| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-14页 |
| 1 木聚糖酶概述 | 第9-14页 |
| ·概念 | 第9页 |
| ·结构特点 | 第9页 |
| ·酶学性质 | 第9-10页 |
| ·温度的影响 | 第9-10页 |
| ·pH 的影响 | 第10页 |
| ·木聚糖酶的发酵生产 | 第10-11页 |
| ·菌种选择 | 第10页 |
| ·诱导培养基的选择 | 第10-11页 |
| ·分离纯化 | 第11页 |
| ·木聚糖酶基因的诱导和表达 | 第11-12页 |
| ·木聚糖酶酶的诱导和表达 | 第11页 |
| ·原核微生物表达 | 第11页 |
| ·真核微生物表达 | 第11-12页 |
| ·木聚糖酶的应用现状 | 第12-14页 |
| ·造纸工业 | 第12页 |
| ·动物饲料工业 | 第12-13页 |
| ·酒精发酵工业 | 第13-14页 |
| 第二章 木聚糖酶基因在两种不同表达体系中的表达 | 第14-44页 |
| 1 材料和方法 | 第14-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第14-15页 |
| ·培养基及其有关溶液的配制 | 第15-16页 |
| ·酵母表达贮存液配制 | 第15页 |
| ·常用培养基的制备 | 第15-16页 |
| ·试剂和仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-24页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第17页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第17-20页 |
| ·转化 | 第20-22页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第22-23页 |
| ·工程菌的培养和目的蛋白酶的诱导 | 第23页 |
| ·表达产物的活性检测及 SDS-PAGE 分析 | 第23-24页 |
| 2 结果和讨论 | 第24-43页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第24-27页 |
| ·表达载体菌液 PCR | 第25页 |
| ·表达载体酶切验证 | 第25-26页 |
| ·重组基因在大肠杆菌中的表达 | 第26-27页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第27-32页 |
| ·酵母的转化和鉴定 | 第32-37页 |
| ·酵母的转化 | 第32-35页 |
| ·酵母转化子的 PCR 鉴定 | 第35-37页 |
| ·木聚糖酶酶活测定和 SDS-PAGE | 第37-42页 |
| ·木聚糖酶的酶活测定 | 第37-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·酵母 GS115 表达的目的蛋白酶活性（DNS 法） | 第42页 |
| ·目的蛋白酶分泌量和表观分子量 | 第42页 |
| ·原因分析 | 第42-43页 |
| 3 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 木聚糖酶的纯化及其纸浆预漂白中的应用 | 第44-65页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·纸浆 | 第44页 |
| ·仪器与试剂 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·各种培养基配制 | 第45页 |
| ·DNS 法测定酶活 | 第45-46页 |
| ·发酵液中蛋白酶含量的测定 | 第46页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| ·木聚糖酶的分离与纯化 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE 及酶谱分析 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶预漂白处理纸浆 | 第48页 |
| ·碱抽提(E)处理 | 第48页 |
| ·结合过氧化氢（H2O2）的漂白 | 第48-49页 |
| ·纸张样品抄取 | 第49页 |
| ·纸张物理指测定方法 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-64页 |
| ·木聚糖酶的制备 | 第49页 |
| ·木聚糖酶的酶活测定 | 第49-50页 |
| ·木聚糖酶的分离纯化 | 第50-51页 |
| ·木聚糖酶的 SDS-PAGE 和酶谱分析 | 第50-51页 |
| ·纸张各项物理指标的检测 | 第51-63页 |
| ·不同 pH 对过氧化氢漂白后纸张各项物理指标的影响 | 第51-53页 |
| ·不同温度对过氧化氢漂后纸张各项物理指标的影响 | 第53-56页 |
| ·不同时间对过氧化氢漂白后纸张各项物理指标的影响 | 第56-58页 |
| ·不同酶添加量对过氧化氢漂后纸张各项物理指标的影响 | 第58-60页 |
| ·不同预漂白处理条件对过氧化氢漂后纸张单一指标的影响比较 | 第60-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 3 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
