| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略语 | 第6-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 ZEN及其研究进展 | 第9-16页 |
| 1.1.1 ZEN的结构及性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 ZEN的污染及分布 | 第10页 |
| 1.1.3 ZEN的毒性作用及限量标准 | 第10-13页 |
| 1.1.4 ZEN的分析方法 | 第13-16页 |
| 1.2 纳米抗体及其研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 纳米抗体的结构 | 第17页 |
| 1.2.2 纳米抗体的性质 | 第17-18页 |
| 1.2.3 纳米抗体的应用 | 第18-20页 |
| 1.3 主要研究内容和意义 | 第20-21页 |
| 1.3.1 主要研究内容 | 第20页 |
| 1.3.2 本研究的意义 | 第20-21页 |
| 第2章 ZEN抗独特型纳米抗体的淘选及鉴定 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 溶液的配制 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第23-27页 |
| 2.2.1 ZEN抗抗独特型抗体的淘选 | 第23-26页 |
| 2.2.2 ZEN 抗独特型纳米抗体的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-32页 |
| 2.3.1 ZEN抗独特型纳米抗体的亲和淘选 | 第27-28页 |
| 2.3.2 ZEN抗独特型纳米抗体的鉴定 | 第28页 |
| 2.3.3 ZEN抗独特型纳米抗体的序列分析 | 第28-31页 |
| 2.3.4 ZEN抗独特型纳米抗体标准曲线的建立 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.5 小结 | 第33-34页 |
| 第3章 基于ZEN抗独特纳米抗体的荧光定量PCR方法的建立 | 第34-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.3 溶液的配制 | 第35页 |
| 3.2 基于 ZEN 抗独特型纳米抗体的荧光定量 PCR 检测方法的建立 | 第35-40页 |
| 3.2.1 特异性引物的设计 | 第35页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第35-37页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR单因素条件优化 | 第37-38页 |
| 3.2.4 谷物样品ZEN加标回收率测定 | 第38-39页 |
| 3.2.5 实际样品中 ZEN 荧光定量 PCR 检测方法与 LC-MS/MS 比较研究 | 第39页 |
| 3.2.6 交叉反应率的测定 | 第39-40页 |
| 3.3 结果 | 第40-57页 |
| 3.3.1 荧光定量PCR引物设计 | 第40-41页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR熔解曲线 | 第41-42页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR扩增曲线 | 第42-43页 |
| 3.3.4 荧光定量PCR标准曲线 | 第43-44页 |
| 3.3.5 甲醇浓度的优化 | 第44-45页 |
| 3.3.6 谷物样品的基质干扰评估 | 第45-47页 |
| 3.3.7 交叉反应率的测试 | 第47-48页 |
| 3.3.8 方法的准确性验证 | 第48-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57页 |
| 3.5 小结 | 第57-58页 |
| 第4章 ZEN抗独特型纳米抗体的可溶性表达及其免疫学检测的应用 | 第58-71页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第58页 |
| 4.1.2 试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.3 溶液的配制 | 第59页 |
| 4.2 可溶性纳米抗体表达载体的构建 | 第59-63页 |
| 4.2.1 pHEN质粒的提取 | 第59页 |
| 4.2.2 pHEN质粒的双酶切 | 第59-60页 |
| 4.2.3 载体与目的片段的连接及转化 | 第60页 |
| 4.2.4 阳性克隆子的筛选 | 第60页 |
| 4.2.5 可溶性纳米抗体的原核表达 | 第60-61页 |
| 4.2.6 可溶性纳米抗体的纯化 | 第61页 |
| 4.2.7 可溶性纳米抗体的鉴定 | 第61-63页 |
| 4.3 结果 | 第63-69页 |
| 4.3.1 质粒的提取 | 第63页 |
| 4.3.2 VHH片段的扩增 | 第63-65页 |
| 4.3.3 扩增片段VHH序列双酶切 | 第65-66页 |
| 4.3.4 pET25b（+）表达载体与目的片段的连接 | 第66-67页 |
| 4.3.5 ZEN 抗独特型可溶性纳米抗体的表达 | 第67页 |
| 4.3.6 棋盘滴定确定ZEN抗独特型可溶性纳米抗体最佳包被浓度 | 第67-69页 |
| 4.3.7 基于ZEN抗独特型可溶性纳米抗体的ELISA标准曲线 | 第69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 4.5 小结 | 第70-71页 |
| 第5章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 个人简历及攻读硕士学位期间的研究成果 | 第80页 |
