| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 肽类调味剂 | 第12-18页 |
| 1.1.1 呈味肽概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 呈味原理 | 第13页 |
| 1.1.3 呈味肽分类 | 第13-16页 |
| 1.1.4 呈味肽的制备方法 | 第16-17页 |
| 1.1.5 美拉德反应 | 第17-18页 |
| 1.2 食源性表达系统 | 第18-20页 |
| 1.2.1 食源性表达系统概述 | 第18页 |
| 1.2.2 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第18-20页 |
| 1.3 分子模拟 | 第20-21页 |
| 1.3.1 同源建模 | 第20-21页 |
| 1.3.2 分子对接 | 第21页 |
| 1.4 高密度细胞发酵技术 | 第21-25页 |
| 1.4.1 高密度发酵的环境条件 | 第22-23页 |
| 1.4.2 高密度发酵培养模式 | 第23-25页 |
| 1.5 本课题的研究意义和研究内容 | 第25-26页 |
| 2 鲜味肽的分子模拟 | 第26-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 鲜味肽BMP结构优化 | 第26页 |
| 2.2.2 鲜味受体同源建模 | 第26-27页 |
| 2.2.3 BMP与鲜味受体的分子对接 | 第27页 |
| 2.3 实验结论 | 第27-31页 |
| 2.3.1 鲜味肽BMP结构优化 | 第27-28页 |
| 2.3.2 鲜味受体的结构模型 | 第28-29页 |
| 2.3.3 分子对接 | 第29-31页 |
| 2.4 小结 | 第31-33页 |
| 3 重组基因工程菌的构建与摇瓶培养条件优化 | 第33-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第33页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.3 培养基 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 合成鲜味肽基因序列 | 第34页 |
| 3.2.2 质粒提取 | 第34-35页 |
| 3.2.3 重组质粒的构建与表达 | 第35-36页 |
| 3.2.4 枯草芽孢杆菌感受态制备和转化 | 第36-37页 |
| 3.2.5 8BMP的表达 | 第37页 |
| 3.2.6 8BMP的摇瓶培养条件优化 | 第37-38页 |
| 3.2.7 蛋白质的纯化分离 | 第38页 |
| 3.2.8 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第38页 |
| 3.2.9 细胞干重和蛋白浓度的测定 | 第38页 |
| 3.2.10 8BMP的感官评价 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结论 | 第39-45页 |
| 3.3.1 表达载体pMA0911-8BMP的构建 | 第39页 |
| 3.3.2 8BMP的表达与纯化 | 第39-40页 |
| 3.3.3 8BMP蛋白浓度的测定 | 第40-41页 |
| 3.3.4 摇瓶上重组菌培养工艺条件优化 | 第41-44页 |
| 3.3.4.1 单因素实验结果 | 第41-43页 |
| 3.3.4.2 正交实验结果与分析 | 第43-44页 |
| 3.3.5 8BMP的感官评价分析 | 第44-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 4 重组菌的高密度发酵实验 | 第46-50页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.1.1 菌种 | 第46页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 4.1.3 培养基 | 第46页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第46-47页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第47-48页 |
| 4.3 小结 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 A pMA0911质粒基因全序列 | 第56-60页 |
| 附录 B 八拷贝数BMP的氨基酸序列 | 第60页 |
| 附录 C 鲜味受体hT1R1/T1R3序列 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及科研成果 | 第61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |