地芽胞杆菌CHB1产高温酶液态发酵条件优化及其粗酶液性质初探
| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-25页 |
| ·高温微生物 | 第13-15页 |
| ·高温微生物的界定 | 第13页 |
| ·高温微生物的特点 | 第13-14页 |
| ·高温微生物的耐热机理 | 第14页 |
| ·高温微生物的应用 | 第14-15页 |
| ·Geobacillus sp | 第15-17页 |
| ·Geobacillus sp.的分类地位 | 第15页 |
| ·Geobacillus sp.的特点 | 第15-17页 |
| ·高温酶 | 第17-19页 |
| ·耐高温酶的获取 | 第17页 |
| ·耐高温酶的优势特点 | 第17-18页 |
| ·耐高温酶的耐热机制 | 第18页 |
| ·耐高温酶的应用 | 第18-19页 |
| ·蛋白酶 | 第19-21页 |
| ·蛋白酶的分类 | 第19-20页 |
| ·蛋白酶的应用 | 第20页 |
| ·耐高温蛋白酶 | 第20页 |
| ·耐高温蛋白酶的研究 | 第20-21页 |
| ·耐高温蛋白酶的应用 | 第21页 |
| ·淀粉酶 | 第21-24页 |
| ·淀粉酶的分类 | 第21-23页 |
| ·高温α-淀粉酶 | 第23页 |
| ·高温α-淀粉酶的应用 | 第23页 |
| ·高温α-淀粉酶的研究现状 | 第23-24页 |
| ·本实验的研究意义及目的 | 第24-25页 |
| 2 耐高温蛋白酶的酶学性质与产酶优化 | 第25-52页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂与仪器 | 第25-26页 |
| ·试剂配制 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-32页 |
| ·粗酶液的制备 | 第27页 |
| ·产酶类型试验 | 第27-28页 |
| ·蛋白酶活性测定 | 第28-29页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第29页 |
| ·酶的热稳定性 | 第29页 |
| ·酶的最适 pH | 第29页 |
| ·酶的 pH 稳定性 | 第29-30页 |
| ·不同金属离子、有机溶剂、变性剂对酶的活性的影响 | 第30页 |
| ·蛋白酶选择性平板方法检测蛋白酶的性质 | 第30页 |
| ·产蛋白酶培养基的优化 | 第30-31页 |
| ·液体发酵条件优化 | 第31-32页 |
| ·实验结果与讨论 | 第32-52页 |
| ·蛋白酶标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
| ·蛋白酶的温度性质 | 第33-35页 |
| ·蛋白酶的热稳定性 | 第35-37页 |
| ·蛋白酶的 pH 性质 | 第37-39页 |
| ·蛋白酶的 pH 稳定性 | 第39-40页 |
| ·金属离子对蛋白酶活性的影响 | 第40-42页 |
| ·表面活性剂对蛋白酶活性的影响 | 第42-43页 |
| ·产蛋白酶培养基优化 | 第43-48页 |
| ·蛋白酶培养条件优化 | 第48-50页 |
| ·蛋白酶产酶曲线 | 第50-52页 |
| 3 耐高温淀粉酶的酶学性质与产酶优化 | 第52-77页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·菌株 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·试剂与仪器 | 第52-53页 |
| ·试剂配制 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·粗酶液的制备 | 第53页 |
| ·产酶类型试验 | 第53-54页 |
| ·淀粉酶的活性测定 | 第54-55页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第55页 |
| ·酶的热稳定性 | 第55页 |
| ·酶的最适 pH | 第55-56页 |
| ·酶的 pH 稳定性 | 第56页 |
| ·不同金属离子、有机溶剂、变性剂对酶的活性的影响 | 第56页 |
| ·蛋白酶选择性平板方法检测蛋白酶的性质 | 第56页 |
| ·钙离子对淀粉酶热稳定性的影响 | 第56-57页 |
| ·产蛋白酶培养基的优化 | 第57-58页 |
| ·液体发酵条件优化 | 第58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-77页 |
| ·标准曲线 | 第58-59页 |
| ·淀粉酶的温度性质 | 第59-61页 |
| ·淀粉酶的热稳定性 | 第61-63页 |
| ·淀粉酶的 pH 性质 | 第63-64页 |
| ·淀粉酶的 pH 稳定性 | 第64-66页 |
| ·金属离子对淀粉酶的影响 | 第66-67页 |
| ·变性剂、表面活性剂对淀粉酶活性的影响 | 第67-68页 |
| ·钙离子对淀粉酶热稳定性的影响 | 第68-69页 |
| ·产淀粉酶培养基的优化 | 第69-72页 |
| ·淀粉酶培养条件的优化 | 第72-75页 |
| ·淀粉酶的产酶曲线 | 第75-77页 |
| 4 α-淀粉酶的克隆、分离 | 第77-96页 |
| ·实验材料 | 第77-80页 |
| ·菌株 | 第77页 |
| ·培养基 | 第77页 |
| ·试剂与仪器 | 第77页 |
| ·溶液配制 | 第77-80页 |
| ·实验方法 | 第80-90页 |
| ·基因组总 DNA 的提取 | 第80-81页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第81页 |
| ·PCR 扩增 | 第81-82页 |
| ·感受态细胞制备 | 第82-83页 |
| ·转化与筛选 | 第83页 |
| ·PCR 验证 | 第83-84页 |
| ·5’端基因克隆 | 第84-86页 |
| ·3’端基因克隆 | 第86-88页 |
| ·蛋白的分离 | 第88-90页 |
| ·实验结果与讨论 | 第90-96页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第90-91页 |
| ·通用引物的设计 | 第91页 |
| ·α-淀粉酶部分基因的扩增 | 第91-92页 |
| ·α-淀粉酶部分基因的序列 | 第92-93页 |
| ·染色体步移中引物的设计 | 第93页 |
| ·染色体步移扩增α-淀粉酶两端序列 | 第93-94页 |
| ·α-淀粉酶的分子量的确定 | 第94-96页 |
| 5 结论 | 第96-99页 |
| ·酶活力两种方法的选择 | 第96页 |
| ·胞外酶的研究 | 第96页 |
| ·耐高温蛋白酶 | 第96-97页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第97页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第97页 |
| ·产酶培养基的优化 | 第97-98页 |
| ·α-淀粉酶基因的克隆 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
