创新点摘要 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 绪论 | 第16-54页 |
1.1 微生物共合成技术研究现状 | 第17-22页 |
1.1.1 微生物共合成的条件 | 第17-18页 |
1.1.2 微生物共合成的分类 | 第18-21页 |
1.1.3 PHB和Ectoine共合成概述 | 第21-22页 |
1.2 Ectoine及其微生物合成 | 第22-34页 |
1.2.1 Ectoine的性质及应用 | 第22-24页 |
1.2.2 Ectoine合成菌株 | 第24-25页 |
1.2.3 Ectoine的微生物代谢途径及相关酶 | 第25-28页 |
1.2.4 Ectoine的合成代谢调控 | 第28-30页 |
1.2.5 Ectoine微生物发酵工艺 | 第30-31页 |
1.2.6 Ectoine合成的影响因素 | 第31-33页 |
1.2.7 Ectoine的提取纯化技术 | 第33-34页 |
1.3 Ectoine分泌型菌株的发现、鉴定及其特点 | 第34-36页 |
1.3.1 Ectoine分泌型菌株的发现、验证及其性质 | 第34-35页 |
1.3.2 分泌型菌株在Ectoine合成方面的优势 | 第35-36页 |
1.4 PHB及其微生物合成 | 第36-47页 |
1.4.1 PHB的性质及应用 | 第36-39页 |
1.4.2 PHB的微生物合成菌株 | 第39-40页 |
1.4.3 PHB的合成代谢途径及相关酶 | 第40-42页 |
1.4.4 PHB的合成代谢调控 | 第42-43页 |
1.4.5 PHB合成的主要影响因素 | 第43-45页 |
1.4.6 PHB的发酵工艺 | 第45-46页 |
1.4.7 PHB的提取方法 | 第46-47页 |
1.5 PHB/Ect微生物共合成研究 | 第47-51页 |
1.5.1 PHB/Ect微生物共合成菌株 | 第47-48页 |
1.5.2 PHB/Ect微生物共合成工艺 | 第48-49页 |
1.5.3 PHB/Ect微生物共合成影响因素 | 第49-51页 |
1.5.4 PHB/Ect微生物共合成产物的提取现状 | 第51页 |
1.6 本文研究的立题背景、研究内容及技术路线 | 第51-54页 |
1.6.1 本文的立题背景 | 第51-52页 |
1.6.2 本文研究内容 | 第52-53页 |
1.6.3 本文研究技术路线 | 第53-54页 |
第2章 实验材料与方法 | 第54-68页 |
2.1 实验材料 | 第54-57页 |
2.1.1 菌株 | 第54页 |
2.1.2 标准品试剂 | 第54页 |
2.1.3 主要试剂 | 第54-55页 |
2.1.4 主要试剂盒 | 第55-56页 |
2.1.5 仪器设备 | 第56-57页 |
2.1.6 培养基 | 第57页 |
2.2 实验方法 | 第57-68页 |
2.2.1 三角瓶培养方法 | 第57页 |
2.2.2 发酵罐发酵方法 | 第57-58页 |
2.2.3 细胞干重测定方法 | 第58页 |
2.2.4 ~1H-NMR鉴定Ectoine方法 | 第58页 |
2.2.5 ~1H-NMR鉴定PHB方法 | 第58-59页 |
2.2.6 凝胶渗透色谱测定PHB分子量和分子量分布 | 第59页 |
2.2.7 Ectoine浓度测定方法 | 第59页 |
2.2.8 PHB浓度测定方法 | 第59-61页 |
2.2.9 磷酸盐的测定方法 | 第61页 |
2.2.10 蛋白质浓度的测定方法 | 第61页 |
2.2.11 谷氨酸单钠浓度测定方法 | 第61页 |
2.2.12 糖蜜组分测定方法 | 第61-62页 |
2.2.13 NaCl胁迫下Ectoine的吸收效率 | 第62页 |
2.2.14 teaA基因克隆、转化及诱导表达 | 第62-64页 |
2.2.15 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法(SDS-PAGE) | 第64页 |
2.2.16 teaA的mRNA表达丰度测定 | 第64-66页 |
2.2.17 TeaA对Ectoine的结合率测定方法 | 第66页 |
2.2.18 基于低渗冲击的Ectoine释放 | 第66页 |
2.2.19 基于低渗冲击的PHB产物释放 | 第66-67页 |
2.2.20 PHB/Ect共合成产物提取回收 | 第67页 |
2.2.21 活细胞计数方法 | 第67-68页 |
第3章 Ectoine分泌型菌株分泌Ectoine机理研究 | 第68-84页 |
3.1 结果与讨论 | 第70-82页 |
3.1.1 菌株对NaCl胁迫的响应 | 第70-71页 |
3.1.2 Ectoine的释放与吸收 | 第71-74页 |
3.1.3 Q-RT-PCR检测teaA基因的mRNA表达丰度差异 | 第74-79页 |
3.1.4 TeaA对Ectoine结合率测定 | 第79-80页 |
3.1.5 推广的Kunte模型 | 第80-82页 |
3.2 小结 | 第82-84页 |
第4章 PHB/Ect共合成Ectoine分泌型菌株选取及其Ectoine合成条件优化 | 第84-97页 |
4.1 结果与讨论 | 第86-96页 |
4.1.1 H. venusta DSM 4743分泌Ectoine | 第86-91页 |
4.1.2 Ectoine分泌型菌株H venusta DSM 4743合成Ectoine条件优化 | 第91-96页 |
4.2 小结 | 第96-97页 |
第5章 Halomonas venusta DSM 4743合成PHB的鉴定及条件优化 | 第97-107页 |
5.1 结果与讨论 | 第98-106页 |
5.1.1 H. venusta DSM 4743合成PHB的~1H-NMR鉴定 | 第98-99页 |
5.1.2 H. venusta DSM 4743合成PHB条件优化 | 第99-106页 |
5.2 小结 | 第106-107页 |
第6章 Halomonas venusta PHB/Ect共合成条件优化及基于分批发酵动力学模型分析的底物流加发酵 | 第107-125页 |
6.1 结果与讨论 | 第108-123页 |
6.1.1 H. venusta DSM 4743 PHB/Ect共合成条件优化 | 第108-112页 |
6.1.2 H. venusta DSM 4743共合成PHB/Ect发酵罐分批发酵 | 第112-113页 |
6.1.3 H. venusta DSM 4743发酵动力学模型的建立 | 第113-121页 |
6.1.4 基于动力学模型分析的PHB/Ect共合成底物流加发酵 | 第121-123页 |
6.2 小结 | 第123-125页 |
第7章 PHB/Ect共合成产物循环制备体系构建 | 第125-139页 |
7.1 结果与讨论 | 第126-137页 |
7.1.1 基于低渗冲击的PHB产物的释放 | 第126-130页 |
7.1.2 低渗冲击释放条件的优化 | 第130-132页 |
7.1.3 PHB/Ect共合成产物的循环制备体系 | 第132-137页 |
7.2 小结 | 第137-139页 |
结论 | 第139-141页 |
参考文献 | 第141-154页 |
攻读学位期间公开发表论文 | 第154-156页 |
致谢 | 第156-158页 |
作者简介 | 第158页 |