摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 柚苷酶概述 | 第10-13页 |
1.1.1 柚苷酶简介 | 第10页 |
1.1.2 柚苷酶的作用机理 | 第10-11页 |
1.1.3 柚苷酶的应用 | 第11-13页 |
1.1.3.1 柑橘类果汁脱苦 | 第11-12页 |
1.1.3.2 生产鼠李糖和普鲁宁 | 第12页 |
1.1.3.3 制备抗生素 | 第12页 |
1.1.3.4 酒类增香 | 第12-13页 |
1.1.3.5 生物转化类固醇 | 第13页 |
1.2 柚苷酶生产菌种的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 柚苷酶生产菌种及来源 | 第13-14页 |
1.2.2 柚苷酶生产菌种的筛选方法 | 第14-15页 |
1.2.2.1 透明圈法 | 第14-15页 |
1.2.2.2 定性滤纸显色法 | 第15页 |
1.2.2.3 半固体培养基高层试管法 | 第15页 |
1.3 柚苷酶发酵工艺概述 | 第15-17页 |
1.3.1 固态发酵法 | 第16页 |
1.3.2 液态发酵法 | 第16-17页 |
1.4 柚苷酶活力的检测方法 | 第17-18页 |
1.4.1 Davis分光光度法 | 第17页 |
1.4.2 高效液相色谱法 | 第17-18页 |
1.4.3 对硝基苯酚分光光度法 | 第18页 |
1.5 共培养发酵技术研究概况 | 第18-19页 |
1.5.1 共培养发酵的方式 | 第18-19页 |
1.5.2 微生物共培养的应用 | 第19页 |
1.6 本论文的研究意义及主要内容 | 第19-21页 |
第二章 实验方法 | 第21-30页 |
2.1 实验材料与设备 | 第21-23页 |
2.1.1 实验原料 | 第21页 |
2.1.2 实验菌种 | 第21页 |
2.1.3 实验药品 | 第21-22页 |
2.1.4 实验设备 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-25页 |
2.2.1 培养基 | 第23页 |
2.2.2 单孢子悬液的制备 | 第23-24页 |
2.2.3 种子液的制备 | 第24页 |
2.2.4 测定方法 | 第24-25页 |
2.2.4.1 平板透明圈的测定 | 第24页 |
2.2.4.2 柚苷酶活性的测定 | 第24-25页 |
2.2.4.3 β-葡萄糖苷酶活性的测定 | 第25页 |
2.2.4.4 生物量的测定 | 第25页 |
2.2.4.5 pH值的测定 | 第25页 |
2.2.4.6 数据分析 | 第25页 |
2.3 共培养生产菌株的筛选 | 第25-26页 |
2.3.1 柚苷酶生产菌株的平板筛选 | 第25-26页 |
2.3.2 共培养菌种组合的确定 | 第26页 |
2.4 真菌纯培养发酵产柚苷酶的工艺研究 | 第26-27页 |
2.4.1 黑曲霉FFCC uv-11纯培养发酵产酶研究 | 第26页 |
2.4.2 根霉FFCC 3201纯培养发酵产酶研究 | 第26-27页 |
2.5 真菌共培养发酵产柚苷酶的工艺研究 | 第27-28页 |
2.5.1 共培养发酵时间对柚苷酶活性的影响 | 第27页 |
2.5.2 共培养接种时间间隔对柚苷酶活性的影响 | 第27页 |
2.5.3 共培养接种量及接种比例对柚苷酶活性的影响 | 第27页 |
2.5.4 共培养发酵初始pH值对柚苷酶活性的影响 | 第27页 |
2.5.5 验证实验 | 第27-28页 |
2.6 真菌共培养强化柚苷酶发酵的有机酸分析 | 第28-30页 |
2.6.1 真菌发酵产物的气相色谱-质谱( GC-MS)分析 | 第28页 |
2.6.2 真菌发酵产物的高效液相色谱( HPLC)分析 | 第28-30页 |
第三章 结果与讨论 | 第30-52页 |
3.1 共培养菌株的筛选 | 第30-34页 |
3.1.1 柚苷酶生产菌的平板筛选 | 第30-31页 |
3.1.2 柚苷酶酶活测定曲线 | 第31-32页 |
3.1.3 β-葡萄糖苷酶酶活测定曲线 | 第32-33页 |
3.1.4 共培养菌种组合的确定 | 第33-34页 |
3.2 真菌纯培养发酵产柚苷酶的工艺研究 | 第34-36页 |
3.2.1 黑曲霉FFCC uv-11纯培养发酵产酶研究 | 第34-35页 |
3.2.2 根霉FFCC 3201纯培养发酵产酶研究 | 第35-36页 |
3.3 真菌共培养发酵产柚苷酶的工艺研究 | 第36-42页 |
3.3.1 共培养发酵时间对柚苷酶活性的影响 | 第36-37页 |
3.3.2 共培养接种时间间隔对柚苷酶活性的影响 | 第37-38页 |
3.3.3 共培养接种量及接种比例对柚苷酶活性的影响 | 第38-39页 |
3.3.4 共培养发酵初始pH值对柚苷酶活性的影响 | 第39-41页 |
3.3.5 共培养验证实验 | 第41-42页 |
3.4 真菌共培养强化柚苷酶发酵的有机酸分析 | 第42-52页 |
3.4.1 真菌发酵产物的气相色谱-质谱( GC-MS)分析 | 第42-44页 |
3.4.2 有机酸分离的高效液相色谱图 | 第44-47页 |
3.4.3 高效液相色谱法(HPLC)测定有机酸标准曲线的绘制 | 第47-49页 |
3.4.3.1 草酸标准曲线 | 第47页 |
3.4.3.2 乳酸标准曲线 | 第47-48页 |
3.4.3.3 乙酸标准曲线 | 第48页 |
3.4.3.4 柠檬酸标准曲线 | 第48-49页 |
3.4.4 黑曲霉FFCC uv-11纯培养有机酸HPLC分析 | 第49-50页 |
3.4.5 根霉FFCC 3201纯培养有机酸HPLC分析 | 第50页 |
3.4.6 共培养有机酸HPLC分析 | 第50-51页 |
3.4.7 共培养验证实验有机酸HPLC分析 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |