| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 L-精氨酸及其生产方法 | 第7-8页 |
| 1.1.1 L-精氨酸及其结构特征 | 第7页 |
| 1.1.2 L-精氨酸的生产概况 | 第7-8页 |
| 1.2 L-精氨酸的衍生化反应及其典型产品 | 第8-13页 |
| 1.2.1 L-精氨酸的衍生化反应 | 第8-9页 |
| 1.2.2 L-精氨酸衍生化产品及其酶法合成工艺 | 第9-13页 |
| 1.3 胍基丁胺简介 | 第13-15页 |
| 1.3.1 胍基丁胺及其生理功能 | 第13-14页 |
| 1.3.2 胍基丁胺生产方法的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.3 胍基丁胺酶法生产目前存在的问题 | 第15页 |
| 1.4 本论文的立题依据和主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-25页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 培养基 | 第16-17页 |
| 2.1.3 试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 精氨酸脱羧酶库的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.1 精氨酸脱羧酶库菌株序列比对及进化树分析 | 第18页 |
| 2.2.2 基因组及质粒DNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.4 重组精氨酸脱羧酶的表达和制备 | 第20页 |
| 2.2.5 重组精氨酸脱羧酶库的评价及产物鉴定 | 第20页 |
| 2.3 精氨酸脱羧酶的基本性质表征及产酶条件优化 | 第20-22页 |
| 2.3.1 精氨酸脱羧酶的纯化 | 第20-21页 |
| 2.3.2 精氨酸脱羧酶最适温度及温度稳定性的测定 | 第21页 |
| 2.3.3 精氨酸脱羧酶最适pH及pH稳定性的测定 | 第21页 |
| 2.3.4 金属离子对精氨酸脱羧酶活性的影响 | 第21页 |
| 2.3.5 重组精氨酸脱羧酶表观动力学常数测定 | 第21-22页 |
| 2.3.6 重组精氨酸脱羧酶底物专一性测定及机理分析 | 第22页 |
| 2.4 精氨酸脱羧酶的生产及转化能力评价 | 第22-23页 |
| 2.4.1 重组精氨酸脱羧酶菌株产酶培养基类型及组成优化 | 第22-23页 |
| 2.4.2 重组精氨酸脱羧酶菌株产酶诱导条件优化 | 第23页 |
| 2.4.3 L-精氨酸的转化体系优化 | 第23页 |
| 2.4.4 胍基丁胺的规模化制备方法 | 第23页 |
| 2.5 检测分析方法 | 第23-25页 |
| 2.5.1 L-精氨酸及胍基丁胺的HPLC检测 | 第23页 |
| 2.5.2 酶活测定 | 第23-24页 |
| 2.5.3 琼脂糖凝胶核酸电泳及聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳 | 第24页 |
| 2.5.4 蛋白质含量的测定 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-39页 |
| 3.1 精氨酸脱羧酶基因的挖掘 | 第25-29页 |
| 3.1.1 精氨酸脱羧酶库菌株相似性及进化关系分析 | 第25-26页 |
| 3.1.2 精氨酸脱羧酶库的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.3 酶的功能性筛选及产物鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2 精氨酸脱羧酶SpA9的纯化及性质研究 | 第29-34页 |
| 3.2.1 精氨酸脱羧酶的纯化 | 第29-30页 |
| 3.2.2 精氨酸脱羧酶的酶学性质研究及动力学参数测定 | 第30-32页 |
| 3.2.3 酶的底物专一性及催化机理预测 | 第32-34页 |
| 3.3 胍基丁胺的规模化制备 | 第34-39页 |
| 3.3.1 培养基组分对精氨酸脱羧酶生产的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.2 诱导方式及诱导条件对精氨酸脱羧酶生产的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.3 L-精氨酸转化制备胍基丁胺的体系优化 | 第36-37页 |
| 3.3.4 转化体系的放大与胍基丁胺的规模化制备 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
