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阿特拉津对斑马鱼内分泌干扰及氧化应激的机理研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 引言第12-25页
    1.1 阿特拉津简介第12-14页
        1.1.1 ATZ 的物理性质第12页
        1.1.2 ATZ 对植物的毒害作用第12-13页
        1.1.3 ATZ 对动物的毒害作用第13页
        1.1.4 ATZ 的生物浓缩和生物积累第13-14页
    1.2 生物氧化应激的研究第14-16页
        1.2.1 氧化应激对生物体产生的危害第14-15页
        1.2.2 常用于检测机体产生氧化应激的指标第15-16页
    1.3 环境内分泌干扰物的研究第16-21页
        1.3.1 环境中内分泌干扰物的来源第17页
        1.3.2 环境内分泌干扰物的作用机理第17-19页
        1.3.3 内分泌干扰的生物标记物第19-21页
            1.3.3.1 雌性激素生物标志物第19页
            1.3.3.2 雄性激素生物标志物第19-20页
            1.3.3.3 其他生物标志物第20-21页
    1.4 研究氧化应激及内分泌干扰的主要实验方法第21-23页
        1.4.1 斑马鱼作为研究氧化应激及内分泌干扰的主要模式动物第21页
        1.4.2 研究氧化应激及内分泌干扰的主要实验方法第21-23页
            1.4.2.1 酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ,ELISA)第21页
            1.4.2.2 组织切片第21-22页
            1.4.2.3 酶活检测第22页
            1.4.2.4 荧光定量PCR 及基因芯片技术第22-23页
            1.4.2.5 蛋白质组研究第23页
    1.5 研究意义及内容第23-25页
        1.5.1 研究意义第23-24页
        1.5.2 研究内容第24-25页
第二章 ATZ 对斑马鱼氧化应激的影响第25-44页
    2.1 前言第25-26页
    2.2 材料与方法第26-33页
        2.2.1 实验材料第26-28页
            2.2.1.1 实验动物第26页
            2.2.1.2 实验试剂第26-27页
            2.2.1.3 实验仪器第27-28页
            2.2.1.4 暴露和取样第28页
        2.2.2 实验方法第28-33页
            2.2.2.1 组织中RNA 提取第28-29页
            2.2.2.2 RNA 纯度检测第29页
            2.2.2.3 cDNA 合成第29-30页
            2.2.2.4 引物设计第30-33页
    2.3 数据分析第33页
    2.4 结果第33-40页
        2.4.1 ATZ 对雄性斑马鱼氧化应激基因mRNA 表达的影响第33-36页
        2.4.2 ATZ 对雌鱼抗氧化酶活和脂质过氧化的影响第36-37页
        2.4.3 ATZ 对雌性斑马鱼mRNA 表达的影响第37-40页
    2.5 讨论第40-43页
        2.5.1 ATZ 对斑马鱼氧化应激相关酶活及蛋白含量的影响第40-41页
        2.5.2 ATZ 对斑马鱼氧化应激基因表达的影响第41-43页
    2.5 小结第43-44页
第三章 ATZ 对斑马鱼内分泌干扰的研究第44-56页
    3.1 前言第44-45页
    3.2 材料与方法第45-47页
        3.2.1 实验材料第45-46页
            3.2.1.1 实验动物第45页
            3.2.1.2 实验试剂第45页
            3.2.1.3 实验仪器第45-46页
            3.2.1.4 暴露和取样第46页
        3.2.2 实验方法第46-47页
            3.2.2.1 组织中RNA 的提取第46页
            3.2.2.2 cDNA第46页
            3.2.2.3 引物设计第46-47页
            3.2.2.4 实时荧光定量PCR第47页
    3.3 数据分析第47页
    3.4 结果第47-52页
        3.4.1 ATZ 暴露14d 后斑马鱼体重及性腺指数的变化第47-48页
        3.4.2 ATZ 暴露14d 对斑马鱼内分泌相关基因表达的影响第48-52页
            3.4.2.1 ATZ 暴露14d 对雄性斑马鱼肝脏内分泌相关基因表达量的影响第48-49页
            3.4.2.2 ATZ 暴露14d 对雄性斑马鱼脑及精巢内分泌相关基因表达的影响第49-50页
            3.4.2.3 ATZ 暴露14d 对雌性斑马鱼肝脏内分泌基因mRNA 表达的影响第50-51页
            3.4.2.4 ATZ 暴露14d 对雌性斑马鱼脑及卵巢内分泌基因mRNA 表达的影响第51-52页
    3.5 讨论第52-55页
        3.5.1 生物体内雌激素及雄鱼受到外界刺激后体内VTG 产生机理第52-53页
        3.5.2 ATZ 对斑马鱼体重和性腺比的影响第53-54页
        3.5.3 ATZ 对斑马鱼内分泌系统相关基因表达的影响第54-55页
    3.6 小结第55-56页
第四章 ATZ 对斑马鱼肝脏蛋白质表达的影响第56-73页
    4.1 前言第56-57页
    4.2 实验材料与方法第57-63页
        4.2.1 实验材料第57-59页
            4.2.1.1 实验动物第57页
            4.2.1.2 实验所需主要试剂第57-58页
            4.2.1.3 实验所需主要设备第58-59页
        4.2.2 实验方法第59-63页
            4.2.2.1 肝组织切片第59页
            4.2.2.2 肝脏总蛋白的提取第59页
            4.2.2.3 肝脏总蛋白浓度的测定第59-60页
            4.2.2.4 二维凝胶电泳及检测第60-62页
            4.2.2.5 电泳结果的检测——硝酸银染色第62页
            4.2.2.6 质谱分析第62-63页
    4.3 数据分析第63页
    4.4 实验结果第63-69页
        4.4.1 雌鱼肝组织切片第63-65页
        4.4.2 ATZ 对雌性斑马鱼肝组织蛋白质组的影响第65-68页
        4.4.3 差异蛋白的质谱分析结果第68-69页
    4.5 讨论第69-72页
        4.5.1 ATZ 对雌性斑马鱼肝组织学影响第69页
        4.5.2 ATZ 对斑马鱼肝组织蛋白质组的影响第69-70页
        4.5.3 差异蛋白的功能分析第70-72页
    4.6 小结第72-73页
结论与创新点第73-74页
参考文献第74-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表的学术论文第83页

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