| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 赤藓糖醇的特性及功能 | 第12-13页 |
| 1.2 赤藓糖醇研究现状及进展 | 第13-20页 |
| 1.2.1 赤藓糖醇生物合成途径 | 第13-15页 |
| 1.2.2 赤藓糖醇的生产现状 | 第15页 |
| 1.2.3 赤藓糖醇产量强化策略 | 第15-18页 |
| 1.2.4 以甘油为底物发酵生产赤藓糖醇 | 第18-20页 |
| 1.3 渗透压胁迫对微生物发酵影响 | 第20-25页 |
| 1.3.1 渗透胁迫对细胞生长及产物合成影响 | 第21-22页 |
| 1.3.2 微生物渗透胁迫的耐受与响应机制 | 第22-24页 |
| 1.3.3 系统生物学研究微生物高渗胁迫响应 | 第24-25页 |
| 1.4 高渗发酵生产赤藓糖醇面临的问题 | 第25-26页 |
| 1.5 选题的立题依据、研究意义及主要研究内容 | 第26-28页 |
| 1.5.1 立题依据及研究意义 | 第26页 |
| 1.5.2 本文主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 耐甘油高渗高产赤藓糖醇菌株的诱变选育 | 第28-39页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 菌株 | 第28页 |
| 2.2.2 试剂和仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.3 培养基 | 第29页 |
| 2.2.4 培养方法 | 第29页 |
| 2.2.5 ARTP物理诱变方法 | 第29-30页 |
| 2.2.6 DES化学诱变方法 | 第30页 |
| 2.2.7 耐高渗菌株可视化筛选方法 | 第30-31页 |
| 2.2.8 分析方法 | 第31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-38页 |
| 2.3.1 ARTP诱变剂量的确定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 DES诱变剂量的确定 | 第32页 |
| 2.3.3 复合诱变选育结果 | 第32-34页 |
| 2.3.4 遗传稳定性试验 | 第34页 |
| 2.3.5 Y. lipolytica发酵甘油产赤藓糖醇培养条件初步研究 | 第34-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 Y. lipolytica发酵甘油产赤藓糖醇培养成分优化及发酵动力学建立 | 第39-51页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 菌株 | 第39页 |
| 3.2.2 试剂和仪器 | 第39页 |
| 3.2.3 培养基 | 第39-40页 |
| 3.2.4 培养方法 | 第40页 |
| 3.2.5 分析方法 | 第40页 |
| 3.2.6 Plackett-Burman实验设计 | 第40页 |
| 3.2.7 响应面分析(Response Surface Methodology，RSM) | 第40-41页 |
| 3.2.8 人工神经网络 (Artificial Neural Network，ANN) 及遗传算法 (GeneticAlgorithm，GA) | 第41-42页 |
| 3.2.9 动力学模型的建立 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-50页 |
| 3.3.1 赤藓糖醇发酵显著因子的确定 | 第43-44页 |
| 3.3.2 响应面分析 | 第44页 |
| 3.3.3 ANN模型及GA优化 | 第44-47页 |
| 3.3.4 赤藓糖醇分批发酵及动力学模型建立 | 第47-49页 |
| 3.3.5 补料分批发酵最适底物浓度预测 | 第49-50页 |
| 3.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 两阶段渗透压控制甘油补料分批发酵产赤藓糖醇研究 | 第51-62页 |
| 4.1 前言 | 第51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51-52页 |
| 4.2.1 菌株 | 第51页 |
| 4.2.2 试剂和仪器 | 第51页 |
| 4.2.3 培养基 | 第51页 |
| 4.2.4 培养方法 | 第51页 |
| 4.2.5 分析方法 | 第51-52页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第52-61页 |
| 4.3.1 初始甘油浓度对赤藓糖醇发酵的影响 | 第52-54页 |
| 4.3.2 初始恒定渗透压对多元醇发酵的影响 | 第54页 |
| 4.3.3 多元醇发酵最优初始渗透压的确定 | 第54-56页 |
| 4.3.4 不同渗透压对多元醇分批发酵影响 | 第56-58页 |
| 4.3.5 指数期恒定渗透压补料分批发酵策略 | 第58页 |
| 4.3.6 两阶段渗透压控制补料分批发酵策略 | 第58-61页 |
| 4.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 蛋白组学及转录水平研究Y. lipolytica高渗响应机制 | 第62-78页 |
| 5.1 前言 | 第62页 |
| 5.2 材料与方法 | 第62-67页 |
| 5.2.1 菌株 | 第62页 |
| 5.2.2 试剂和仪器 | 第62-63页 |
| 5.2.3 培养基 | 第63页 |
| 5.2.4 培养方法 | 第63页 |
| 5.2.5 分析方法 | 第63页 |
| 5.2.6 二维凝胶电泳 (2-DE) 蛋白样品制备 | 第63-64页 |
| 5.2.7 2-DE操作方法 | 第64页 |
| 5.2.8 2-DE图像采集与数据分析 | 第64页 |
| 5.2.9 质谱分析 (MALDI-TOF/TOF) | 第64页 |
| 5.2.10 多肽数据库搜寻 | 第64-65页 |
| 5.2.11 酵母总RNA提取 | 第65页 |
| 5.2.12 cDNA合成 | 第65页 |
| 5.2.13 RT-PCR引物设计 | 第65页 |
| 5.2.14 RT-PCR实验 | 第65-67页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第67-77页 |
| 5.3.1 Y. lipolytica渗透压耐受性研究 | 第67页 |
| 5.3.2 高渗透压下Y. lipolytica胞内总蛋白 2-DE图谱 | 第67-68页 |
| 5.3.3 渗透压影响Y. lipolytica胞内蛋白质组学研究 | 第68-75页 |
| 5.3.4 渗透压影响Y. lipolytica中心代谢途径关键基因表达水平研究 | 第75-77页 |
| 5.4 本章小结 | 第77-78页 |
| 第六章 渗透压保护剂及抗氧化剂提升赤藓糖醇生产强度 | 第78-86页 |
| 6.1 前言 | 第78页 |
| 6.2 材料与方法 | 第78-79页 |
| 6.2.1 菌株 | 第78页 |
| 6.2.2 试剂和仪器 | 第78页 |
| 6.2.3 培养基 | 第78页 |
| 6.2.4 培养方法 | 第78页 |
| 6.2.5 分析方法 | 第78-79页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第79-85页 |
| 6.3.1 渗透压对Y. lipolytica胞内氨基酸组成及含量的影响 | 第79页 |
| 6.3.2 外源添加甘氨酸和脯氨酸强化赤藓糖醇生产 | 第79-81页 |
| 6.3.3 Y. lipolytica转运外源氨基酸抵御高渗胁迫 | 第81-82页 |
| 6.3.4 抗氧化剂添加强化赤藓糖醇生产 | 第82-84页 |
| 6.3.5 添加渗透压保护剂及抗氧化剂提升赤藓糖醇生产强度 | 第84-85页 |
| 6.4 本章小结 | 第85-86页 |
| 主要结论与展望 | 第86-89页 |
| 主要结论 | 第86-87页 |
| 展望 | 第87-89页 |
| 论文主要创新点 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表论文 | 第100页 |
