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牛乳过敏原β-乳球蛋白制备、中试生产设计及其致敏性的细胞学评估

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略语表第7-11页
第1章 引言第11-20页
    1.1 概述第11页
    1.2 牛乳过敏原 β-乳球蛋白的理化性质第11页
    1.3 牛乳过敏原 β-乳球蛋白分离纯化方法第11-13页
        1.3.1 沉淀法第12页
        1.3.2 膜分离第12页
        1.3.3 层析法第12-13页
        1.3.4 高效液相色谱法第13页
    1.4 牛乳过敏反应的效应细胞和活性物质第13-18页
        1.4.1 肥大细胞第13-14页
        1.4.2 IgE/FcεRI介导的肥大细胞脱颗粒活性物质第14-18页
    1.5 立题背景与研究内容第18-20页
        1.5.1 立题背景第18-19页
        1.5.2 研究内容第19-20页
第二章 牛乳 β-乳球蛋白分离纯化小试工艺第20-31页
    2.1 引言第20页
    2.2 实验材料与方法第20-26页
        2.2.1 试剂与材料第20页
        2.2.2 设备第20-21页
        2.2.3 实验方法第21-26页
    2.3 结果分析第26-28页
        2.3.1 制备型反相高效液相分离 β-乳球蛋白的图谱第26-27页
        2.3.2 制备型反相高效液相分离 β-乳球蛋白含量的变化第27-28页
    2.4 讨论第28-30页
        2.4.1 制备型反相高效液相色谱纯化β-乳球蛋白的条件摸索第28-30页
        2.4.2 纯化的β-乳球蛋白后处理第30页
    2.5 小结第30-31页
第三章 辐照协同超声对牛乳 β-乳球蛋白结构及抗原性的变化第31-42页
    3.1 引言第31页
    3.2 实验材料与方法第31-34页
        3.2.1 试剂与材料第31页
        3.2.2 设备第31-32页
        3.2.3 实验方法第32-34页
    3.3 结果分析第34-40页
        3.3.1 辐照协同超声处理后 β-乳球蛋白的电泳图谱第34-35页
        3.3.2 辐照协同超声处理后 β-乳球蛋白的圆二色谱变化第35-36页
        3.3.3 辐照协同超声处理 β-乳球蛋白的内源性荧光光谱变化第36-37页
        3.3.4 辐照协同超声处理 β-乳球蛋白表面疏水性变化第37-38页
        3.3.5 辐照协同超声加工处理 β-乳球蛋白表面巯基含量变化第38-39页
        3.3.6 超声协同辐照加工处理后 β-乳球蛋白IgG结合能力变化第39-40页
    3.4 讨论第40-41页
        3.4.1 辐照协同超声处理对牛乳 β-乳球蛋白构象的影响第40-41页
        3.4.2 辐照协同超声处理后 β-乳球蛋白构象和过敏原性的关系第41页
    3.5 小结第41-42页
第四章 基于人外周血嗜碱性粒细胞KU812活化模型评估牛乳 β-乳球蛋白致敏性的变化第42-57页
    4.1 引言第42页
    4.2 实验材料与方法第42-48页
        4.2.1 试剂与材料第42-43页
        4.2.2 设备第43页
        4.2.3 实验方法第43-48页
    4.3 结果分析第48-54页
        4.3.1 过敏原诱导KU812的 β-HEX含量变化第48-49页
        4.3.2 过敏原诱导的KU812组胺释放第49-50页
        4.3.3 过敏原诱导的KU812细胞TNF-α 释放情况第50-51页
        4.3.4 过敏原诱导的KU812细胞IL-6 释放情况第51-52页
        4.3.5 过敏原诱导KU812胞内钙离子检测第52-53页
        4.3.6 Western Blot法检测抗原诱导KU812细胞活化脱颗粒时P-Lyn、Lyn、P-Syk、Syk蛋白和MAPK家族蛋白的表达情况第53-54页
    4.4 讨论第54-56页
        4.4.1 抗原诱导KU812细胞脱颗粒和前炎症因子的变化第54-55页
        4.4.2 抗原诱导KU812细胞活化脱颗粒胞内钙离子浓度的变化第55页
        4.4.3 抗原诱导KU812活化脱颗粒的信号通路中P-Lyn/Lyn、P-Syk/Syk、MAPK家族蛋白的表达情况第55-56页
    4.5 小结第56-57页
第五章 牛乳 β-乳球蛋白分离纯化中试工艺设计第57-63页
    5.1 引言第57页
    5.2 中试实验设计思路第57-61页
        5.2.1 中试实验色谱柱规格第57-58页
        5.2.2 中试工艺流程图第58-60页
        5.2.3 中试工艺设备选型第60-61页
        5.2.4 中试工艺设备流程图第61页
    5.3 结果与讨论第61页
        5.3.1 色谱柱填料粒径的影响第61页
        5.3.2 色谱柱柱尺寸的影响第61页
        5.3.3 操作方式的影响第61页
    5.4 小结第61-63页
第六章 结论和展望第63-64页
    6.1 结论第63页
    6.2 展望第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-70页
附录A 中试工艺设备流程图第70-71页
攻读学位期间的研究成果第71页

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