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四种海洋生物毒素适配体非固定化筛选方法及生物检测应用研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略符号说明第8-13页
第一章 绪论第13-47页
    1.1 海洋毒素及其检测技术现状第13-16页
        1.1.1 海洋毒素概述第13-14页
        1.1.2 海洋毒素的危害第14页
        1.1.3 海洋毒素的检测方法第14-16页
    1.2 适配体第16-24页
        1.2.1 适配体概述第16页
        1.2.2 适配体的特点第16-18页
        1.2.3 小分子靶标适配体的筛选技术第18-23页
        1.2.4 适配体的应用第23-24页
    1.3 光学适配体检测技术第24-31页
        1.3.1 比色适配体检测技术第25-28页
        1.3.2 荧光适配体检测技术第28-31页
    1.4 信号放大技术第31-36页
        1.4.1 滚环扩增技术第32-33页
        1.4.2 基于核酸酶的靶标循环利用信号扩增技术第33-36页
    1.5 立题目的意义和主要研究内容第36-37页
        1.5.1 立题目的意义第36页
        1.5.2 本论文的主要研究内容第36-37页
    参考文献第37-47页
第二章 非固定化GO-SELEX法筛选大田软海绵酸适配体的研究第47-61页
    2.1 前言第47-48页
    2.2 实验材料与设备第48-49页
        2.2.1 主要实验材料与试剂第48-49页
        2.2.2 主要实验仪器和设备第49页
    2.3 实验方法第49-53页
        2.3.1 优化GO/ssDNA质量比第49页
        2.3.2 GO-SELEX筛选大田软海绵酸适配体第49-52页
        2.3.3 克隆测序和序列分析第52页
        2.3.4 亲和力试验第52页
        2.3.5 特异性试验第52页
        2.3.6 适配体序列的截短和分析第52-53页
    2.4 结果与讨论第53-57页
        2.4.1 GO/ssDNA质量比的优化结果第53页
        2.4.2 大田软海绵酸适配体的体外非固定化筛选第53-54页
        2.4.3 克隆测序和序列分析结果第54页
        2.4.4 亲和力试验结果第54-56页
        2.4.5 特异性试验结果第56页
        2.4.6 截短适配体序列的分析结果第56-57页
    2.5 本章小结第57页
    参考文献第57-61页
第三章 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素适配体的研究第61-83页
    3.1 前言第61-62页
    3.2 实验材料与设备第62-63页
        3.2.1 主要实验材料与试剂第62-63页
        3.2.2 主要实验仪器和设备第63页
    3.3 实验方法第63-69页
        3.3.1 磁性还原氧化石墨烯的制备和表征第63-64页
        3.3.2 磁性还原氧化石墨烯对ssDNA的吸附能力分析第64页
        3.3.3 磁性还原氧化石墨烯对海洋毒素的吸附能力分析第64-65页
        3.3.4 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素的适配体第65-67页
        3.3.5 克隆测序和序列分析第67-68页
        3.3.6 亲和力特异性试验第68页
        3.3.7 荧光适配体分析法检测海洋毒素第68-69页
    3.4 结果与讨论第69-78页
        3.4.1 磁性还原氧化石墨烯的表征第69-70页
        3.4.2 磁性还原氧化石墨烯对ssDNA的吸附能力分析第70页
        3.4.3 磁性还原氧化石墨烯对三种海洋毒素的吸附能力吸附能力分析第70-71页
        3.4.4 多重MRGO-SELEX筛选三种海洋毒素适配体第71-72页
        3.4.5 克隆测序和序列分析结果第72-74页
        3.4.6 亲和力特异性试验结果第74-76页
        3.4.7 多靶标适配体的表征第76-78页
        3.4.8 荧光适配体分析法检测海洋毒素第78页
    3.5 本章小结第78页
    参考文献第78-83页
第四章 基于纳米金显色的竞争型酶联适配体分析法检测大田软海绵酸第83-96页
    4.1 前言第83-84页
    4.2 实验材料与设备第84-85页
        4.2.1 主要实验材料与试剂第84页
        4.2.2 主要实验仪器和设备第84-85页
    4.3 实验方法第85-87页
        4.3.1 亲和素-过氧化氢酶连接物的制备第85页
        4.3.2 检测条件的优化第85-86页
        4.3.3 贝类样品的预处理第86页
        4.3.4 直接竞争酶联适配体分析法检测大田软海绵酸第86-87页
    4.4 结果与讨论第87-92页
        4.4.1 基于纳米金显色的大田软海绵酸ELAA检测实验原理第87-88页
        4.4.2 亲和素-过氧化氢酶连接物的表征第88页
        4.4.3 检测条件的优化结果第88-90页
        4.4.4 直接竞争酶联适配体分析法检测大田软海绵酸的性能分析第90-91页
        4.4.5 贝类样品中大田软海绵酸的加标回收试验第91-92页
    4.5 本章小结第92页
    参考文献第92-96页
第五章 基于滚环复制扩增信号的竞争型荧光适配体传感器检测大田软海绵酸第96-113页
    5.1 前言第96-97页
    5.2 实验材料与设备第97-98页
        5.2.1 主要实验材料与试剂第97-98页
        5.2.2 主要实验仪器和设备第98页
    5.3 实验方法第98-100页
        5.3.1 依赖滚环扩增的微孔板组装第98-99页
        5.3.2 无滚环扩增的微孔板组装第99页
        5.3.3 贝类样品的预处理第99页
        5.3.4 竞争型荧光适配体分析法检测大田软海绵酸第99-100页
    5.4 结果与讨论第100-109页
        5.4.1 滚环复制扩增信号的荧光适配体分析法的实验原理第100-101页
        5.4.2 依赖滚环扩增组装微孔板的条件优化第101-104页
        5.4.3 不依赖滚环扩增组装微孔板的条件优化第104-105页
        5.4.4 竞争反应时间的优化第105页
        5.4.5 竞争型荧光适配体分析法的性能分析第105-108页
        5.4.6 实际样品中大田软海绵酸的加标回收试验第108页
        5.4.7 竞争型荧光适配体分析法和酶联免疫吸附法的比较分析第108-109页
    5.5 本章小结第109-110页
    参考文献第110-113页
第六章 基于核酸酶扩增信号的荧光共振能量转移适配体传感器检测石房蛤毒素第113-126页
    6.1 前言第113-114页
    6.2 实验材料与设备第114-115页
        6.2.1 主要实验材料与试剂第114-115页
        6.2.2 主要实验仪器和设备第115页
    6.3 实验方法第115-116页
        6.3.1 磁性还原氧化石墨烯的制备第115页
        6.3.2 石墨烯量子点和适配体的连接第115页
        6.3.3 荧光共振能量转移适配体分析法检测石房蛤毒素第115-116页
    6.4 结果与讨论第116-123页
        6.4.1 石墨烯量子点-适配体连接物的表征第116-117页
        6.4.2 核酸酶扩增信号的荧光共振能量转移适配体分析法的实验原理及验证第117-118页
        6.4.3 荧光共振能量转移体系的建立第118-119页
        6.4.4 检测条件的优化第119-120页
        6.4.5 荧光共振能量转移适配体分析法的性能分析第120-123页
    6.5 本章小结第123页
    参考文献第123-126页
主要结论与展望第126-128页
    主要结论第126-127页
    展望第127-128页
本论文创新点第128-129页
致谢第129-131页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第131页

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