| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 骨骼肌卫星细胞的介绍 | 第12页 |
| 1.2 骨骼肌卫星细胞的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 骨骼肌卫星细胞的来源 | 第12-13页 |
| 1.2.2 细胞形态上的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 骨骼肌卫星细胞的识别及分子标记 | 第14-15页 |
| 1.2.4 卫星细胞的不同改变方向 | 第15页 |
| 1.3 骨骼肌卫星细胞的提取分离及鉴定 | 第15-17页 |
| 1.3.1 骨骼肌卫星细胞的培养 | 第15-16页 |
| 1.3.2 骨骼肌卫星细胞的分离纯化 | 第16-17页 |
| 1.4 MRFs基因家族 | 第17-18页 |
| 1.4.1 MRFs基因家族简介 | 第17页 |
| 1.4.2 MRFs的功能简介 | 第17-18页 |
| 1.5 乌珠穆沁羊的概述 | 第18页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 骨骼肌卫星细胞的培养 | 第20-22页 |
| 2.1.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 溶液的配置 | 第20-21页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第21页 |
| 2.1.5 实验前的准备 | 第21页 |
| 2.1.6 两步酶消化法培养细胞 | 第21-22页 |
| 2.1.7 组织块法培养细胞 | 第22页 |
| 2.2 骨骼肌卫星细胞的提纯 | 第22-24页 |
| 2.2.1 差速贴壁法 | 第22-23页 |
| 2.2.2 Percoll密度梯度离心法 | 第23-24页 |
| 2.2.3 改良后的纯化方法 | 第24页 |
| 2.3 骨骼肌卫星细胞的传代 | 第24页 |
| 2.4 骨骼肌卫星细胞生长曲线的绘制 | 第24页 |
| 2.5 细胞的冻存与复苏 | 第24-25页 |
| 2.5.1 细胞的冻存 | 第24-25页 |
| 2.5.2 细胞的复苏 | 第25页 |
| 2.6 细胞活率的测定及细胞计数 | 第25页 |
| 2.7 骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第25-33页 |
| 2.7.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.7.2 主要试剂 | 第26页 |
| 2.7.3 溶液的配置 | 第26页 |
| 2.7.4 仪器与设备 | 第26页 |
| 2.7.5 细胞中RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.7.6 RNA浓度和纯度的检测 | 第27页 |
| 2.7.7 反转录 | 第27-28页 |
| 2.7.8 RT-PCR鉴定 | 第28-30页 |
| 2.7.9 免疫组化鉴定 | 第30-31页 |
| 2.7.10 实时荧光定量PCR | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-52页 |
| 3.1 骨骼肌卫星细胞的形态观察 | 第33-35页 |
| 3.2 传代细胞的形态变化 | 第35-36页 |
| 3.3 不同方法分离出的骨骼肌卫星细胞 | 第36-38页 |
| 3.4 不同纯化方法得到的细胞数 | 第38-40页 |
| 3.5 不同助贴壁剂对细胞贴壁时间的影响 | 第40页 |
| 3.6 骨骼肌卫星细胞的生长曲线 | 第40-41页 |
| 3.7 细胞活率的测定 | 第41-42页 |
| 3.8 卫星细胞的鉴定 | 第42-52页 |
| 3.8.1总RNA的浓度和纯度以及质量检测 | 第42-43页 |
| 3.8.2 RNA的质量评定 | 第43页 |
| 3.8.3 PCR产物扩增结果 | 第43-44页 |
| 3.8.4 细胞不同时期实时荧光定量PCR | 第44-46页 |
| 3.8.5 MRFs基因在细胞不同时期的相对表达量 | 第46-47页 |
| 3.8.6 细胞不同月龄实时荧光定量PCR | 第47-49页 |
| 3.8.7 MRFs基因在细胞不同月龄之间的相对表达量 | 第49-50页 |
| 3.8.8 免疫组化鉴定 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 骨骼肌卫星细胞的培养 | 第52-54页 |
| 4.1.1 两种培养方法的特点及影响 | 第52页 |
| 4.1.2 两种纯化方法的特点及改良后的优点 | 第52-53页 |
| 4.1.3 血清对细胞的影响 | 第53页 |
| 4.1.4 骨骼肌卫星细胞的传代 | 第53-54页 |
| 4.2 骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第54页 |
| 4.2.1 形态学方面的鉴定 | 第54页 |
| 4.2.2 免疫细胞学鉴定 | 第54页 |
| 4.3 MRFs在骨骼肌卫星细胞不同生长时期的表达规律 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
