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南极磷虾反式EPA及DHA抗肿瘤作用的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
主要符号表第19-22页
1 绪论第22-46页
    1.1 肿瘤的危害及研究近况第22-32页
        1.1.1 国内肿瘤发展状况第22-23页
        1.1.2 恶性肿瘤的主要特征第23-24页
        1.1.3 乳腺癌研究近况第24-26页
        1.1.4 肿瘤的主要治疗方法第26-32页
    1.2 不饱和脂肪酸的研究进展第32-35页
        1.2.1 不饱和脂肪酸的分类第32-33页
        1.2.2 多不饱和脂肪酸的食物来源第33-34页
        1.2.3 几种多不饱和脂肪酸的生物学功能第34-35页
    1.3 多不饱和脂肪酸的抗肿瘤作用及机制第35-42页
        1.3.1 多不饱和脂肪酸的抗肿瘤机制第35-37页
        1.3.2 α-亚麻酸的抗肿瘤机制第37-38页
        1.3.3 EPA的抗肿瘤机制第38-41页
        1.3.4 DHA的抗肿瘤机制第41-42页
        1.3.5 EPA/DHA与其他药物联用的抗肿瘤机制第42页
    1.4 南极磷虾油与肿瘤治疗第42-45页
    1.5 本文主要研究思路及研究意义第45-46页
2 南极磷虾油中抗肿瘤物质的分离纯化及结构鉴定第46-63页
    2.1 引言第46页
    2.2 实验材料和仪器第46-48页
        2.2.1 实验材料及细胞来源第46-47页
        2.2.2 实验试剂及仪器第47-48页
    2.3 实验方法第48-51页
        2.3.1 南极磷虾油的提取第48页
        2.3.2 南极磷虾油中不同极性组分的分离第48页
        2.3.3 制备液相色谱分离纯化不同馏分中具有抗肿瘤活性的物质第48-49页
        2.3.4 南极磷虾油及不同极性馏分对HL60、U937及MCF-7细胞的生长抑制第49页
        2.3.5 市售鱼油与阿穆尔鲟鱼肝EPA及DHA的提取与精制第49页
        2.3.6 市售鱼油与阿穆尔鲟鱼肝油的酶解第49页
        2.3.7 分析方法第49-50页
        2.3.8 溶液配制第50-51页
    2.4 结果与讨论第51-61页
        2.4.1 南极磷虾油的体外抗肿瘤活性第51页
        2.4.2 南极磷虾油中不同极性组分的分离第51-53页
        2.4.3 馏分Ⅰ-Ⅳ对MCF-7细胞生长的影响第53-54页
        2.4.4 馏分Ⅱ中抗肿瘤活性物质的分离第54-56页
        2.4.5 化合物Ⅱ-2与Ⅱ-4的结构鉴定第56-59页
        2.4.6 激光散射拉曼光谱检测不同来源EPA及DHA的光学差异第59-61页
    2.5 本章小结第61-63页
3 南极磷虾EPA与DHA的抗肿瘤活性评价第63-72页
    3.1 引言第63页
    3.2 实验材料和仪器第63-64页
        3.2.1 实验材料及细胞来源第63-64页
        3.2.2 试剂和仪器第64页
    3.3 实验方法第64-65页
        3.3.1 不同来源EPA与DHA对各细胞系的生长抑制第64页
        3.3.2 酸价测定第64-65页
        3.3.3 统计学分析第65页
        3.3.4 溶液配制第65页
    3.4 结果与讨论第65-71页
        3.4.1 南极磷虾油EPA及DHA对多种肿瘤细胞的生长的影响第65-67页
        3.4.2 南极磷虾EPA及DHA对人正常肝细胞HL7702生长的影响第67-68页
        3.4.3 虾青素联用南极磷虾EPA及DHA对MCF-7细胞生长的影响第68-71页
    3.5 本章小结第71-72页
4 南极磷虾EPA/DHA诱导MCF-7细胞凋亡的机制第72-84页
    4.1 引言第72-73页
    4.2 实验材料和仪器第73页
        4.2.1 实验材料及细胞来源第73页
        4.2.2 试剂及仪器第73页
    4.3 实验方法第73-75页
        4.3.1 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡第73-74页
        4.3.2 细胞ROS水平检测第74页
        4.3.3 细胞T-AOC、GSH、T-SOD及MDA检测第74-75页
        4.3.4 统计学分析第75页
    4.4 结果与讨论第75-83页
        4.4.1 南极磷虾EPA/DHA对MCF-7细胞凋亡的影响第75-77页
        4.4.2 南极磷虾EPA/DHA对MCF-7细胞ROS水平的影响第77-79页
        4.4.3 南极磷虾EPA/DHA对MCF-7细胞氧化应激的影响第79-81页
        4.4.4 南极磷虾EPA/DHA对HL7702细胞ROS水平的影响第81-83页
    4.5 本章小结第83-84页
5 南极磷虾EPA/DHA对MCF-7迁移及侵袭能力的影响第84-112页
    5.1 引言第84页
    5.2 实验材料和仪器第84-85页
        5.2.1 实验材料及细胞来源第84-85页
        5.2.2 试剂及仪器第85页
    5.3 实验方法第85-93页
        5.3.1 质粒转染第85-86页
        5.3.2 稳定敲除CD95的MCF-7细胞系的构建第86-87页
        5.3.3 RT-PCR检测MCF-7/CD95i细胞系中CD95的沉默效果第87-89页
        5.3.4 蛋白质印迹检测多种蛋白质的表达水平第89-91页
        5.3.5 蛋白质免疫共沉淀检测CD95及Caveolin-1的相互作用第91页
        5.3.6 细胞迁移与侵袭能力的检测第91-92页
        5.3.7 统计分析第92页
        5.3.8 溶液配制第92-93页
    5.4 结果与讨论第93-110页
        5.4.1 稳定敲除CD95的MCF-7细胞系MCF-7/CD95i的构建第93-99页
        5.4.2 细胞系MCF-7/CD95i中CD95沉默效果的检测第99-100页
        5.4.3 南极磷虾EPA及DHA对MCF-7细胞作用浓度区间的确定第100-101页
        5.4.4 南极磷虾EPA对MCF-7细胞迁移及侵袭能力的影响第101-103页
        5.4.5 南极磷虾DHA对MCF-7及MCF-7/CD95i细胞迁移及侵袭能力的影响第103-105页
        5.4.6 南极磷虾DHA对MCF-7细胞中CD95及Caveolin-1表达的影响第105页
        5.4.7 南极磷虾DHA对MCF-7中CD95及Caveolin-1相互作用的影响第105-106页
        5.4.8 南极磷虾DHA对MCF-7细胞FAK/SRC/PI3K/AKT信号通路的影响第106-110页
    5.5 本章小结第110-112页
6 结论与展望第112-114页
    6.1 结论第112页
    6.2 创新点第112-113页
    6.3 展望第113-114页
参考文献第114-126页
附录A第126-135页
作者简介第135页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第135-137页
致谢第137页

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