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兔源性食品的PCR-mtDNA鉴别

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 动物源性成分检测的研究进展第13-14页
        1.1.1 动物源性食品安全现状及存在的问题第13页
        1.1.2 动物源性成分检测方法研究的现状第13-14页
    1.2 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分的研究进展第14-15页
        1.2.1 应用 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分在国外的研究进展第14页
        1.2.2 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分在国内的研究进展第14-15页
    1.3 动物线粒体研究进展第15-19页
        1.3.1 线粒体 DNA 的结构及特点第15-17页
            1.3.1.1 mtDNA 分子结构相对简单第15-16页
            1.3.1.2 mtDNA 呈母系单性遗传第16-17页
            1.3.1.3 进化速度快第17页
        1.3.2 线粒体 DNA 的密码特性第17页
        1.3.3 兔线粒体的研究进展第17-19页
            1.3.3.1 兔的起源与分类第17-18页
            1.3.3.2 兔线粒体研究现状第18-19页
    1.4 线粒体分子系统学研究概述第19-21页
        1.4.1 分子系统学的概念第19页
        1.4.2 分子系统学的研究方法第19-21页
            1.4.2.1 核酸序列分析第19页
            1.4.2.2 蛋白质电泳第19页
            1.4.2.3 限制性片段长度多态性技术第19-21页
            1.4.2.4 随机扩增多态性 DNA 技术第21页
            1.4.2.5 微卫星技术第21页
    1.5 小结第21-22页
第二章 试验部分第22-41页
    2.1 试验材料第22-24页
        2.1.1 组织样品第22页
        2.1.2 酶与试剂第22页
        2.1.3 试验仪器设备第22-23页
        2.1.4 质粒和菌株第23页
        2.1.5 溶液配制第23-24页
        2.1.6 核酸序列分析软件第24页
    2.2 试验方法第24-33页
        2.2.1 兔细胞色素氧化酶Ⅲ基因克隆第24-32页
            2.2.1.1 样品的制备第24页
            2.2.1.2 引物设计第24页
            2.2.1.3 DNA 的提取及质量鉴定第24-26页
            2.2.1.4 PCR 反应第26-27页
            2.2.1.5 PCR 产物回收第27-28页
            2.2.1.6 感受态的制备第28页
            2.2.1.7 构建克隆载体第28-30页
            2.2.1.8 阳性克隆鉴定第30-32页
            2.2.1.9 核酸序列测定以及序列分析第32页
        2.2.2 利用 PCR-mtDNA 方法检测兔源性成分第32-33页
            2.2.2.1 提取总 DNA第32页
            2.2.2.2 特异性引物的设计第32页
            2.2.2.3 特异性引物 PCR 扩增体系以及反应条件第32-33页
            2.2.2.4 引物特异性检验第33页
            2.2.2.5 对 PCR 产物进行琼脂糖电泳检测第33页
            2.2.2.6 对 PCR 扩增产物进行测序第33页
        2.2.3 对特异性引物进行灵敏度分析第33页
    2.3 试验结果及分析第33-39页
        2.3.1 对兔线粒体 COⅢ基因进行克隆以及序列分析结果第33-36页
            2.3.1.1 提取兔基因组 DNA第33-34页
            2.3.1.2 PCR 扩增以及酶切鉴定第34-35页
            2.3.1.3 DNA 测序以及序列分析第35-36页
        2.3.2 对兔源性成分 PCR-mtDNA 进行检测第36-38页
            2.3.2.1 兔 PCR 扩增反应第36-37页
            2.3.2.2 设计引物的特异性检验第37-38页
            2.3.2.3 兔 PCR 产物的序列测定第38页
        2.3.3 特异性 PCR 的灵敏度检验第38-39页
    2.4 讨论第39-41页
        2.4.1 兔线粒体 DNA COⅢ的基因克隆第39页
        2.4.2 PCR-mtDNA 检测兔源性成分第39-41页
第三部分 结论第41-42页
参考文献第42-45页
致谢第45页

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