摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略符号说明 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-47页 |
1.1 海洋毒素及其检测技术现状 | 第13-16页 |
1.1.1 海洋毒素概述 | 第13-14页 |
1.1.2 海洋毒素的危害 | 第14页 |
1.1.3 海洋毒素的检测方法 | 第14-16页 |
1.2 适配体 | 第16-24页 |
1.2.1 适配体概述 | 第16页 |
1.2.2 适配体的特点 | 第16-18页 |
1.2.3 小分子靶标适配体的筛选技术 | 第18-23页 |
1.2.4 适配体的应用 | 第23-24页 |
1.3 光学适配体检测技术 | 第24-31页 |
1.3.1 比色适配体检测技术 | 第25-28页 |
1.3.2 荧光适配体检测技术 | 第28-31页 |
1.4 信号放大技术 | 第31-36页 |
1.4.1 滚环扩增技术 | 第32-33页 |
1.4.2 基于核酸酶的靶标循环利用信号扩增技术 | 第33-36页 |
1.5 立题目的意义和主要研究内容 | 第36-37页 |
1.5.1 立题目的意义 | 第36页 |
1.5.2 本论文的主要研究内容 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-47页 |
第二章 非固定化GO-SELEX法筛选大田软海绵酸适配体的研究 | 第47-61页 |
2.1 前言 | 第47-48页 |
2.2 实验材料与设备 | 第48-49页 |
2.2.1 主要实验材料与试剂 | 第48-49页 |
2.2.2 主要实验仪器和设备 | 第49页 |
2.3 实验方法 | 第49-53页 |
2.3.1 优化GO/ssDNA质量比 | 第49页 |
2.3.2 GO-SELEX筛选大田软海绵酸适配体 | 第49-52页 |
2.3.3 克隆测序和序列分析 | 第52页 |
2.3.4 亲和力试验 | 第52页 |
2.3.5 特异性试验 | 第52页 |
2.3.6 适配体序列的截短和分析 | 第52-53页 |
2.4 结果与讨论 | 第53-57页 |
2.4.1 GO/ssDNA质量比的优化结果 | 第53页 |
2.4.2 大田软海绵酸适配体的体外非固定化筛选 | 第53-54页 |
2.4.3 克隆测序和序列分析结果 | 第54页 |
2.4.4 亲和力试验结果 | 第54-56页 |
2.4.5 特异性试验结果 | 第56页 |
2.4.6 截短适配体序列的分析结果 | 第56-57页 |
2.5 本章小结 | 第57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
第三章 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素适配体的研究 | 第61-83页 |
3.1 前言 | 第61-62页 |
3.2 实验材料与设备 | 第62-63页 |
3.2.1 主要实验材料与试剂 | 第62-63页 |
3.2.2 主要实验仪器和设备 | 第63页 |
3.3 实验方法 | 第63-69页 |
3.3.1 磁性还原氧化石墨烯的制备和表征 | 第63-64页 |
3.3.2 磁性还原氧化石墨烯对ssDNA的吸附能力分析 | 第64页 |
3.3.3 磁性还原氧化石墨烯对海洋毒素的吸附能力分析 | 第64-65页 |
3.3.4 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素的适配体 | 第65-67页 |
3.3.5 克隆测序和序列分析 | 第67-68页 |
3.3.6 亲和力特异性试验 | 第68页 |
3.3.7 荧光适配体分析法检测海洋毒素 | 第68-69页 |
3.4 结果与讨论 | 第69-78页 |
3.4.1 磁性还原氧化石墨烯的表征 | 第69-70页 |
3.4.2 磁性还原氧化石墨烯对ssDNA的吸附能力分析 | 第70页 |
3.4.3 磁性还原氧化石墨烯对三种海洋毒素的吸附能力吸附能力分析 | 第70-71页 |
3.4.4 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素适配体 | 第71-72页 |
3.4.5 克隆测序和序列分析结果 | 第72-74页 |
3.4.6 亲和力特异性试验结果 | 第74-76页 |
3.4.7 多靶标适配体的表征 | 第76-78页 |
3.4.8 荧光适配体分析法检测海洋毒素 | 第78页 |
3.5 本章小结 | 第78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
第四章 基于纳米金显色的竞争型酶联适配体分析法检测大田软海绵酸 | 第83-96页 |
4.1 前言 | 第83-84页 |
4.2 实验材料与设备 | 第84-85页 |
4.2.1 主要实验材料与试剂 | 第84页 |
4.2.2 主要实验仪器和设备 | 第84-85页 |
4.3 实验方法 | 第85-87页 |
4.3.1 亲和素-过氧化氢酶连接物的制备 | 第85页 |
4.3.2 检测条件的优化 | 第85-86页 |
4.3.3 贝类样品的预处理 | 第86页 |
4.3.4 直接竞争酶联适配体分析法检测大田软海绵酸 | 第86-87页 |
4.4 结果与讨论 | 第87-92页 |
4.4.1 基于纳米金显色的大田软海绵酸ELAA检测实验原理 | 第87-88页 |
4.4.2 亲和素-过氧化氢酶连接物的表征 | 第88页 |
4.4.3 检测条件的优化结果 | 第88-90页 |
4.4.4 直接竞争酶联适配体分析法检测大田软海绵酸的性能分析 | 第90-91页 |
4.4.5 贝类样品中大田软海绵酸的加标回收试验 | 第91-92页 |
4.5 本章小结 | 第92页 |
参考文献 | 第92-96页 |
第五章 基于滚环复制扩增信号的竞争型荧光适配体传感器检测大田软海绵酸 | 第96-113页 |
5.1 前言 | 第96-97页 |
5.2 实验材料与设备 | 第97-98页 |
5.2.1 主要实验材料与试剂 | 第97-98页 |
5.2.2 主要实验仪器和设备 | 第98页 |
5.3 实验方法 | 第98-100页 |
5.3.1 依赖滚环扩增的微孔板组装 | 第98-99页 |
5.3.2 无滚环扩增的微孔板组装 | 第99页 |
5.3.3 贝类样品的预处理 | 第99页 |
5.3.4 竞争型荧光适配体分析法检测大田软海绵酸 | 第99-100页 |
5.4 结果与讨论 | 第100-109页 |
5.4.1 滚环复制扩增信号的荧光适配体分析法的实验原理 | 第100-101页 |
5.4.2 依赖滚环扩增组装微孔板的条件优化 | 第101-104页 |
5.4.3 不依赖滚环扩增组装微孔板的条件优化 | 第104-105页 |
5.4.4 竞争反应时间的优化 | 第105页 |
5.4.5 竞争型荧光适配体分析法的性能分析 | 第105-108页 |
5.4.6 实际样品中大田软海绵酸的加标回收试验 | 第108页 |
5.4.7 竞争型荧光适配体分析法和酶联免疫吸附法的比较分析 | 第108-109页 |
5.5 本章小结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-113页 |
第六章 基于核酸酶扩增信号的荧光共振能量转移适配体传感器检测石房蛤毒素 | 第113-126页 |
6.1 前言 | 第113-114页 |
6.2 实验材料与设备 | 第114-115页 |
6.2.1 主要实验材料与试剂 | 第114-115页 |
6.2.2 主要实验仪器和设备 | 第115页 |
6.3 实验方法 | 第115-116页 |
6.3.1 磁性还原氧化石墨烯的制备 | 第115页 |
6.3.2 石墨烯量子点和适配体的连接 | 第115页 |
6.3.3 荧光共振能量转移适配体分析法检测石房蛤毒素 | 第115-116页 |
6.4 结果与讨论 | 第116-123页 |
6.4.1 石墨烯量子点-适配体连接物的表征 | 第116-117页 |
6.4.2 核酸酶扩增信号的荧光共振能量转移适配体分析法的实验原理及验证 | 第117-118页 |
6.4.3 荧光共振能量转移体系的建立 | 第118-119页 |
6.4.4 检测条件的优化 | 第119-120页 |
6.4.5 荧光共振能量转移适配体分析法的性能分析 | 第120-123页 |
6.5 本章小结 | 第123页 |
参考文献 | 第123-126页 |
主要结论与展望 | 第126-128页 |
主要结论 | 第126-127页 |
展望 | 第127-128页 |
本论文创新点 | 第128-129页 |
致谢 | 第129-131页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第131页 |