| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第13-18页 |
| 1.1 γ-PGA的结构与性质 | 第13-14页 |
| 1.2 γ-PGA的合成方法 | 第14-15页 |
| 1.2.1 化学合成法 | 第14页 |
| 1.2.2 提取法 | 第14页 |
| 1.2.3 酶转化法 | 第14页 |
| 1.2.4 微生物发酵法 | 第14-15页 |
| 1.3 微生物产γ-PGA的基因与合成酶 | 第15页 |
| 1.4 γ-PGA的应用 | 第15-16页 |
| 1.4.1 γ-PGA在食品中的应用 | 第15页 |
| 1.4.2 γ-聚谷氨酸在医药方面的应用 | 第15-16页 |
| 1.4.3 γ-聚谷氨酸在农业方面的应用 | 第16页 |
| 1.4.4 γ-PGA在环保方面的应用 | 第16页 |
| 1.4.5 γ-PGA在化妆品方面的应用 | 第16页 |
| 1.5 国内外研究现状 | 第16-17页 |
| 1.5.1 国际研究概况 | 第16页 |
| 1.5.2 国内研究概况 | 第16-17页 |
| 1.6 本课题来源及研究内容 | 第17-18页 |
| 1.6.1 课题来源 | 第17页 |
| 1.6.2 本课题的目的和意义 | 第17页 |
| 1.6.3 课题研究内容 | 第17-18页 |
| 2 γ-PGA关键合成酶基因pgsB的克隆及生物信息学分析 | 第18-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 培养基 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第18页 |
| 2.1.3 材料与试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 Bacillus subtilis HCUL-B-115基因组DNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 γ-PGA合成酶基因pgsB的PCR扩增 | 第19页 |
| 2.2.3 克隆载体pET22b的线性化 | 第19页 |
| 2.2.4 γ-PGA关键合成酶基因重组质粒pET22b-pgsB的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.5 大肠杆菌转化及菌落PCR鉴定 | 第20页 |
| 2.2.6 PgsB蛋白的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第20-26页 |
| 2.3.1 γ-PGA合成酶基因pgsB的PCR扩增及其鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.2 重组质粒pET-22b-pgsB的筛选与鉴定 | 第21页 |
| 2.3.3 目的片断的测序及分析 | 第21-23页 |
| 2.3.4 PgsB蛋白的基本理化性质分析 | 第23页 |
| 2.3.5 PgsB蛋白信号肽的预测与分析 | 第23-24页 |
| 2.3.6 PgsB蛋白跨膜结构的预测与分析 | 第24-25页 |
| 2.3.7 PgsB蛋白N-糖基化分析 | 第25-26页 |
| 2.3.8 PgsB蛋白保守区分析 | 第26页 |
| 2.3.9 PgsB蛋白二级结构预测 | 第26页 |
| 2.3.10 PgsB蛋白三级结构预测 | 第26页 |
| 2.4 本章小结 | 第26-28页 |
| 3 产γ-PGA摇瓶发酵培养基成分的优化 | 第28-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验菌种 | 第28页 |
| 3.1.2 培养基和培养条件 | 第28页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 3.1.4 实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29页 |
| 3.2.1 玉米糖化液的制备 | 第29页 |
| 3.2.2 γ-PGA含量的测定 | 第29页 |
| 3.2.3 谷氨酸钠及葡萄糖的测定 | 第29页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第29-41页 |
| 3.3.1 碳源种类及其浓度对γ-PGA产量的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.2 氮源种类及其浓度对γ-PGA产量的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.3 谷氨酸钠浓度对γ-PGA产量的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.4 磷酸二氢钾浓度对γ-PGA产量的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.5 氯化钠浓度对γ-PGA产量的影响 | 第33页 |
| 3.3.6 氯化钙浓度对γ-PGA产量的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.7 硫酸镁浓度对γ-PGA产量的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.8 硫酸锰浓度对γ-PGA产量的影响 | 第35页 |
| 3.3.9 Plackett-Burman设计筛选对γ-PGA产量影响显著的因素 | 第35-37页 |
| 3.3.10 Central Composite优化显著因素的最优水平 | 第37-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 4 高分子聚合物γ-PGA对长双歧杆菌的冻干保护作用 | 第42-50页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第42页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 活菌粉的制备工艺 | 第42-43页 |
| 4.2.2 菌体的培养、收集以及细胞悬浮液的制备 | 第43页 |
| 4.2.3 冷冻干燥 | 第43页 |
| 4.2.4 存活率的计算 | 第43页 |
| 4.2.5 电镜样品的制备 | 第43页 |
| 4.2.6 酸度滴定 | 第43页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第43-49页 |
| 4.3.1 不同类型保护剂对长双歧杆菌的冻干保护 | 第43-44页 |
| 4.3.2 不同浓度γ-PGA对长双歧杆菌的冻干保护 | 第44-45页 |
| 4.3.3 γ-PGA与脱脂乳粉复配对长双歧杆菌的冻干保护 | 第45页 |
| 4.3.4 添加保护剂冻干菌体微观形态的电镜观察 | 第45-46页 |
| 4.3.5 反复冻融后的菌体形态 | 第46-47页 |
| 4.3.6 菌体的产酸能力 | 第47-48页 |
| 4.3.7 冻干菌粉的贮存实验 | 第48-49页 |
| 4.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 5 γ-PGA对饺子抗冻性的研究 | 第50-60页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第50-51页 |
| 5.1.1 γ-PGA | 第50页 |
| 5.1.2 主要材料与试剂 | 第50页 |
| 5.1.3 主要仪器与设备 | 第50-51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 5.2.1 面粉水分含量及各成分的测定 | 第51页 |
| 5.2.2 γ-PGA的热稳定性研究 | 第51页 |
| 5.2.3 饺子的制做 | 第51页 |
| 5.2.4 面团糊化性质的测定 | 第51页 |
| 5.2.5 饺子质构的测定 | 第51页 |
| 5.2.6 饺子冻裂率的计算 | 第51-52页 |
| 5.2.7 饺子破损率的计算 | 第52页 |
| 5.2.8 饺子的感官评价 | 第52页 |
| 5.2.9 扫描电镜观察面团的微观结构 | 第52页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第52-59页 |
| 5.3.1 面粉的主要成分 | 第52页 |
| 5.3.2 冷冻过程对γ-PGA分子量的影响 | 第52-53页 |
| 5.3.3 γ-PGA的热稳定性分析 | 第53-54页 |
| 5.3.4 抗冻剂对面粉糊化特性的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.5 抗冻剂对饺子皮物性的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.6 添加不同抗冻剂对速冻水饺冻痕率和破损率的影响 | 第56-57页 |
| 5.3.7 感官评价 | 第57页 |
| 5.3.8 扫描电镜观察面团的微观结构 | 第57-59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
