| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 阿魏酸 | 第7-8页 |
| 1.1.1 阿魏酸的生物化学特性 | 第7页 |
| 1.1.2 阿魏酸的生理活性 | 第7-8页 |
| 1.2 阿魏酸酯酶研究进展 | 第8-11页 |
| 1.2.1 阿魏酸酯酶简介 | 第8页 |
| 1.2.2 阿魏酸酯酶来源及性质 | 第8-9页 |
| 1.2.3 阿魏酸酯酶分类 | 第9-10页 |
| 1.2.4 阿魏酸酯酶应用 | 第10-11页 |
| 1.3 肠道中的阿魏酸酯酶 | 第11-12页 |
| 1.4 论文的立题依据 | 第12页 |
| 1.5 论文主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-18页 |
| 2.1 实验菌株与载体 | 第13页 |
| 2.2 主要试剂及仪器 | 第13-14页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第13页 |
| 2.2.2 主要试剂和工具酶 | 第13-14页 |
| 2.3 培养基 | 第14页 |
| 2.4 实验方法 | 第14-18页 |
| 2.4.1 大肠杆菌阿魏酸酯酶活力的平板确认 | 第14页 |
| 2.4.2 阿魏酸酯酶酶活的测定 | 第14页 |
| 2.4.3 蛋白质含量测定 | 第14-15页 |
| 2.4.4 蛋白电泳 | 第15页 |
| 2.4.5 细菌基因组的提取 | 第15页 |
| 2.4.6 目的基因的克隆与重组表达载体的构建 | 第15-16页 |
| 2.4.7 重组大肠杆菌的诱导表达 | 第16页 |
| 2.4.8 重组蛋白的分离纯化 | 第16-17页 |
| 2.4.9 重组蛋白酶学性质的研究 | 第17页 |
| 2.4.10 重组酶底物特异性测定 | 第17页 |
| 2.4.11 动力学常数的测定 | 第17-18页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第18-38页 |
| 3.1 E.coli BL21（DE3）产阿魏酸酯酶活力的确认 | 第18页 |
| 3.2 候选阿魏酸酯酶基因的克隆表达 | 第18-23页 |
| 3.2.1 候选阿魏酸酯酶基因序列及氨基酸序列的分析 | 第18页 |
| 3.2.2 候选基因的克隆 | 第18-20页 |
| 3.2.3 重组菌的诱导表达 | 第20-23页 |
| 3.3 重组蛋白MhpC、YbfF、BioH分离纯化及酶学特性的研究 | 第23-38页 |
| 3.3.1 重组蛋白的分离纯化 | 第23-27页 |
| 3.3.2 pH对重组酶酶活的影响 | 第27-30页 |
| 3.3.3 温度对重组酶酶活的影响 | 第30-34页 |
| 3.3.4 重组酶的底物专一性 | 第34-36页 |
| 3.3.5 重组酶动力学参数的测定 | 第36-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-39页 |
| 主要结论 | 第38页 |
| 展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44-45页 |
| 附录2：基因序列 | 第45-51页 |
| 附录3：蛋白保守结构域分析 | 第51-52页 |
