| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 溶杆菌属(Lysobacter sp.)的概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 溶杆菌属(Lysobacter sp.)生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 溶杆菌属(Lysobacter sp.)研究现状 | 第12页 |
| 1.1.3 溶杆菌属(Lysobacter sp.)对植物病原菌的拮抗作用 | 第12-13页 |
| 1.1.4 溶杆菌属(Lysobacter sp.)生防机理 | 第13页 |
| 1.2 溶杆菌属(Lysobacter sp.)开发利用中尚存在的问题 | 第13-20页 |
| 1.2.1 溶杆菌属(Lysobacter sp.)菌种的发现与鉴定 | 第14页 |
| 1.2.2 溶杆菌属(Lysobacter sp.)细菌活性物质的发现与鉴定 | 第14-15页 |
| 1.2.3 活性物质抑菌机制研究方法 | 第15-18页 |
| 1.2.4 活性物质发酵工艺优化 | 第18-19页 |
| 1.2.5 溶杆菌属(Lysobacter sp.)细菌生物农药产品的开发利用前景 | 第19-20页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 L.sp.SNNU513胞外主要抑菌物质为蛋白质的证据研究 | 第21-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 菌株L sp.SNNU513活化 | 第21-22页 |
| 2.2.2 L.sp.SNNU513拮抗病原真菌实验 | 第22页 |
| 2.2.3 观察L.sp.SNNU513拮抗葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)菌丝生长变化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 L.sp.SNNU513胞外分泌蛋白抑菌实验 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.3.1 L.sp.SNNU513抗真菌活性检测 | 第23-24页 |
| 2.3.2 L.sp.SNNU513对葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)菌丝生长的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.3 胞外分泌蛋白拮抗曲霉菌(Aspergillus)生长 | 第25-27页 |
| 第3章 L.sp.SNNU513胞外抑菌蛋白发酵工艺优化 | 第27-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 培养基 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 3.2.1 培养基优化方法 | 第27-29页 |
| 3.2.2 培养条件优化方法 | 第29-30页 |
| 3.2.3 L.sp.SNNU513活菌计数方法 | 第30页 |
| 3.2.4 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513生长曲线比较 | 第30页 |
| 3.2.5 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513胞外分泌蛋白浓度比较 | 第30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-39页 |
| 3.3.1 发酵培养基优化 | 第30-35页 |
| 3.3.2 发酵条件优化 | 第35-37页 |
| 3.3.3 发酵工艺验证实验 | 第37-39页 |
| 第4章 L.sp.SNNU513发酵工艺优化优越性验证 | 第39-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.4 主要培养基 | 第39-40页 |
| 4.1.5 常用溶液配制 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-48页 |
| 4.2.1 L.sp.SNNU513胞外蛋白提取与SDS-凝胶电泳检测 | 第41-42页 |
| 4.2.2 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513胞外蛋白LC-MS/MS质谱鉴定比较 | 第42-43页 |
| 4.2.3 RNA提取与质量检测 | 第43-44页 |
| 4.2.4 RNA逆转录cDNA | 第44-45页 |
| 4.2.5 荧光实时定量PCR引物的设计与合成 | 第45-46页 |
| 4.2.6 特异性引物常规PCR检测 | 第46页 |
| 4.2.7 荧光实时定量PCR检测 | 第46-47页 |
| 4.2.8 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513分泌几丁质酶活性比较 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-61页 |
| 4.3.1 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513胞外蛋白SDS-PAGE检测 | 第48-49页 |
| 4.3.2 质谱鉴定L.sp.SNNU513胞外蛋白分析 | 第49页 |
| 4.3.3 鉴定L.sp.SNNU513胞外蛋白初步分类 | 第49页 |
| 4.3.4 质谱鉴定L.sp.SNNU513胞外蛋白等电点和分子量预测 | 第49-51页 |
| 4.3.5 质谱鉴定L.sp.SNNU513胞外蛋白参与代谢通路分析 | 第51-54页 |
| 4.3.6 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513潜在抗菌活性蛋白综合分析 | 第54-56页 |
| 4.3.7 RNA质量检测 | 第56页 |
| 4.3.8 特异性引物常规PCR验证 | 第56-57页 |
| 4.3.9 荧光实时定量PCR重复性检测 | 第57-58页 |
| 4.3.10 荧光实时定量PCR溶解曲线分析 | 第58页 |
| 4.3.11 发酵工艺优化前、后L.sp.SNNU513胞外活性蛋白酶基因mRNA相对表达检测比较 | 第58-59页 |
| 4.3.12 发酵工艺优化前、后对L.sp.SNNU513分泌几丁质酶活力影响 | 第59-61页 |
| 第5章 讨论和结论 | 第61-67页 |
| 5.1 讨论 | 第61-66页 |
| 5.1.1 L.sp.SNNU513拮抗植物病原真菌途径 | 第61-62页 |
| 5.1.2 L.sp.SNNU513发酵工艺优化 | 第62-63页 |
| 5.1.3 L.sp.SNNU513胞外蛋白组建立 | 第63-65页 |
| 5.1.4 荧光实时定量PCR技术建立 | 第65-66页 |
| 5.2 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第77页 |
