摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 动物源性成分检测的研究进展 | 第13-14页 |
1.1.1 动物源性食品安全现状及存在的问题 | 第13页 |
1.1.2 动物源性成分检测方法研究的现状 | 第13-14页 |
1.2 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分的研究进展 | 第14-15页 |
1.2.1 应用 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分在国外的研究进展 | 第14页 |
1.2.2 PCR-mtDNA 技术检测动物源性成分在国内的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 动物线粒体研究进展 | 第15-19页 |
1.3.1 线粒体 DNA 的结构及特点 | 第15-17页 |
1.3.1.1 mtDNA 分子结构相对简单 | 第15-16页 |
1.3.1.2 mtDNA 呈母系单性遗传 | 第16-17页 |
1.3.1.3 进化速度快 | 第17页 |
1.3.2 线粒体 DNA 的密码特性 | 第17页 |
1.3.3 兔线粒体的研究进展 | 第17-19页 |
1.3.3.1 兔的起源与分类 | 第17-18页 |
1.3.3.2 兔线粒体研究现状 | 第18-19页 |
1.4 线粒体分子系统学研究概述 | 第19-21页 |
1.4.1 分子系统学的概念 | 第19页 |
1.4.2 分子系统学的研究方法 | 第19-21页 |
1.4.2.1 核酸序列分析 | 第19页 |
1.4.2.2 蛋白质电泳 | 第19页 |
1.4.2.3 限制性片段长度多态性技术 | 第19-21页 |
1.4.2.4 随机扩增多态性 DNA 技术 | 第21页 |
1.4.2.5 微卫星技术 | 第21页 |
1.5 小结 | 第21-22页 |
第二章 试验部分 | 第22-41页 |
2.1 试验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 组织样品 | 第22页 |
2.1.2 酶与试剂 | 第22页 |
2.1.3 试验仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.4 质粒和菌株 | 第23页 |
2.1.5 溶液配制 | 第23-24页 |
2.1.6 核酸序列分析软件 | 第24页 |
2.2 试验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 兔细胞色素氧化酶Ⅲ基因克隆 | 第24-32页 |
2.2.1.1 样品的制备 | 第24页 |
2.2.1.2 引物设计 | 第24页 |
2.2.1.3 DNA 的提取及质量鉴定 | 第24-26页 |
2.2.1.4 PCR 反应 | 第26-27页 |
2.2.1.5 PCR 产物回收 | 第27-28页 |
2.2.1.6 感受态的制备 | 第28页 |
2.2.1.7 构建克隆载体 | 第28-30页 |
2.2.1.8 阳性克隆鉴定 | 第30-32页 |
2.2.1.9 核酸序列测定以及序列分析 | 第32页 |
2.2.2 利用 PCR-mtDNA 方法检测兔源性成分 | 第32-33页 |
2.2.2.1 提取总 DNA | 第32页 |
2.2.2.2 特异性引物的设计 | 第32页 |
2.2.2.3 特异性引物 PCR 扩增体系以及反应条件 | 第32-33页 |
2.2.2.4 引物特异性检验 | 第33页 |
2.2.2.5 对 PCR 产物进行琼脂糖电泳检测 | 第33页 |
2.2.2.6 对 PCR 扩增产物进行测序 | 第33页 |
2.2.3 对特异性引物进行灵敏度分析 | 第33页 |
2.3 试验结果及分析 | 第33-39页 |
2.3.1 对兔线粒体 COⅢ基因进行克隆以及序列分析结果 | 第33-36页 |
2.3.1.1 提取兔基因组 DNA | 第33-34页 |
2.3.1.2 PCR 扩增以及酶切鉴定 | 第34-35页 |
2.3.1.3 DNA 测序以及序列分析 | 第35-36页 |
2.3.2 对兔源性成分 PCR-mtDNA 进行检测 | 第36-38页 |
2.3.2.1 兔 PCR 扩增反应 | 第36-37页 |
2.3.2.2 设计引物的特异性检验 | 第37-38页 |
2.3.2.3 兔 PCR 产物的序列测定 | 第38页 |
2.3.3 特异性 PCR 的灵敏度检验 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
2.4.1 兔线粒体 DNA COⅢ的基因克隆 | 第39页 |
2.4.2 PCR-mtDNA 检测兔源性成分 | 第39-41页 |
第三部分 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
致谢 | 第45页 |