD的基因测序鉴定 | 第47页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD的构建 | 第47-49页 |
| ·质粒pAOC3ANL、pAOC3-ES和pAOC3-ES-MD图谱 | 第47-48页 |
| ·质粒pAOC3ANL的基因测序鉴定 | 第48页 |
| ·转化子的菌落PCR鉴定 | 第48-49页 |
| ·质粒pAOC3-ES和pAOC3-ES-MD的酶切鉴定 | 第49页 |
| ·质粒pET28-ispA-ADS的构建 | 第49-52页 |
| ·质粒pET28-ispA-ADS等图谱 | 第49-50页 |
| ·质粒pET3AL的基因测序鉴定 | 第50页 |
| ·转化子的菌落PCR鉴定 | 第50-51页 |
| ·质粒pET3AL-ispA的鉴定 | 第51页 |
| ·质粒pET3AL-ispA-ADS和pET28-ispA-ADS的酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·贯通整个异源紫穗槐-4,11-二烯合成途径 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-55页 |
| 第三章 优化异源紫穗槐-4,11-二烯合成途径 | 第55-65页 |
| ·前言 | 第55页 |
| ·实验材料与方法 | 第55-56页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD-ispA-ADS的构建 | 第55-56页 |
| ·质粒pET28-E-ADS的构建 | 第56页 |
| ·质粒pET28-E-MK-ADS的构建 | 第56页 |
| ·实验结果与分析 | 第56-63页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD-ispA-ADS的构建 | 第56-58页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD-ispA-ADS图谱 | 第56-57页 |
| ·转化子pAOC3-ES-MD-ispA-ADS/DHG5α菌落PCR鉴定 | 第57页 |
| ·质粒pAOC3-ES-MD-ispA-ADS的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·质粒pET28-E-ADS的构建 | 第58-59页 |
| ·质粒pET3-E-ADS和pET28-E-ADS图谱 | 第58页 |
| ·转化子的菌落PCR鉴定 | 第58-59页 |
| ·质粒pET3-E-ADS和pET28-E-ADS的酶切鉴定 | 第59页 |
| ·质粒pET28-E-MK-ADS的构建 | 第59-61页 |
| ·质粒pET3FL-MK和pET28-E-MK-ADS图谱 | 第59-60页 |
| ·转化子的菌落PCR鉴定 | 第60-61页 |
| ·质粒pET3FL-MK的鉴定 | 第61页 |
| ·质粒pET28-E-MK-ADS的酶切鉴定 | 第61页 |
| ·优化紫穗槐-4,11-二烯合成途径 | 第61-63页 |
| ·不同宿主产紫穗槐-4,11-二烯 | 第63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 结论 | 第65-67页 |
| 附录1 | 第67-69页 |
| 附录2 | 第69-71页 |
| 附录3 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83-85页 |
