| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 0 前言 | 第14-27页 |
| 0.1 海藻多糖与海藻多糖降解酶 | 第14-15页 |
| 0.2 卡拉胶 | 第15-18页 |
| 0.2.1 卡拉胶的结构 | 第15-17页 |
| 0.2.2 卡拉胶的理化性质 | 第17页 |
| 0.2.3 卡拉胶的应用 | 第17-18页 |
| 0.3 卡拉胶寡糖 | 第18-21页 |
| 0.3.1 卡拉胶寡糖的制备方法 | 第18-19页 |
| 0.3.2 卡拉胶寡糖的生物活性 | 第19-21页 |
| 0.4 卡拉胶酶 | 第21-25页 |
| 0.4.1 卡拉胶酶的分类 | 第22-23页 |
| 0.4.2 卡拉胶酶的应用研究 | 第23-24页 |
| 0.4.3 卡拉胶酶的分子生物学研究 | 第24-25页 |
| 0.5 立题背景、意义及研究内容 | 第25-27页 |
| 0.5.1 立题背景和意义 | 第25-26页 |
| 0.5.2 研究内容 | 第26-27页 |
| 1 重组菌BL21-HTa-cgkZ产κ-卡拉胶酶的发酵条件优化 | 第27-41页 |
| 1.1 引言 | 第27页 |
| 1.2 材料与仪器 | 第27-28页 |
| 1.2.1 菌种和培养基 | 第27页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第28页 |
| 1.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 1.3.1 发酵过程 | 第28页 |
| 1.3.2 菌体生物量测定 | 第28页 |
| 1.3.3 酶活力的测定 | 第28-29页 |
| 1.3.4 培养基组成优化 | 第29-30页 |
| 1.3.5 响应面法优化诱导条件 | 第30-31页 |
| 1.3.6 不同培养基组成下酶在细胞中的分布 | 第31页 |
| 1.4 结果与分析 | 第31-40页 |
| 1.4.1 碳源对重组菌BL21-HTa-cgkZ产酶的影响 | 第31-33页 |
| 1.4.2 氮源对重组菌BL21-HTa-cgkZ产酶的影响 | 第33页 |
| 1.4.3 金属离子对重组菌BL21-HTa-cgkZ产酶的影响 | 第33-35页 |
| 1.4.4 响应面实验分析诱导条件 | 第35-38页 |
| 1.4.5 酶在细胞中的分布 | 第38-40页 |
| 1.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 2 K-卡拉胶酶的分离纯化 | 第41-54页 |
| 2.1 引言 | 第41页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第41-42页 |
| 2.2.1 实验菌种 | 第41页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第41-42页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第42页 |
| 2.3 实验方法 | 第42-47页 |
| 2.3.1 κ-卡拉胶酶酶活力测定 | 第42页 |
| 2.3.2 蛋白质含量测定 | 第42-43页 |
| 2.3.3 κ-卡拉胶酶的分离纯化 | 第43-46页 |
| 2.3.4 质谱鉴定 | 第46页 |
| 2.3.5 探究κ-卡拉胶酶是否以包涵体形式存在 | 第46-47页 |
| 2.4 结果与分析 | 第47-53页 |
| 2.4.1 粗酶液获得 | 第47页 |
| 2.4.2 CM Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第47-48页 |
| 2.4.3 Sephadex G-75分子筛层析 | 第48页 |
| 2.4.4 SDS-PAGE | 第48-49页 |
| 2.4.5 LC-MS/MS质谱鉴定结果 | 第49-51页 |
| 2.4.6 分离纯化效率 | 第51-52页 |
| 2.4.7 验证κ-卡拉胶酶是否以包涵体蛋白形式存在 | 第52-53页 |
| 2.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 3 κ-卡拉胶酶酶制剂的初步制备 | 第54-68页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第54-55页 |
| 3.2.1 菌种和培养基 | 第54页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 3.3.1 发酵罐放大培养 | 第55页 |
| 3.3.2 κ-卡拉胶酶粗酶液的获取 | 第55页 |
| 3.3.3 沉淀方法 | 第55-57页 |
| 3.3.4 酶制剂的稳定性 | 第57页 |
| 3.3.5 卡拉胶酶酶活回收率的测定 | 第57页 |
| 3.4 结果与分析 | 第57-66页 |
| 3.4.1 重组菌发酵罐放大培养 | 第57-58页 |
| 3.4.2 不同饱和度的硫酸铵对κ-卡拉胶酶酶活回收率的影响 | 第58-59页 |
| 3.4.3 不同体积分数的有机溶剂对κ-卡拉胶酶酶活回收率的影响 | 第59页 |
| 3.4.4 乙醇沉淀时间对κ-卡拉胶酶酶活回收率的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.5 乙醇沉淀pH对κ-卡拉胶酶酶活回收率的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.6 响应面法优化乙醇提取κ-卡拉胶酶 | 第61-65页 |
| 3.4.7 酶制剂的稳定性 | 第65页 |
| 3.4.8 物料成本计算 | 第65-66页 |
| 3.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 结论与展望 | 第68-70页 |
| 论文创新点 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
| 在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第79页 |
