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三孢布拉氏霉菌中三孢酸的分离纯化及其作用机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-21页
第一章 绪论第21-36页
   ·β-胡萝卜素概述第21-22页
     ·β-胡萝卜素理化性质第21-22页
     ·β-胡萝卜素功能第22页
   ·三孢酸概述第22-24页
     ·三孢酸的物理性质第22页
     ·三孢酸的来源和功能第22-24页
   ·三孢酸的生物合成第24-26页
   ·三孢酸的生产方法第26-27页
   ·三孢酸的分离方法第27-29页
     ·溶剂萃取法第27页
     ·葡聚糖凝胶色谱法第27-28页
     ·薄层色谱法第28-29页
   ·三孢酸的分析检测方法第29-31页
     ·薄层色谱法第29-30页
     ·紫外分光光度法第30页
     ·高效液相色谱法第30-31页
   ·本文采用的分离纯化三孢酸方法第31-33页
     ·大孔吸附树脂法第31-32页
     ·制备型高效液相色谱法第32-33页
   ·荧光定量PCR法第33-34页
     ·荧光定量PCR的原理第33页
     ·荧光定量PCR的方法特点第33页
     ·荧光定量PCR的用途第33-34页
   ·本实验研究的目的、内容和意义第34-36页
     ·目的和意义第34页
     ·研究内容第34-36页
第二章 三孢酸的发酵工艺以及含量测定第36-46页
   ·实验材料与仪器第36页
     ·实验材料第36页
     ·实验仪器第36页
   ·实验方法第36-38页
     ·三孢酸的发酵工艺第36-37页
       ·菌株第36页
       ·培养基第36-37页
       ·培养方法第37页
       ·发酵液后处理第37页
     ·三孢酸样品的制备第37页
     ·对照品溶液的配制第37-38页
     ·三孢酸色谱条件第38页
   ·三孢酸的分析方法的确立第38-44页
     ·流动相的选择第38-40页
     ·检测波长的选择第40-41页
     ·梯度模式的选择第41-44页
     ·标准曲线及线形范围第44页
     ·精密度试验第44页
   ·本章小结第44-46页
第三章 三孢酸的传统分离纯化工艺研究第46-56页
   ·实验材料和仪器第46页
     ·实验材料第46页
     ·实验仪器第46页
   ·实验方法第46-49页
     ·三孢酸含量的测定第46页
     ·萃取法第46-47页
     ·凝胶色谱法纯化三孢酸第47-48页
       ·凝胶的预处理第47页
       ·装柱第47-48页
       ·加样及洗脱第48页
       ·凝胶柱的后处理第48页
     ·硅胶色谱法制备三孢酸第48-49页
       ·薄层层析色谱第49页
       ·硅胶柱层析第49页
   ·三孢酸分离纯化工艺结果与讨论第49-55页
     ·萃取次数对三孢酸纯度的影响第49-51页
     ·葡聚糖凝胶色谱Sephadex LH-20纯化三孢酸结果与讨论第51-53页
       ·洗脱剂的选择第51-52页
       ·不同流速对三孢酸纯度的影响第52-53页
     ·硅胶柱色谱分离纯化三孢酸结果与讨论第53-55页
       ·洗脱剂的选择第53-55页
       ·上样量对三孢酸纯度的影响第55页
   ·本章小结第55-56页
第四章 大孔吸附树脂和制备型高效液相色谱法分离纯化三孢酸第56-77页
   ·实验材料和仪器第57页
     ·实验材料第57页
     ·实验仪器第57页
   ·实验方法第57-60页
     ·样品溶液的制备第57页
     ·HPLC分析三孢酸含量第57页
     ·大孔吸附树脂的预处理第57-58页
     ·静态吸附和解析实验第58页
     ·动态吸附和解析实验第58-59页
     ·吸附能力、吸附率、解析率的计算方法第59-60页
     ·制备型高效液相色谱第60页
     ·MS和H1NMR第60页
   ·实验结果与讨论第60-75页
     ·大孔吸附树脂的选择第60-61页
     ·静态吸附和解析实验第61-62页
     ·样品溶液pH的影响第62-63页
     ·吸附等温曲线第63-66页
     ·动态吸附实验第66-67页
     ·SP850树脂的动态解析实验第67-68页
     ·洗脱方式的考察第68-69页
     ·制备型高效液相色谱分离条件的摸索第69-71页
     ·流动相的选择第71页
     ·流速的选择第71-72页
     ·上样量的选择第72-74页
     ·MS和H1NMR第74-75页
   ·本章小结第75-77页
第五章 三孢酸对Blakeslea trispora关键基因转录水平的影响第77-93页
   ·实验材料与仪器第77-78页
     ·菌种第77页
     ·培养基第77-78页
     ·主要试剂第78页
     ·主要仪器第78页
   ·实验方法第78-84页
     ·菌种培养条件第78-79页
     ·β-胡萝卜素的提取方法第79页
     ·β-胡萝卜素的检测方法第79-80页
     ·总RNA的所需的材料和方法第80页
     ·总RNA的提取和检测第80-81页
     ·总RNA的反转录第81-82页
     ·荧光定量PCR引物设计第82-83页
     ·荧光定量PCR第83-84页
   ·实验结果与讨论第84-91页
     ·三孢酸的添加浓度对β-胡萝卜素产量的影响第84-85页
     ·β-紫罗酮的添加浓度对对β-胡萝卜素产量的影响第85-86页
     ·脱落酸的添加浓度对对β-胡萝卜素产量的影响第86-87页
     ·总RNA提取与反转录第87-88页
     ·三孢酸及其类似物对carRA和carB基因转录水平的影响第88-91页
   ·本章小结第91-93页
第六章 结论与展望第93-95页
参考文献第95-99页
附录第99-101页
致谢第101-102页
研究成果及发表的论文第102-103页
作者和导师简介第103-104页
硕士研究生学位论文答辩委员会决议书第104-105页

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