| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·植酸酶的种类和来源 | 第10-11页 |
| ·植酸酶的分类 | 第10-11页 |
| ·植酸酶的来源 | 第11页 |
| ·国内外植酸酶基因工程研究进展 | 第11-13页 |
| ·植酸酶基因在原核微生物中的表达 | 第12页 |
| ·植酸酶基因在真核微生物中的表达 | 第12-13页 |
| ·植酸酶基因在植物中的表达 | 第13页 |
| ·植酸酶基因在动物中的表达 | 第13页 |
| ·木霉菌简介 | 第13-14页 |
| ·木霉植酸酶研究进展 | 第14页 |
| ·课题的研究目的和意义 | 第14-17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 木霉植酸酶编码基因作为系统发育标记潜力研究 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·实验菌株 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·培养基配方 | 第19-20页 |
| ·试剂配方 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·木霉产植酸酶能力测定 | 第20页 |
| ·菌种保藏 | 第20页 |
| ·木霉总DNA提取 | 第20-21页 |
| ·木霉植酸酶基因序列的扩增 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·木霉ITS序列的扩增 | 第22页 |
| ·PCR样品的纯化(DNA琼脂糖凝胶回收) | 第22-23页 |
| ·测序 | 第23-24页 |
| ·木霉植酸酶基因系统发育标记分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-29页 |
| ·木霉产植酸酶的能力 | 第24页 |
| ·木霉菌植酸酶基因扩增结果 | 第24-25页 |
| ·基于ITS序列的木霉鉴定结果 | 第25-26页 |
| ·木霉ITS变异区与植酸酶基因序列分析及系统发育树构建 | 第26-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 侧耳木霉T2-1植酸酶编码基因的克隆及原核表达 | 第31-48页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·培养基及试剂配方 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·侧耳木霉T2-1植酸酶(phyAT2-1)基因克隆 | 第32-37页 |
| ·重组原核表达载体的构建转化及鉴定 | 第37-41页 |
| ·目的蛋白的原核表达 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-46页 |
| ·侧耳木霉T2-1植酸酶(phyAT2-1)基因克隆 | 第42-43页 |
| ·重组原核表达载体的构建转化及鉴定 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 phyAT_(2-1)重组蛋白复性与活性测定 | 第48-57页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·重组蛋白的分步透析法复性 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的Ni柱亲和层析复性 | 第49页 |
| ·重组蛋白植酸酶活性的测定 | 第49-50页 |
| ·重组植酸酶phyAT2-1的蛋白含量测定 | 第50页 |
| ·重组蛋白最适温度测定 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-55页 |
| ·分步透析法复性重组蛋白 | 第51页 |
| ·柱上复性法复性重组蛋白 | 第51-52页 |
| ·蛋白活性测定 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第63页 |
