| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·Nisin 的研究进展 | 第10-12页 |
| ·Nisin 的理化性质 | 第10页 |
| ·Nisin 的结构和以及遗传研究 | 第10-11页 |
| ·Nisin 生产菌株对 nisin 的耐受性 | 第11-12页 |
| ·Genome shuffling 技术 | 第12-16页 |
| ·Genome shuffling 技术的原理 | 第12-14页 |
| ·Genome shuffling 技术的应用 | 第14-16页 |
| ·实时定量 PCR 技术的研究进展 | 第16-17页 |
| ·实时定量 PCR 技术的产生 | 第16-17页 |
| ·实时定量 PCR 的定量方法 | 第17页 |
| ·本论文的主要内容 | 第17-19页 |
| 第二章 Genome shuffling 亲本菌株库的构建 | 第19-30页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·主要仪器与设备 | 第19-20页 |
| ·实验药品与试剂 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·出发菌株特性研究 | 第21页 |
| ·Nisin 效价检测 | 第21-22页 |
| ·原始菌株 YF11 的化学诱变 | 第22-23页 |
| ·实验室保藏紫外诱变菌种的驯化培养 | 第23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-29页 |
| ·原始菌株发酵过程相关参数的变化 | 第23-24页 |
| ·原始菌株的耐受性研究 | 第24-25页 |
| ·原始菌株的致死曲线的绘制 | 第25-26页 |
| ·化学诱变菌株的筛选 | 第26-28页 |
| ·实验室紫外诱变菌株的驯化培养 | 第28-29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 Genome shuffling 技术的应用 | 第30-40页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30页 |
| ·实验药品与试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·原生质体的制备 | 第31-32页 |
| ·原生质体的再生 | 第32页 |
| ·原生质体的融合 | 第32页 |
| ·融合子的筛选 | 第32-33页 |
| ·原生质体的递归融合 | 第33页 |
| ·摇瓶发酵实验 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-38页 |
| ·原生质体形成条件的探索 | 第33页 |
| ·Genome shuffling 前后菌株菌落形态的变化 | 第33-35页 |
| ·各菌株耐受性的变化 | 第35-36页 |
| ·各菌株 nisin 产量的变化 | 第36-37页 |
| ·高产菌株发酵过程研究 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第四章 响应面法优化发酵过程 | 第40-55页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·菌种 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·实验药品与试剂 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·发酵条件的单因素实验 | 第41-42页 |
| ·PB 实验 | 第42页 |
| ·最速上升实验 | 第42-43页 |
| ·中心组合实验 | 第43页 |
| ·3L 发酵罐补料培养 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-53页 |
| ·发酵条件单因素实验 | 第43-45页 |
| ·PB 实验 | 第45-46页 |
| ·最速上升实验 | 第46-47页 |
| ·中心组合设计 | 第47-51页 |
| ·发酵罐补料发酵实验 | 第51-53页 |
| ·本章小结 | 第53-55页 |
| 第五章 高产菌株 F44 与原始菌株 YF11 之间的比较 | 第55-67页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·主要仪器与设备 | 第56页 |
| ·实验药品与试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·菌株的培养 | 第57页 |
| ·场发射扫描电子显微镜测试菌粉的制备 | 第57页 |
| ·引物的设计与合成 | 第57页 |
| ·相对定量的标准品以及标准曲线的制备 | 第57-58页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第58-59页 |
| ·反转录反应 | 第59页 |
| ·荧光定量 PCR 反应 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-65页 |
| ·原始菌株 YF11 与高产菌株 F44 在电镜下细胞形态分析 | 第60-62页 |
| ·总 RNA 浓度的检测与分析 | 第62页 |
| ·荧光定量 PCR 的引物 | 第62-63页 |
| ·与 nisin 合成相关基因的表达情况 | 第63-65页 |
| ·本章小结 | 第65-67页 |
| 第六章 结论与展望 | 第67-70页 |
| ·结论 | 第67-69页 |
| ·展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
