摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第12-25页 |
1.1 阿特拉津简介 | 第12-14页 |
1.1.1 ATZ 的物理性质 | 第12页 |
1.1.2 ATZ 对植物的毒害作用 | 第12-13页 |
1.1.3 ATZ 对动物的毒害作用 | 第13页 |
1.1.4 ATZ 的生物浓缩和生物积累 | 第13-14页 |
1.2 生物氧化应激的研究 | 第14-16页 |
1.2.1 氧化应激对生物体产生的危害 | 第14-15页 |
1.2.2 常用于检测机体产生氧化应激的指标 | 第15-16页 |
1.3 环境内分泌干扰物的研究 | 第16-21页 |
1.3.1 环境中内分泌干扰物的来源 | 第17页 |
1.3.2 环境内分泌干扰物的作用机理 | 第17-19页 |
1.3.3 内分泌干扰的生物标记物 | 第19-21页 |
1.3.3.1 雌性激素生物标志物 | 第19页 |
1.3.3.2 雄性激素生物标志物 | 第19-20页 |
1.3.3.3 其他生物标志物 | 第20-21页 |
1.4 研究氧化应激及内分泌干扰的主要实验方法 | 第21-23页 |
1.4.1 斑马鱼作为研究氧化应激及内分泌干扰的主要模式动物 | 第21页 |
1.4.2 研究氧化应激及内分泌干扰的主要实验方法 | 第21-23页 |
1.4.2.1 酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ,ELISA) | 第21页 |
1.4.2.2 组织切片 | 第21-22页 |
1.4.2.3 酶活检测 | 第22页 |
1.4.2.4 荧光定量PCR 及基因芯片技术 | 第22-23页 |
1.4.2.5 蛋白质组研究 | 第23页 |
1.5 研究意义及内容 | 第23-25页 |
1.5.1 研究意义 | 第23-24页 |
1.5.2 研究内容 | 第24-25页 |
第二章 ATZ 对斑马鱼氧化应激的影响 | 第25-44页 |
2.1 前言 | 第25-26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-33页 |
2.2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.2.1.1 实验动物 | 第26页 |
2.2.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.2.1.3 实验仪器 | 第27-28页 |
2.2.1.4 暴露和取样 | 第28页 |
2.2.2 实验方法 | 第28-33页 |
2.2.2.1 组织中RNA 提取 | 第28-29页 |
2.2.2.2 RNA 纯度检测 | 第29页 |
2.2.2.3 cDNA 合成 | 第29-30页 |
2.2.2.4 引物设计 | 第30-33页 |
2.3 数据分析 | 第33页 |
2.4 结果 | 第33-40页 |
2.4.1 ATZ 对雄性斑马鱼氧化应激基因mRNA 表达的影响 | 第33-36页 |
2.4.2 ATZ 对雌鱼抗氧化酶活和脂质过氧化的影响 | 第36-37页 |
2.4.3 ATZ 对雌性斑马鱼mRNA 表达的影响 | 第37-40页 |
2.5 讨论 | 第40-43页 |
2.5.1 ATZ 对斑马鱼氧化应激相关酶活及蛋白含量的影响 | 第40-41页 |
2.5.2 ATZ 对斑马鱼氧化应激基因表达的影响 | 第41-43页 |
2.5 小结 | 第43-44页 |
第三章 ATZ 对斑马鱼内分泌干扰的研究 | 第44-56页 |
3.1 前言 | 第44-45页 |
3.2 材料与方法 | 第45-47页 |
3.2.1 实验材料 | 第45-46页 |
3.2.1.1 实验动物 | 第45页 |
3.2.1.2 实验试剂 | 第45页 |
3.2.1.3 实验仪器 | 第45-46页 |
3.2.1.4 暴露和取样 | 第46页 |
3.2.2 实验方法 | 第46-47页 |
3.2.2.1 组织中RNA 的提取 | 第46页 |
3.2.2.2 cDNA | 第46页 |
3.2.2.3 引物设计 | 第46-47页 |
3.2.2.4 实时荧光定量PCR | 第47页 |
3.3 数据分析 | 第47页 |
3.4 结果 | 第47-52页 |
3.4.1 ATZ 暴露14d 后斑马鱼体重及性腺指数的变化 | 第47-48页 |
3.4.2 ATZ 暴露14d 对斑马鱼内分泌相关基因表达的影响 | 第48-52页 |
3.4.2.1 ATZ 暴露14d 对雄性斑马鱼肝脏内分泌相关基因表达量的影响 | 第48-49页 |
3.4.2.2 ATZ 暴露14d 对雄性斑马鱼脑及精巢内分泌相关基因表达的影响 | 第49-50页 |
3.4.2.3 ATZ 暴露14d 对雌性斑马鱼肝脏内分泌基因mRNA 表达的影响 | 第50-51页 |
3.4.2.4 ATZ 暴露14d 对雌性斑马鱼脑及卵巢内分泌基因mRNA 表达的影响 | 第51-52页 |
3.5 讨论 | 第52-55页 |
3.5.1 生物体内雌激素及雄鱼受到外界刺激后体内VTG 产生机理 | 第52-53页 |
3.5.2 ATZ 对斑马鱼体重和性腺比的影响 | 第53-54页 |
3.5.3 ATZ 对斑马鱼内分泌系统相关基因表达的影响 | 第54-55页 |
3.6 小结 | 第55-56页 |
第四章 ATZ 对斑马鱼肝脏蛋白质表达的影响 | 第56-73页 |
4.1 前言 | 第56-57页 |
4.2 实验材料与方法 | 第57-63页 |
4.2.1 实验材料 | 第57-59页 |
4.2.1.1 实验动物 | 第57页 |
4.2.1.2 实验所需主要试剂 | 第57-58页 |
4.2.1.3 实验所需主要设备 | 第58-59页 |
4.2.2 实验方法 | 第59-63页 |
4.2.2.1 肝组织切片 | 第59页 |
4.2.2.2 肝脏总蛋白的提取 | 第59页 |
4.2.2.3 肝脏总蛋白浓度的测定 | 第59-60页 |
4.2.2.4 二维凝胶电泳及检测 | 第60-62页 |
4.2.2.5 电泳结果的检测——硝酸银染色 | 第62页 |
4.2.2.6 质谱分析 | 第62-63页 |
4.3 数据分析 | 第63页 |
4.4 实验结果 | 第63-69页 |
4.4.1 雌鱼肝组织切片 | 第63-65页 |
4.4.2 ATZ 对雌性斑马鱼肝组织蛋白质组的影响 | 第65-68页 |
4.4.3 差异蛋白的质谱分析结果 | 第68-69页 |
4.5 讨论 | 第69-72页 |
4.5.1 ATZ 对雌性斑马鱼肝组织学影响 | 第69页 |
4.5.2 ATZ 对斑马鱼肝组织蛋白质组的影响 | 第69-70页 |
4.5.3 差异蛋白的功能分析 | 第70-72页 |
4.6 小结 | 第72-73页 |
结论与创新点 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第83页 |