转谷氨酰胺酶的分离纯化及膜固定化的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1 绪论 | 第12-19页 |
| ·课题背景 | 第12-13页 |
| ·转谷氨酰胺酶的研究现状 | 第13-15页 |
| ·转谷氨酰胺酶的简介 | 第13-14页 |
| ·转谷氨酰胺酶催化机理 | 第14页 |
| ·转谷氨酰胺酶的酶学性质 | 第14-15页 |
| ·转谷氨酰胺酶的应用 | 第15页 |
| ·交联蛋白结晶技术 | 第15-16页 |
| ·交联蛋白结晶技术简介 | 第15-16页 |
| ·交联蛋白晶体的制备 | 第16页 |
| ·交联蛋白晶体的特性 | 第16页 |
| ·固定化酶研究进展简介 | 第16-18页 |
| ·传统固定方法 | 第17页 |
| ·酶的膜固定化方法 | 第17-18页 |
| ·本文研究的目的与意义 | 第18页 |
| ·课题的来源及主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·课题来源 | 第18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 转谷氨酰胺酶的分离纯化及部分酶学性质 | 第19-30页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第19-20页 |
| ·仪器与设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-23页 |
| ·转谷氨酰胺酶酶活的测定原理及方法 | 第20-21页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第21页 |
| ·乙醇沉淀 | 第21页 |
| ·硫酸铵饱和度的选择 | 第21页 |
| ·超滤 | 第21页 |
| ·Sephadex G-100柱层析 | 第21页 |
| ·转谷氨酰胺酶纯度的测定 | 第21-22页 |
| ·纯化酶的部分酶学性质研究 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-29页 |
| ·L-谷氨酸γ-单羟肟酸标准曲线及其方程 | 第23页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第23-24页 |
| ·超滤 | 第24-25页 |
| ·Sephadex G-100柱层析 | 第25页 |
| ·纯度鉴定及分子量测定 | 第25-26页 |
| ·纯酶的酶学性质 | 第26-29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 3 交联酶晶体及其稳定性的研究 | 第30-47页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·材料与方法 | 第30-31页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·试验仪器 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-33页 |
| ·酶晶体活力的测定 | 第31页 |
| ·酶蛋白含量的测定 | 第31页 |
| ·酶结晶量的测定方法 | 第31页 |
| ·转谷氨酰胺酶微晶体的制备 | 第31页 |
| ·转谷氨酰胺酶微晶体的交联 | 第31-32页 |
| ·转谷氨酰胺酶微晶体的收集 | 第32页 |
| ·交联酶晶体结构特征检测 | 第32页 |
| ·交联酶晶体酶学性质的研究 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-46页 |
| ·转谷氨酰胺酶结晶条件的确定 | 第33-39页 |
| ·转谷氨酰胺酶晶体交联条件的确定 | 第39-41页 |
| ·交联酶晶体的结构特征检测 | 第41-43页 |
| ·交联酶晶体酶学性质研究 | 第43-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 4 转谷氨酰胺酶晶体的膜固定化 | 第47-68页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·仪器与设备 | 第47-48页 |
| ·固定化方法研究 | 第48-51页 |
| ·固定化转谷氨酰胺酶晶体的酶学性质 | 第51-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-67页 |
| ·紫外光引发接枝反应条件对接枝率的影响 | 第53-55页 |
| ·间隔臂的引入 | 第55-57页 |
| ·戊二醛的活化 | 第57-58页 |
| ·酶晶体的固定化 | 第58-59页 |
| ·BSA标准曲线绘制 | 第59页 |
| ·固定化条件对酶活性的影响 | 第59-60页 |
| ·固定化酶晶体膜表面化学结构的表征 | 第60-63页 |
| ·固定化酶晶体膜的酶学性质的研究 | 第63-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
