壳聚糖酶产生菌的发酵条件及酶学特性的研究
| 中文摘要 | 第1页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 前言 | 第6-18页 |
| 材料与方法 | 第18-27页 |
| 1.菌株和材料 | 第18页 |
| 2.培养基 | 第18-19页 |
| 3.试剂 | 第19-20页 |
| 4.仪器设备 | 第20页 |
| 5.壳聚糖酶产生菌K-9的筛选 | 第20-21页 |
| ·富集培养与平板筛选 | 第20页 |
| ·平板第二次筛选 | 第20页 |
| ·摇瓶复筛 | 第20-21页 |
| 6.发酵液壳聚糖酶活力的测定 | 第21-22页 |
| ·氨基葡萄糖标准曲线制作 | 第21页 |
| ·壳聚糖酶活力的测定 | 第21页 |
| ·发酵液中还原糖量的测定 | 第21-22页 |
| 7.K-9菌株的部分16SrDNA序列的测定 | 第22-23页 |
| ·模板DNA的提取 | 第22页 |
| ·引物合成 | 第22-23页 |
| ·16SrDNA PCR扩增反应条件的优化 | 第23页 |
| 8 K-9产壳聚糖酶条件的优化 | 第23-24页 |
| ·不同培养温度对K-9产壳聚糖酶的影响 | 第23页 |
| ·培养基不同初始pH值对K-9产酶的影响 | 第23页 |
| ·K-9产壳聚糖酶的诱导性 | 第23页 |
| ·不同培养基装量对K-9产酶的影响 | 第23-24页 |
| ·不同底物壳聚糖浓度对K-9产酶的影响 | 第24页 |
| ·四因子三水平正交实验 | 第24页 |
| ·最适条件下K-9的发酵产酶情况 | 第24页 |
| 9 K-19壳聚糖酶的提纯与理化性质的初步研究 | 第24-27页 |
| ·壳聚糖酶粗酶液的提取与纯化 | 第24-25页 |
| ·K-9壳聚糖酶理化性质的初步研究 | 第25-27页 |
| 结果 | 第27-38页 |
| 1.壳聚糖酶产生菌的筛选和鉴定 | 第27-28页 |
| ·富集培养和第一次筛选 | 第27页 |
| ·第二次筛选 | 第27页 |
| ·摇瓶复筛 | 第27-28页 |
| 2.发酵液壳聚糖酶活力的测定 | 第28页 |
| ·制定氨基葡萄糖标准曲线 | 第28页 |
| ·壳聚糖酶活力测定 | 第28页 |
| ·K-9壳聚糖酶的诱导性 | 第28页 |
| 3.K-9菌株的部分16SrDNA序列 | 第28-31页 |
| ·K-9菌株DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR反应条件 | 第29页 |
| ·PCR反应体系(50ul) | 第29页 |
| ·PCR扩增产物序列测定及分析 | 第29-31页 |
| 4.K-9产壳聚糖酶条件的优化 | 第31-33页 |
| ·不同培养温度对K-9产壳聚糖酶的影响 | 第31页 |
| ·培养基不同初始pH值对K-9产酶的影响 | 第31页 |
| ·不同培养基装量对K-9产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·不同底物壳聚糖浓度对K-9产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·四因子三水平正交实验 | 第33页 |
| 5.最适条件下K-9的发酵产酶情况 | 第33-34页 |
| 6 壳聚糖酶的提纯与理化性质的初步研究 | 第34-38页 |
| ·酶的提取与分离纯化 | 第34页 |
| ·酶的最适反应温度和酶的热稳定性 | 第34-36页 |
| ·酶的最适反应PH值和酸碱稳定性 | 第36页 |
| ·金属离子对酶促反应的影响 | 第36页 |
| ·酶分子量的确定 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 1.壳聚糖酶产生菌的筛选 | 第38页 |
| 2.酶活力的测定 | 第38-39页 |
| 3.K—9产壳聚糖酶发酵条件的研究 | 第39-40页 |
| 4.壳聚糖酶的分离纯化 | 第40页 |
| 5.K-9壳聚糖酶酶学性质的研究 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 附综述文章 | 第47-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
