| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 前言 | 第10页 |
| 1.2 上皮间质转化过程 （EMT）概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 EMT过程 | 第10页 |
| 1.2.2 EMT发生的原因 | 第10页 |
| 1.2.3 EMT的分类 | 第10-11页 |
| 1.2.4 EMT与肿瘤 | 第11-12页 |
| 1.3 神经细胞粘附分子（NCAM）的概述 | 第12-13页 |
| 1.3.1 神经细胞粘附分子 | 第12页 |
| 1.3.2 NCAM的结构 | 第12-13页 |
| 1.3.3 NCAM的功能 | 第13页 |
| 1.4 肿瘤发生和转移过程中的异常唾液酸化 | 第13-18页 |
| 1.4.1 唾液酸 | 第13-14页 |
| 1.4.2 多聚唾液酸 | 第14-15页 |
| 1.4.3 多聚唾液酸化的神经细胞粘附分子 | 第15-16页 |
| 1.4.4 多聚唾液酸转移酶II和IV | 第16-17页 |
| 1.4.5 肿瘤细胞中的异常唾液酸化 | 第17-18页 |
| 1.5 PSA、NCAM及PSA-NCAM对肿瘤下游信号通路的影响 | 第18-20页 |
| 1.5.1 NCAM或PSA-NCAM通过FGFR信号通路调节细胞增殖与粘附 | 第18-19页 |
| 1.5.2 NCAM在EMT过程中通过非依赖于FGFR的信号通路调节细胞粘附 | 第19页 |
| 1.5.3 PSA与小分子配体结合调节细胞信号通路影响细胞迁移与粘附能力 | 第19-20页 |
| 1.6 本论文的立题依据及主要研究内容 | 第20-22页 |
| 1.6.1 立题依据与研究意义 | 第20页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 人乳腺癌临床样本中NCAM及PSA-NCAM表达水平的研究 | 第22-46页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 人乳腺癌组织芯片、病理切片及乳腺癌肿瘤组织来源 | 第22页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第22-24页 |
| 2.2.3 主要试剂配制 | 第24页 |
| 2.2.4 免疫组织化学技术检测NCAM及PSA-NCAM在乳腺癌组织中的表达 | 第24-25页 |
| 2.2.5 人乳腺癌肿瘤样本RNA及蛋白质共提取 | 第25页 |
| 2.2.6 人乳腺癌肿瘤样本基因扩增检测 | 第25-27页 |
| 2.2.7 N-糖链提取与纯化 | 第27页 |
| 2.2.8 HPLC技术检测N-糖链中Sias含量 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-44页 |
| 2.3.1 乳腺癌组织样本中N-糖链的唾液酸化水平升高 | 第28-29页 |
| 2.3.2 乳腺癌组织样本中NCAM和多聚唾液酸转移酶转录水平表达异常 | 第29-33页 |
| 2.3.3 NCAM及PSA-NCAM在乳腺癌组织芯片检测中表达上调 | 第33-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第三章 EMT细胞模型中NCAM及PSA-NCAM表达水平的研究 | 第46-60页 |
| 3.1 前言 | 第46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-52页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第46-48页 |
| 3.2.2 主要试剂配制 | 第48页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第48-49页 |
| 3.2.4 EMT模型建立与检测 | 第49页 |
| 3.2.5 m RNA水平基因检测 | 第49-50页 |
| 3.2.6 Western blot | 第50页 |
| 3.2.7 Motility实验 | 第50-51页 |
| 3.2.8 Migration实验 | 第51页 |
| 3.2.9 Sias含量检测 | 第51页 |
| 3.2.10 细胞增殖实验（MTT法） | 第51-52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 3.3.1 恶性乳腺癌细胞中EMT标志蛋白表达异常 | 第52-53页 |
| 3.3.2 EMT细胞模型建立 | 第53-55页 |
| 3.3.3 EMT过程促进细胞运动、迁移和增殖能力提高 | 第55-56页 |
| 3.3.4 不同亚型的NCAM在EMT细胞模型中表达上调 | 第56-57页 |
| 3.3.5 EMT细胞模型中Sias表达水平增高 | 第57-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 PSA对NCAM的修饰作用对乳腺细胞行为影响的研究 | 第60-82页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 材料与方法 | 第60-67页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第60-62页 |
| 4.2.2 主要试剂配制 | 第62页 |
| 4.2.3 细胞培养 | 第62页 |
| 4.2.4 细胞免疫荧光实验 | 第62-63页 |
| 4.2.5 细胞外基质粘附实验（adhesion assay） | 第63页 |
| 4.2.6 流式细胞检测 | 第63页 |
| 4.2.7 质谱分析 | 第63-64页 |
| 4.2.8 细胞转染 | 第64-67页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第67-81页 |
| 4.3.1 NCAM-140诱导完整EMT的发生 | 第67-70页 |
| 4.3.2 NCAM-140诱导细胞形态改变，细胞增殖能力及迁移能力提高 | 第70-71页 |
| 4.3.3 NCAM-140和PSA-NCAM在细胞增殖、运动、迁移和粘附中起不同作用 | 第71-74页 |
| 4.3.4 PSA促进乳腺癌恶性细胞以及正常细胞EMT过程中细胞迁移能力的提高 | 第74-76页 |
| 4.3.5 STX和PST在PSA影响NCAM介导的细胞行为变化中起不同作用 | 第76-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-82页 |
| 第五章 NCAM及PSA介导的不同信号通路的研究 | 第82-91页 |
| 5.1 前言 | 第82页 |
| 5.2 材料与方法 | 第82-84页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第82-83页 |
| 5.2.2 主要试剂配制 | 第83页 |
| 5.2.3 细胞培养 | 第83页 |
| 5.2.4 双荧光素酶报告系统实验（Luciferase实验） | 第83-84页 |
| 5.2.5 Wnt信号通路相关基因检测 | 第84页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第84-89页 |
| 5.3.1 PSA介导EGFR/STAT3信号通路的激活 | 第84-87页 |
| 5.3.2 NCAM激活Wnt非依赖性 β-catenin/slug信号通路 | 第87-89页 |
| 5.4 本章小结 | 第89-91页 |
| 主要结论与展望 | 第91-93页 |
| 研究结论 | 第91-92页 |
| 课题展望 | 第92-93页 |
| 论文主要创新点 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-106页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第106页 |
