| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 中文文摘 | 第4-11页 |
| 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 黑茶概述 | 第11页 |
| 1.2 黑茶中的微生物 | 第11-12页 |
| 1.3 黑茶中微生物的产酶活性及其与茶叶品质形成的关系 | 第12-13页 |
| 1.4.1 单宁酶 | 第14页 |
| 1.4.2 多酚氧化酶 | 第14页 |
| 1.4.3 纤维素酶 | 第14页 |
| 1.4.4 蛋白酶 | 第14-15页 |
| 1.4.5 果胶酶 | 第15-13页 |
| 1.4 外源酶在茶叶加工中的应用 | 第13-15页 |
| 1.5 宏蛋白组学研究策略 | 第15-18页 |
| 1.5.1 宏蛋白组学概念的提出 | 第15页 |
| 1.5.2 宏蛋白组学研究的原理和方法 | 第15-16页 |
| 1.5.3 蛋白质组学的应用 | 第16-17页 |
| 1.5.4 丝状真菌蛋白质组学研究现状 | 第17-18页 |
| 1.6 本课题研究内容和意义 | 第18-21页 |
| 1.6.1 主要研究内容 | 第18页 |
| 1.6.2 研究背景和意义 | 第18-21页 |
| 第二章 黑茶中真菌的分离纯化及其生长特性 | 第21-31页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 供试茶叶 | 第21-22页 |
| 2.2.2 培养基及配置方法 | 第22页 |
| 2.2.3 主要仪器设备与试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.4 黑茶中微生物的分离 | 第23页 |
| 2.2.5 真菌在不同培养基中培养性状比较 | 第23-24页 |
| 2.2.6 真菌的混合培养观察 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 黑茶中“金花”菌在几种培养基上的发生情况 | 第24-25页 |
| 2.3.2 不同培养基对“金花”菌生长的影响 | 第25-27页 |
| 2.3.3 “金花”菌在不同培养基上的菌落形态特征 | 第27页 |
| 2.3.4 “金花”菌的混合培养情况 | 第27-28页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第28-31页 |
| 第三章 “金花”菌胞外产酶情况的分析 | 第31-45页 |
| 3.1 前言 | 第31页 |
| 3.2 材料与方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 供试菌株 | 第31-32页 |
| 3.2.2 培养基及配置 | 第32页 |
| 3.2.3 主要仪器设备与试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.4 菌株产单宁酶检测 | 第33页 |
| 3.2.5 菌株产淀粉酶的检测 | 第33页 |
| 3.2.6 菌株产脂肪酶的检测 | 第33页 |
| 3.2.7 菌株产纤维素酶的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.8 菌株产蛋白酶的检测 | 第34页 |
| 3.2.9 菌株L-7的形态学观察 | 第34页 |
| 3.2.10 菌株L-7基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 3.2.11 PCR反应体系和扩增条件 | 第34-35页 |
| 3.2.12 系统发育树的构建 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-43页 |
| 3.3.1 单宁酶平板检测 | 第35-36页 |
| 3.3.2 淀粉酶平板检测 | 第36-38页 |
| 3.3.3 脂肪酶平板检测 | 第38页 |
| 3.3.4 纤维素酶平板检测 | 第38-39页 |
| 3.3.5 蛋白酶平板检测 | 第39-41页 |
| 3.3.6 菌株L-7菌落、菌丝形态观察 | 第41页 |
| 3.3.7 菌株的ITS测序及系统发育树构建 | 第41-43页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 菌株L-7发酵茶叶胞外总蛋白提取方法的初探 | 第45-59页 |
| 4.1 前言 | 第45页 |
| 4.2 材料与方法 | 第45-51页 |
| 4.2.1 供试菌株及茶叶样品 | 第45页 |
| 4.2.2 供试培养基 | 第45-46页 |
| 4.2.3 主要设备及药品 | 第46-47页 |
| 4.2.4 主要试剂配制 | 第47-48页 |
| 4.2.5 真菌孢子悬液的制备 | 第48页 |
| 4.2.6 菌株液体发酵培养及发酵液的预处理 | 第48页 |
| 4.2.7 不同茶叶固体发酵 | 第48-49页 |
| 4.2.8 不同含水量的茶叶发酵 | 第49页 |
| 4.2.9 不同发酵时间的比较 | 第49页 |
| 4.2.10 不同浸提方法的比较 | 第49页 |
| 4.2.11 胞外可溶性总蛋白的沉淀 | 第49-50页 |
| 4.2.11.1 硫酸铵沉淀-透析法 | 第49-50页 |
| 4.2.11.2 透析-10%TCA-丙酮沉淀法 | 第50页 |
| 4.2.11.3 酚抽提法 | 第50页 |
| 4.2.11.4 硫酸铵沉淀-超滤法 | 第50页 |
| 4.2.11.5 2D clean-up kit试剂盒抽提法 | 第50页 |
| 4.2.12 总蛋白含量的测定 | 第50-51页 |
| 4.2.13 蛋白质的聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳 | 第51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-57页 |
| 4.3.1 牛血清蛋白标准曲线 | 第51-52页 |
| 4.3.2 不同培养方法对菌株产胞外可溶性蛋白的影响 | 第52页 |
| 4.3.3 不同茶叶发酵对胞外可溶性蛋白产量的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.4 含水率对发酵茶叶胞外可溶性蛋白产量的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.5 发酵时间发酵茶胞外可溶性蛋白产量的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.6 不同浸提方法对菌株L-7产胞外可溶性蛋白的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.7 不同蛋白沉淀浓缩方法的比较 | 第56-57页 |
| 4.3.7.1 蛋白定量 | 第56-57页 |
| 4.3.7.2 SDS-PAGE检测 | 第57页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 菌株L-7发酵茶叶胞外宏蛋白组学的分析 | 第59-71页 |
| 5.1 前言 | 第59页 |
| 5.2 材料与方法 | 第59-64页 |
| 5.2.1 供试材料 | 第59页 |
| 5.2.2 主要仪器及试剂 | 第59-61页 |
| 5.2.3 主要试剂配制 | 第61页 |
| 5.2.4 菌株L-7固体发酵培养 | 第61-62页 |
| 5.2.5 菌株L-7胞外可溶性总蛋白的提取 | 第62页 |
| 5.2.6 胞外可溶性总蛋白的定量 | 第62页 |
| 5.2.7 双向凝胶电泳分析 | 第62-64页 |
| 5.2.7.1 第一向IEF等电聚焦 | 第62-63页 |
| 5.2.7.2 胶条平衡 | 第63页 |
| 5.2.7.3 第二向垂直电泳 | 第63-64页 |
| 5.2.7.4 考马斯亮蓝G-250染色 | 第64页 |
| 5.2.8 MALDI-TOF-TOF串联质谱鉴定 | 第64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 5.3.1 蛋白样品定量 | 第64页 |
| 5.3.2 菌株L-7发酵茶叶后胞外宏蛋白组学分析 | 第64-65页 |
| 5.3.3 质谱鉴定 | 第65-67页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第67-71页 |
| 第六章 结论与展望 | 第71-75页 |
| 6.1 结论 | 第71-72页 |
| 6.2 论文的创新之处 | 第72页 |
| 6.3 进一步的工作 | 第72-75页 |
| 附录1 | 第75-77页 |
| 附录2 | 第77-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 个人简历 | 第93-97页 |
